На кпп: Замки на КПП. Купить и установить механический замок КПП

Содержание

Гарант Консул — блокиратор коробки переключения передач

AUDICADILLACCHEVROLETCITROENDAEWOODATSUNDFMFORDGREAT WALLHONDAHYUNDAIINFINITIJEEPKIALADALAND ROVERLEXUSLIFANMAZDAMITSUBISHINISSANOPELPEUGEOTRENAULTSEATSKODASSANG YONGSUBARUSUZUKITAGAZTOYOTAVOLKSWAGENVOLVO

Противоугонный бесштыревой замок  устанавливается на КПП легкового автомобиля. Механизм переключения передач блокируется стальным ригелем. Замок препятствует переключению передач, предотвращает несанкционированное использование автомобиля.

Модельный ряд замков Гарант Консул охватывает несколько сотен моделей автомобилей иностранного и отечественного производства.

Преимущества:

  1. 1. Высокая криминальная стойкость
    • — В блокираторе КПП «Гарант Консул» применяется механизм секретов Abloy Protec (1,97 млрд. комбинаций механизма секретов), установленный в толстостенном корпусе
    • — Механизм переключения передач блокируется ригелем из высокопрочной стали
    • — Толщина стенок конструкции замка не менее 4мм
  2. 2. Удобство эксплуатации
    • Для блокировки КПП необходимо только повернуть ключ в механизме секретов. Это обеспечивает простоту в использовании. Приоритетный вывод механизма секретов в верхнюю часть консоли обеспечивает максимальное удобство водителю.
  3. 3. Отличная эргономика
    • Размер выходной части механизма секретов до 14 мм, что в 2,5-3 раза меньше, чем у иных производителей. Это позволяет установить замок с минимальным вмешательством в интерьер автомобиля на любую, самую сложную с точки зрения геометрии поверхность.
  4. 4. Высокая надежность.
    • Кронштейны замка «Гарант Консул» выполнены в виде сварной конструкции из листовой стали (толщина 5 мм). Поверхность кронштейнов после сварки покрывается слоем черной матовой порошковой краски, которая обеспечивает высокую коррозионную стойкость изделия и органично вписывается в интерьер автомобиля.
  5. 5. Гарантия
    • Гарантия на замок Гарант Консул 1 год с даты продажи конечному потребителю, но не более 1,5 лет с даты производства.

Порядок работы

Блокирование и разблокирование механизма переключения передач происходит при помощи поворота ключа ABLOY на 180 градусов по часовой и против часовой стрелки. Под действием пружины замковый механизм блокирует механизм переключения передач ригелем из закаленной стали. Блокирование замка производится только в определенном положении рычага переключения передач.

 

Как работает блокиратор КПП Гарант Консул

 

Блокиратор КПП Гарант Консул защитил от угона Toyota Land Cruiser 200

Порядок пропуска через КПП физических лиц

Проход физических лиц на Объект осуществляется через КПП по пропускам, выданным ОГАУЗ «ТКПБ» в соответствии с утверждёнными видами и формами (Приложение № 1 к настоящему Регламенту).
Пропуска оформляются в отделе кадров ОГАУЗ «ТКПБ» с обязательной регистрацией в специальном журнале учета пропусков.

Непосредственное осуществление пропускного режима возлагается на сотрудников службы охраны ОГАУЗ «ТКПБ». В случае заключения соответствующего договора с частной охранной организацией с даты заключения данного договора ответственность за допуск на территорию Объекта и выход (выезд) с его территории в течении времени оказания услуг возлагается на ЧОО.

Для работников оборудуются рабочие места на КПП.
Требования работников, контролирующих соблюдение пропускного и внутриобъектового режима, в части соблюдения правил данных режимов, пожарной безопасности обязательны для исполнения всеми работниками ОГАУЗ «ТКПБ», а также посетителями и работниками иных организаций и учреждений, расположенных на территории Объекта. При неподчинении законным требованиям данных работников, нарушители могут быть переданы сотрудникам полиции.

По периметру Объекта устанавливаются камеры наружного видеонаблюдения и ведется видеозапись.
Посетителям запрещается вносить (ввозить) на территорию Объекта оружие, боеприпасы (кроме должностных лиц правоохранительных органов, прибывших по служебным вопросам), взрывоопасные, горючие, легковоспламеняющиеся вещества и материалы, алкогольные напитки, психотропные, наркотические и отравляющие вещества.
Лица с признаками алкогольного или наркотического опьянения на территорию Объекта не допускаются. 

Посетители допускаются на территорию Объекта по оформляемым на КПП разовым пропускам с обязательной регистрацией в журнале регистрации посетителей. Оформление пропуска производится при предъявлении документа, удостоверяющего личность (паспорт гражданина РФ либо другой приравненный к нему документ).

Работник подразделения, в которое направлялся посетитель, делает отметку в пропуске с указанием времени посещения подразделения посетителем и проставлением своей подписи и её расшифровки.
При выходе с территории Объекта разовые пропуска с отметкой о посещении сдаются на КПП.  

Сотрудники МВД РФ, ФСБ РФ, Прокуратуры РФ, органов опеки и попечительства, аварийных, надзорных, пожарных, санитарных, иных государственных служб, министерств, ведомств и инспекций, судьи, адвокаты пропускаются на территорию Объекта по служебным удостоверениям с регистрацией их в книге посетителей.

В случае совершения представителями вышеуказанных органов официальных действий или проверок в отношении ОГАУЗ «ТКПБ», его работников или пациентов, указанные сотрудники беспрепятственно пропускаются на территорию Объекта после уведомления главного врача или начальника отдела по гражданской обороне и мобилизационной работе ОГАУЗ «ТКПБ», а в случае их отсутствия – дежурного администратора. Основанием для проведения проверки является предъявление служебного удостоверения и официального предписания на право проведения проверки или санкции суда.  

Пропуск на Объект лиц, прибывших на запланированные мероприятия, осуществляется при предъявлении документов, удостоверяющих личность, на основании заявки, оформленной ответственным за проводимое мероприятие работником и утвержденной главным врачом ОГАУЗ «ТКПБ» либо заместителем главного врача, курирующим проведение данного мероприятия.  

При первичном обращении пациента с целью самостоятельной госпитализации ему выписывается разовый пропуск на основании документа удостоверяющего личность, который сдается пациентом в приемное отделение ОГАУЗ «ТКПБ» с последующим его возвратом дежурной медицинской сестрой на КПП в срок до 18 часов 30 минут. Выход пациентов по завершению лечения с территории Объекта осуществляется на основании сообщения на КПП лечащего врача.

Вход и выход пациентов на и за территорию Объекта осуществляется на основании списка составленного заведующим отделением и при обязательном сопровождении работника ОГАУЗ «ТКПБ».
 

Замок на КПП Construct (Конструкт)

Для угона Вашей машины нужны минуты, если не секунды!

Угон автомобилей является одним из самых распространенных видов краж. Каждый год в Европе угоняются сотни тысяч машин, а во всем мире количество угонов порядка нескольких миллионов. Краденые автомобили перепродают на запасные части или экспортируют в соседние страны. Таким образом угнанную машину не представляется возможным отследить.

Одним из самых эффективных способов предотвращения кражи Вашего автомобиля является установка механической противоугонной системы. Особой популярностью среди механических противоугонных средств защиты автомобиля от угона пользуются механические противоугонные замки. Неоспоримое достоинство механических противоугонных систем состоит в том, что открыть эти системы представляется возможным исключительно контактным методом, т.е. только при помощи поворота ключа и находясь в салоне машины. В противовес электронным противоугонным системам,

механические противоугонные системы невозможно деактивировать дистанционно.

 

Среди механических противоугонных средств, таких как блокираторы руля и замки капота,

замок на КПП, на сегодняшний день, является самым часто устанавливаемым видом механических средств защиты от угона. Замок на КПП Construct (замок Конструкт) представляет собой массивную систему, жестко устанавливаемую на автомашину с помощью специальных срывных болтов. Противоугонный замок на КПП фиксирует селектор коробки переключения скоростей в позиции «паркинг», в случае автоматической или роботизированной коробки, или в позиции «задний ход» в варианте механической КПП.

Надежность замков на КПП

Механические противоугонные системы обладают крайне высокой стойкостью к взлому.

Замок на коробку передач CONSTRUCT (Конструкт) устойчив к химическим и тепловым воздействиям, например, жидкий азот, высверливанию, взлому и открытию бампингом или при помощи отмычек. Работа замка на КПП CONSTRUCT не зависит от аккумулятора, его невозможно отключить с помощью кодграббера или другого электронного устройства.

Простота

Замок на КПП CONSTRUCT (Конструкт) прост в использовании. Чтобы закрыть замок на коробку передач CONSTRUCT владельцу машины достаточно установить селектор переключения скоростей в нужное положение и закрыть замок поворотом ключа. Открытие замка на КПП происходит еще легче — требуется просто произвести поворот ключ в замке и достать его. Механическое противоугонное системы CONSTRUCT исключает случайное запирание.

Качество

Для обеспечения высокого качества механические противоугонную системы CONSTRUCT (Конструкт) производятся, исключительно, в Чехии.

Механические противоугонные системы (обычно это замки) разрабатываются и производятся специфически, учитывая год выпуска, тип КПП и другие характеристики определенной марки и модели автомобиля. Обычно, замки на КПП монтируются на штатное крепление в кузове машины. Благодаря такому конструктивному решению установка механического противоугонного замка исключает сверление или проведение каких либо иных мероприятий, нарушающих невредимость поверхности кузова — по сути, замок производится как еще одна составляющая машины. Еще одним достоинством модельного конструктива замка на КПП является то, что конструкция замка обеспечивает эстетичный и аккуратный вид установленного замка в интерьере автомобиля. Как правило это выход личинки замка в пластиковой консоли, что делает возможным управление замком. Устройство расположено таким образом, чтобы не нарушать вид салона машины и не нарушать работу прочих элементов автомобиля.

Устойчив к высверливанию и взлому

Нельзя отключить кодграббером или глушилкой

Не зависит от аккумулятора автомобиля

Не влияет на грантию автомобиля

Подобрать ЗАМок НА КПП

Выберите Вашу машину

или закажите звонок и наш специалист бесплатно подберет оптимальный вариант защиты Вашего автомобиля

Чехлы на ручку КПП из полиэтилена

Главная » Чехлы на кпп

Чехлы на рукоять для коробки передач выполнены из полиэтилена низкого/высокого давления. Используются для защиты деталей автомобиля от пыли, загрязнений, влаги, повреждений, царапин. Чехол расширен в верней части для удобного размещения КПП, снизу – заужен, фиксируется на рукояти с помощью резинок. Предназначен только для одноразового использования, после применения утилизируется.


Характеристики чехлов

размер 13х13 см
материал полиэтилен
тираж от 3000 штук

Преимущества

  • подходит для разных моделей автомобилей,
  • легко надевается и снимается,
  • защищает от внешних воздействий,
  • не рвётся

Сфера применения

  • автосалоны (предпродажная подготовка),
  • станции технического обслуживания,
  • автосервисы,
  • дилерские центры

Почему вам стоит заказать чехлы у нас

  • мы предлагаем жёсткие чехлы из ПНД и мягкие гладкие на ощупь из ПВД,
  • минимальное количество – от 3000 шт. без логотипа, от 20 000 шт. с логотипом,
  • предлагаем услуги печати логотипа/товарного знака предприятия методом полноцветной печати – флексографии

Как заказать

Для заказа чехлов на рукоять КПП сообщите менеджерам материал чехла, размеры, плотность плёнки, тираж.


Примеры чехлов нашего производства

*Минимальный тираж без логотипа от 3000 штук, с логотипом от 20 000 штук



Что будет, если держать руку на КПП в движении

Человек так устроен, что, научившись чему-то однажды, ему будет очень непросто переучиваться, даже если он что-то делает неправильно. Многие водители старой школы укоряют молодых за то, что те постоянно держат руку на ручке КПП. По мнению опытных автомобилистов, это ускоряет износ коробки. Но так ли это на самом деле?

Старинные страхи

Мнение о том, что лежащая рука на селекторе КПП может привести к поломке коробки передач, берёт своё начало во временах заднеприводных классических автомобилей. На таких автомобилях ручка селектора торчала напрямую из коробки передач, и считалось, что, если будете давить сверху рукой, сможете ускорить износ механизма выбора передач. В реальности эти страхи — полнейшая ерунда.

Во-первых, вес руки достаточно небольшой, чтобы оказать настолько разрушительное действие на механизм переключения передач. Во-вторых, конструкция ручки такова, что невозможно, нажимая на неё сверху, оказывать давление на механизм выбора передач. Мы будем давить на шарнир, а он уже на корпус коробки. В-третьих, даже прикладывая значительное усилие на ручку, намеренно пытаясь что-то сломать, максимум, чего мы добьёмся — это оторвём ручку.

А как на современных автомобилях?

С современного автомобильного авторынка заднеприводные автомобили давно уже вытеснены на задворки, лишь немногие премиум-бренды остались верны традициям. Сейчас все автомобили с передним приводом, а значит и конструкция коробки передач у них другая. Больше нет заднего моста и карданного вала, изменилось и расположение коробки — теперь она находится под капотом, а не в туннеле кузова. Ручка селектора КПП больше не связана напрямую с коробкой.

Все движения ручкой передаются на коробку при помощи тросов. Поэтому сколько бы вы ни давили на ручку переключения передач, коробку сломать не получится. Поэтому можете смело держать руку там, где вам удобно, ничего вы не сломаете и не ускорите износ.


Фото с интернет-ресурсов

Решение для КПП, проходных / Автотранспорт / Решения

Отсутствие контроля въезда/выезда и учета транспортных средств на контрольно-пропускных пунктах (КПП) и проходных приводят к таким проблемам, как хищения, снижение безопасности, злоупотребление должностными полномочиями, неупорядоченный транспортный поток и т.д.

Автоматизация доступа транспорта на территорию с помощью системы Автомаршал повышает быстродействие проходной, позволяет централизованно управлять несколькими КПП с одного рабочего места и обеспечивает полный контроль въезда/выезда транспортных средств даже при отсутствии оператора.

Рассчитать проект

Возможные объекты применения:
  • Предприятия.
  • Логистические комплексы.
  • Таможенные терминалы.
  • Строительные площадки.
  • Закрытые охраняемые зоны.
  • Государственная граница.

Решаемые задачи
  • Автоматический контроль въезда/выезда и учет транспортных средств на территории.
  • Предотвращение хищений за счет фотофиксации автомобилей и грузов.
  • Автоматизация работы сотрудников службы безопасности, сокращение времени принятия решения о допуске каждого конкретного автомобиля на территорию предприятия.
  • Сохранение информации о всех въезжающих и выезжающих автомобилях, статистика и отчеты.
  • Интеграция с существующими на предприятии информационными системами позволяет автоматизировать бизнес-процессы за счет использования информации о движении транспортных средств.

Возможности системы
  • Гибкая настройка пользовательских списков для ограничения доступа посторонних автомобилей или автомобилей из «черного» списка.
  • Учет транспортных средств с применением бесконтактных карт и RFID-меток.
  • Считывание переднего и заднего номеров составных транспортных средств.
  • Отправление уведомлений о факте проезда по sms и электронной почте.
  • Ручное и автоматическое управление внешними устройствами (шлагбаумы, светофоры и др.).
  • Удаленная работа с системой через браузер с различных устройств (планшет, смартфон, компьютер) благодаря web-клиенту.

Обзор функционала Автомаршал за 6 минут

Типовой состав системы на 1 въезд и 1 выезд
Программное обеспечение
  • Автомаршал, скорость автомобилей до 30 км/час, 2 канала распознавания.
  • Программный модуль управления внешними устройствами.
  • Web-клиент.
Оборудование
Компьютер Core i3 / 4GB/ 256Gb SSD/ Win10Pro (Win7Pro) 1 шт.
Видеокамера 2 шт.
Прожектор 2 шт.
Блок питания для видеокамер и прожекторов 1 шт.
Коммутатор 1 шт.
Шлагбаум 2 шт.
Модуль ввода-вывода (управления внешними устройствам) 1 шт.
Кабели (питание и Ethernet) комплект

Опционально
Канал видеонаблюдения для фотофиксации груза в кузове авто 2 шт.
Программный модуль «Распознавание дополнительных стран» 1 шт.
Обзорная камера 2 шт.
Светофор 2 шт.
Датчики для детекции автомобиля и автоматического управления шлагбаумом комплект


Получить больше информации о системе и ознакомиться с успешными проектами можно по ссылкам:

ПОДРОБНЕЕ        УСПЕШНЫЕ ПРОЕКТЫ        Рассчитать проект

По вопросам приобретения ПО «Автомаршал» обращайтесь к нашим менеджерам:

Тимофеева Анастасия 
по телефону:  8-800-700-35-17 (для звонков по России), +7 (8202) 20-16-34 
по электронной почте:  [email protected] 

Чехлы для ручки КПП — ROZETKA

Одной из самых изнашиваемых деталей салона автомобиля является чехол для ручки коробки переключения передач. Родной чехол на ручку передач устанавливается на кулису и достаточно быстро приходит в негодность вследствие чего его приходится заменять. Сегодня купить чехол на ручку кпп можно в интернете и лучше всего это сделать на сайте ROZETKA.

Какими бывают чехлы на ручки КПП

Для того чтобы коробка переключения передач и ее ручка были под защитой, следует позаботится о приобретении чехла на верхнюю и нижнюю части этой конструкции.

  • Для нижней части используют кожаный чехол или кулису из кожзаменителя. Конечно, долговечнее будут чехлы из натуральной кожи, однако они и значительно дороже. Этот аксессуар достаточно универсальный и подобрать его для своего автомобиля не составит труда.
  • Набалдашник для верхней ручки чаще всего силиконовый. Они бывают самых разнообразных цветов и форм, соответственно можно подобрать образец для любой марки и модели автомобиля.

Как выбрать чехол для кулисы ручки переключения передач

Самый простой способ купить новый чехол — сделать заказ онлайн в интернет-магазине ROZETKA. Здесь доступны чехлы для ручки КПП для самых разных марок автомобилей, в том числе для ВАЗ, Шкода, Фиат, Пежо, Chevrolet, Daewoo, Ford, Kia, Nissan, Opel, Renault, Toyota, Volkswagen и многих других автомобильных брендов. Чехлы для ручки кпп в каталоге рассортированы в рубрикаторе по материалам, производителям и маркам машин, для которых подходит тот или иной образец.  

По размерам чехлы на ручки достаточно стандартны — отличия есть в выборе лишь для легковых и грузовых автомобилей. Основным же фактором выбора является материал изготовления: это моежт быть натуральная кожа, автоткань или популярная в среде автомобилистов алькантара, специально разработанная для обивки салонов авто искусственная замша.

Как снять чехол кпп?

Не менее распространенный вопрос среди тех, что хочет сэкономить на визите в автосервис. Сменить чехол ручки переключения передач достаточно просто своими силами. Для того, чтобы снять старый чехол кпп, следует первым делом аккуратно отсоединить нижнюю часть от пластиковых креплений, которые соединяют чехол с коробкой переключения передач. Нужно быть очень осторожным, чтобы не повредить пластик. После чего чехол нужно вывернуть наизнанку и перерезать кусачками или ножом пластиковую кабельную стяжку в верхней части изделия, которая обхватывает ручку коробки передач.

«Мы живем несправедливой жизнью»

Военный контрольно-пропускной пункт Израиля: «Мы живем несправедливой жизнью»

Военные контрольно-пропускные пункты Израиля: «Мы живем несправедливой жизнью»

Фоторепортаж Activestills

Каждое утро, до рассвета, десятки тысяч палестинских рабочих пересекают израильские военные контрольно-пропускные пункты по пути на работу в израильские и палестинские города за «зеленой линией».

Рабочие со всего оккупированного Западного берега выстраиваются в очередь перед открытием контрольно-пропускных пунктов, чтобы добраться до своих рабочих мест вовремя. Для многих это означает встать и уйти из дома глубокой ночью.

Около 70 000 палестинцев с израильскими разрешениями на работу совершают ежедневные поездки на работу. Они работают за «зеленой линией» из-за высокого уровня безработицы на палестинских территориях — побочного продукта 50-летней израильской оккупации.

Ежедневно с 4 до 6 утра контрольно-пропускные пункты начинают заполняться, поскольку тысячи людей протискиваются по полосам, похожим на клетки.Многие прибывают в 3 часа ночи или раньше, чтобы занять свое место в очереди, более чем за час до открытия контрольно-пропускного пункта.

Ограниченные сроком действия их израильских разрешений, они должны вернуться домой после окончания дня. Некоторые, однако, решают рискнуть ночевать на своих рабочих местах из-за условий на контрольно-пропускных пунктах. В свою очередь, они видят свои семьи только по выходным.

Есть около 11 контрольно-пропускных пунктов, через которые палестинцы с израильскими разрешениями на работу могут попасть в Израиль.Они переполнены и унизительны, лишены инфраструктуры и санитарии. Из-за экстремального заточения в таких маленьких помещениях некоторые палестинские рабочие были раздавлены насмерть.

Компания Activestills посетила пять контрольно-пропускных пунктов и задокументировала ежедневную деградацию, с которой сталкиваются рабочие.

Многие просили остаться неизвестными.

Главный контрольно-пропускной пункт для палестинцев, работающих в Восточном Иерусалиме и других центральных городах.Он блокирует дорогу между Вифлеемом и Иерусалимом.

Подсчитано, что 15 000 рабочих ежедневно проходят через контрольно-пропускной пункт 300.

Я ушел из дома в 4 утра. Сейчас 6:20. Еще час потребуется, чтобы пересечь контрольно-пропускной пункт. Это наша жизнь, трудная и полная проблем.

— Аноним

Народу становится много с 3:30 утра. И так каждый день.

— Кровать

Если вы упадете на землю, вы можете умереть.

— Аноним

Я ежемесячно плачу 700 долларов за разрешение на работу.

— Салех

Расположен в северо-западном палестинском городе Калькилья, где высокий уровень безработицы из-за израильской разделительной стены.

По оценкам, около 4000 рабочих со всей северной части оккупированного Западного берега ежедневно пересекают контрольно-пропускной пункт Эяль.

В Израиле заработать быстрее.Год в Израиле равен пяти годам на Западном берегу.

— Саид

Это все несправедливо. Мы живем несправедливой жизнью, но у нас нет альтернативы.

— Салех

Очереди начинают расти в 3 часа ночи. Некоторые люди переходят дорогу, чтобы найти работу на другой стороне. Если они не находят работу, они возвращаются.

— Абдулразек

Расположен к югу от северного палестинского города Тулкарем.

По оценкам, ежедневно через контрольно-пропускной пункт Тайбе проходят до 15 000 палестинских рабочих.

В 2014 году двое палестинцев были раздавлены насмерть из-за чрезмерной переполненности контрольно-пропускного пункта.

Все пытаются зарабатывать на жизнь, работая на стороне Израиля. Они едут туда, не будучи уверенными, вернутся ли они к своим семьям. Только Бог знает. Это очень большая трагедия.

— Аноним

Ситуация с разрешениями сложная.Есть люди, которые ими торгуют. Мой сын платит за разрешение 500 долларов в месяц — это примерно треть его зарплаты. Другие разрешения могут стоить до 700 долларов в месяц.

— Омар

Расположен недалеко от палестинского города Хеврон на юге оккупированного Западного берега.

От 7000 до 8000 палестинских рабочих ежедневно пересекают контрольно-пропускной пункт Таркумия.

В 1998 году израильские солдаты на контрольно-пропускном пункте открыли огонь по автобусу с невооруженными палестинскими рабочими, убив трех человек.

За то время, что я здесь нахожусь, на этом КПП пострадало более 20 рабочих. У некоторых были сломаны руки и ноги.

— Рабеа

Мы выходим из дома в 4 утра, чтобы покинуть контрольно-пропускной пункт в 6:30 или 7:00. Ситуация здесь ненормальная и очень многолюдно. Люди ломают здесь руки каждый день.

– Джамал

Есть много людей, которые не могут прийти на работу вовремя.Если вы не придете на работу к 7 утра, ваш работодатель выгонит вас.

– Джамал

Я приезжаю сюда в воскресенье и возвращаюсь домой в пятницу. Я вижу свою семью два дня в неделю.

– Аноним

Главный пункт пересечения границы между Рамаллахом и Иерусалимом.

Благодаря своему расположению между двумя крупными палестинскими центрами жизни, на контрольно-пропускной пункт приходится треть всех перемещений между оккупированным Западным берегом и Израилем, что делает его еще более тесным для рабочих.

По оценкам, не менее 6000 палестинских рабочих ежедневно пересекают Каландию.

Кто строит эти [израильские] поселения? Рабочие! А потом жалуемся, почему Израиль строит поселения. Мы, рабочие, их строим, но альтернативы нет. Мы делаем это не для того, чтобы строить поселения, но если мы не будем работать, мы не сможем жить.

— Ваджи

Работа в Израиле навязана нам.В палестинских секторах доход очень низкий. Даже когда люди образованы и имеют ученые степени, до них никому нет дела. У них нет вакансий, поэтому они работают везде, где могут.

— Ваджи

Я прихожу сюда каждый день и ситуация такая же. Я прибываю в 4 утра. Они [израильские солдаты] говорят нам «подождать немного», пока они играют на своих телефонах.

– Набиль

Контрольно-пропускной пункт — Атлантика

В современном мире мы привыкли ждать, и когда первый раз проезжаешь через контрольно-пропускной пункт на Западном берегу, думаешь: О, это выглядит как-то знакомо.Это будет не так уж плохо. Мне просто нужно немного постоять в очереди .

Но тогда видно, что это не простая очередь, а скорее воронка — достаточно широкая в начале, чтобы в ней могли стоять человек тридцать, в конце навеса под открытым небом с крышей из гофрированной жести, но сужаясь в нескольких ярдах дальше, где все толкаются к двум высоким турникетам. Однажды днем ​​осенью 2004 года (но это могло быть и сегодня) потребовалось сорок минут, чтобы добраться до фронта в Каландии, контрольно-пропускном пункте между Рамаллахом и Иерусалимом.Это было упражнение в постепенном сжатии: я перешел от некоторого выбора движения (я направлюсь к турникету слева ) к его полному отсутствию, так как мои шаги были укорочены людьми впереди, мои руки были прижаты люди рядом со мной, и люди сзади ударили меня по плечу.

Иногда очередь на контрольно-пропускном пункте создает ощущение мгновенной общности: мы все занимаем пространство друг друга, все вместе страдаем, и разговор может принести облегчение. Мужчина справа от меня, как оказалось, был врачом.Он возвращался домой в Восточный Иерусалим с работы в клинике в Рамаллахе, как он это делает каждый день. «Стратегия Шарона состоит в том, чтобы сделать все настолько плохо, что мы уйдем», — сказал он. — Он забывает, что нам больше некуда идти.

Поскольку это был мой первый проход, я выразил некоторую озабоченность по поводу сжатия, которому мы все больше подвергались. Он предупредил меня, чтобы я ничего не роняла — например, удостоверение личности, — потому что теперь невозможно будет наклониться и поднять его. Он выглядел усталым, когда сказал мне, что было еще хуже, пока израильтяне не установили металлическую крышу и не создали тень.

Быть запертым, как я, в толпе из 200 или 300 человек — это своего рода временное заключение. Если толпа запаникует, у всех нас будут проблемы. Я думал об этом, потому что всего месяц назад террористы, направлявшиеся из Дженина в Хайфу, испугались и взорвали устройство на этом самом блокпосту, убив двух палестинцев и ранив шестерых израильских полицейских. А всего за день до этого палестинская женщина взорвала себя в иерусалимском районе Френч-Хилл, всего в нескольких милях от Каландии, убив двух израильских полицейских.И все же у меня было ощущение, что если я сойду с ума, скажем, от клаустрофобии, окружающие будут изо всех сил стараться меня выпустить. Подобная ситуация повышает чувствительность к уровню стресса соседей.

Мы с доктором разошлись через несколько минут, как раз когда подошли к, казалось бы, самой сложной части испытания: пытались решить, когда выйти на открытое пространство через турникет. Давление сзади стало настолько сильным, что решение теперь было почти полностью вне моего контроля; Мне пришлось отклониться назад, чтобы не врезаться в концы поворотных стержней.Я также должен был быть осторожен, чтобы не наступить на ногу ребенку или пожилому человеку. К моему облегчению, мускулистый мужчина, подошедший к турникету, одновременно сказал: «Здравствуйте, друг мой» и использовал свою массу, словно дамбу на фоне океана, чтобы создать для меня небольшой дискреционный карман. Через минуту я прошел через турникет по собственному желанию и сказал: « Шукран » — «Спасибо».

Это должно было быть облегчением оказаться на другой стороне, приближаясь к концу сарая, за исключением того, что здесь оружие.В тот день было видно около десяти израильских солдат, все молодые и вооруженные боевой экипировкой, в том числе штурмовыми винтовками М4. Теперь дело пошло быстрее. Молодая женщина-военнослужащая осмотрела содержимое моей наплечной сумки. В десяти шагах от нее другой солдат, защищенный стеной из бетонных блоков, толстым пластиковым окном и очками, вел меня вперед. Я передал ему паспорт и журналистское удостоверение. Он изучал их довольно долго, остановившись (как это принято у израильских чиновников) на визе, которую я получил много лет назад для туристической поездки в арабскую страну.Затем он молча вернул их и повернулся к человеку позади меня. Это означало, что я закончил. Выйдя на свежий воздух, на шумную стоянку такси и импровизированный базар, которые происходят на каждом контрольно-пропускном пункте, я почувствовал себя так, как будто меня условно-досрочно освободили.

С завершением вывода войск из Газы и исчезновением в памяти смерти Ясира Арафата внимание всего мира снова обращается к земле, которая остается одной из самых спорных в мире: Западному берегу. Насилие, которое пошло на убыль в течение нескольких месяцев после смерти Арафата, снова набирает обороты; теракты-смертники вернулись в Израиль, поскольку поселения продолжают вторгаться на палестинскую землю.Интифада никогда не прекращалась, как и израильские солдаты, которые продолжают усердно работать, чтобы держать ситуацию в узде.

Израиль управляет своей оккупацией Западного берега, где проживает 1,3 миллиона палестинцев и 400 000 израильских поселенцев и по площади он примерно равен штату Делавэр, в значительной степени путем ограничения передвижения палестинцев. Самым известным символом этого ограничения является новый «забор безопасности», который все еще строится вдоль и к востоку от «зеленой линии», которая отмечает фактическую границу Израиля до 1967 года.Хотя забор вызвал споры из-за того, что он вторгается на палестинскую территорию и отрезает палестинских фермеров от их земли, он значительно сократил количество взрывов террористов-смертников внутри самого Израиля. Но более важным, чем защитный забор для повседневной жизни на Западном берегу, является господство Израиля над палестинскими дорогами. Соглашения Осло в 1993 году и Осло-2 в 1995 году предоставили палестинцам право управлять своими городами, но предоставили Израилю контроль над основными дорогами на территориях.Таким образом, контрольно-пропускные пункты, которые когда-то были немногочисленными и временными, стали многочисленными и часто постоянными. Хотя их количество варьируется в зависимости от ситуации с безопасностью, во время моего визита на Западном берегу было усеяно около семидесяти контрольно-пропускных пунктов. Сегодня их почти столько же.

У каждой контрольной точки свой персонаж. Большинство из них разрешают проезд как транспортным средствам, так и пешеходам, но некоторые пропускают только пешеходов. Некоторые закрываются в сумерках и открываются на рассвете, не позволяя проходу ночью; другие закрыты для транспортных средств в ночное время, но пропускают пешеходов.Некоторые позволяют всему пройти, как только солдаты ушли на ночь. А некоторые меняют правила изо дня в день.

В дополнение к постоянным контрольно-пропускным пунктам, таким как Каландия, которые обычно имеют разделители движения и бетонные блоки, за которыми стоят солдаты, а иногда и крыши для тени и баки с питьевой водой, существуют «летающие контрольно-пропускные пункты», которые существуют всего несколько часов. и может управляться всего двумя или тремя солдатами или пограничниками, часто действующими по данным разведки.

Для чего нужны контрольно-пропускные пункты? Израильские официальные лица говорят, что, как и почти все остальное на Западном берегу, контрольно-пропускные пункты предназначены для обеспечения безопасности — они позволяют израильской армии перехватывать оружие и бомбардировщики. Армия надеется найти некоторые из них путем случайных поисков; другие могут быть захвачены через могущественное израильское разведывательное агентство Шин Бет, которое ежедневно предоставляет обновленную информацию о том, кого и что искать. Но солдаты на контрольно-пропускных пунктах проводят большую часть своего времени, изучая документы, удостоверяющие личность, выданные Израилем и Палестинской администрацией каждому палестинцу в возрасте от шестнадцати лет и старше.Если человек живет в Наблусе, но направляется в Вифлеем, солдаты могут повернуть его назад. А может и нет. Произвольность соблюдения правил контрольно-пропускных пунктов делает жизнь палестинцев невыносимой. Для них контрольно-пропускные пункты стали не просто бюрократическими раздражителями, а эмблемой израильского высокомерия.

Будь то пересечение защитного ограждения или стратегические точки внутри территорий, контрольно-пропускные пункты показывают человеческое лицо оккупации — оно настолько близко, насколько это возможно для некоторых израильтян и палестинцев.Лицо редко бывает дружелюбным: молчаливые солдаты встречают обиженных гражданских лиц, изучают их документы и решают (часто по настроению, как говорят палестинцы), могут ли они перейти на другую сторону. Иногда солдаты заставляют палестинцев часами ждать в зонах ожидания. Для солдат на контрольно-пропускных пунктах жизнь часто бывает невыносимо скучной, вызывающей стресс и отчуждающей. Для палестинцев это монументально разочаровывает, унизительно и вызывает гнев.

Контрольно-пропускные пункты тоже могут быть жестокими.Во время моего визита израильские военные осудили командира контрольно-пропускного пункта Хавара к югу от Наблуса за избиение многочисленных палестинцев и разбитие стекол десяти палестинских такси. Один из армейских операторов заснял на видео, как командир бьет палестинца по лицу кулаком, в то время как его малыш держится за полы его рубашки; Затем звук камеры уловил звуки ударов человека кулаком или ногой в живот внутри хижины, куда его затащил командир.По словам палестинцев, одним из самых жестоких унижений, которым они подвергаются, является капризное, а иногда и многочасовое задержание машин скорой помощи, перевозящих палестинских пациентов; по данным Палестинской группы по наблюдению за соблюдением прав человека, по меньшей мере 71 палестинец погиб из-за ненужных задержек на контрольно-пропускных пунктах.

По данным израильских военных, с начала второй интифады в сентябре 2000 года в общей сложности 56 израильских солдат и офицеров пограничной полиции были убиты на контрольно-пропускных пунктах и ​​блокпостах.В 2003 году к югу от Иерусалима палестинец с винтовкой, завернутой в молитвенный коврик, застрелил двоих человек. В декабре 2004 г. члены ХАМАС и ФАТХ прорыли тоннель на несколько сотен ярдов, чтобы заложить более тонны взрывчатки под контрольно-пропускным пунктом в Рафахе, недалеко от египетской границы с Газой. В результате нападения погибли пятеро солдат. А в декабре прошлого года палестинец, проходивший через контрольно-пропускной пункт Каландия, прямо там, где я шел, смертельно ранил солдата ножом в шею.

Омер (Армия обороны Израиля запретила мне использовать его фамилию или фамилии солдат, которых я знал) — жилистый, приветливый рыжеволосый мужчина двадцати шести лет, который командует элитной ротой. 202-й десантно-штурмовой батальон.Его рота состояла примерно из сотни молодых призывников, и осенью 2004 года они заняли базовый лагерь на вершине холма между Рамаллахом и Наблусом, где я пробыл почти две недели. База расположена недалеко от крупного шоссе, известного как 60-роуд.

Дорога 60 проходит с севера на юг через весь Западный берег и является основным связующим звеном между городами Дженин, Наблус, Рамаллах, Иерусалим, Вифлеем и Хеврон. В древние времена маршрут пролегал на север до Дамаска и на юг до Беэр-Шевы.Проблема с 60-й дорогой, как сказал мне Омер, в том, что она стала разъездом для террористов. Защитное ограждение в Иерусалиме и во многих районах на юге еще не завершено — по мнению военных, это одна из причин того, что 31 августа 2004 г., за десять дней до моего прибытия в Израиль, террористы-смертники из Хеврона смогли убить шестнадцать человек. в двух отдельных нападениях на автобусы в Беэр-Шеве. В последнее время другие бомбардировщики все чаще используют дорогу 60 для путешествия на юг из политически неспокойных северных городов.Таким образом, в дополнение к Хаваре и другим постоянным контрольно-пропускным пунктам вдоль дороги, израильская армия использует подразделения, подобные отряду Омера, для ее патрулирования. «Террорист-смертник, направляющийся из Наблуса в Иерусалим, должен будет пройти мимо нас, и мы попытаемся его остановить», — сказал мне Омер. Его компания устанавливает летающие контрольно-пропускные пункты, проводит миссии по наблюдению и производит ночные аресты в близлежащих арабских деревнях, обычно действуя по наводке ШАБАКа.

Хотя Омеру еще за двадцать, Омер уже почти восемь лет отслужил в армии.Он до сих пор носит в ноге шрапнель после боевых действий против «Хезболлы» в Ливане в конце 1990-х годов, но он ностальгирует по тем дням, потому что на этой работе он участвовал в настоящих боях, что для него является настоящей солдатской работой. «Воин «Хизбаллы» был похож на меня, одет как я — у него был пистолет», — сказал мне Омер однажды днем ​​в своем командирском трейлере. «Когда один из наших парней упал, это было похоже на то, эй, они стреляли, мы стреляли. Для нас это была армия. Это было сексуальнее. И не было вопроса в плане конфликта.Была Хезболла, явно террористическая организация. Но здесь миссия сложнее объяснить солдатам — чего вы добились в плане терроризма, как выиграть время, купить разведданные, и в конце концов вы их поймаете».

Он продолжил сравнение. На Западном берегу «сопутствующий ущерб невероятно выше», сказал он. «В Ливане деревни были либо с вами, либо против вас — они либо воевали вместе с вами, либо стреляли в ответ. Здесь побочный ущерб с моральной точки зрения невероятно проблематичен, и это серьезная проблема в долгосрочной перспективе.

Невинные гражданские лица, другими словами, неизбежно страдают от работы армии на территориях. «Обыскивать дом, искать пистолет, брать с собой детей от девятнадцати до двадцати одного года и говорить им, что можно перевернуть дом вверх дном, чтобы найти один пистолет. Это плохо для четверых детей этого парня — это очевидно. Но что неясно до пятнадцатого раза, так это то, что это вредно для тебя.

Израильские солдаты размещены на контрольно-пропускных пунктах на срок от двух до шести месяцев; три месяца это нормально.Перед нынешним назначением на дороге 60 между Рамаллахом и Наблусом рота Омера провела в Хаваре немногим более трех месяцев. Он открыто признал, что большая часть постов на хаваре была утомительной и удручающей. Вахтовым методом солдаты дежурили по восемь часов, отдыхали по восемь часов с небольшими перерывами. Каждый день через Хавару проходило 5000 палестинцев — масса людей, с которыми было трудно общаться. Многие из них были склонны игнорировать или даже спорить с солдатскими приказами.На этом фоне солдатам Омера приходилось постоянно выискивать в толпе человека, который мог быть запрограммирован на то, чтобы взорвать их.

К счастью для морального духа компании, два инцидента в конце публикации показали, что тяжелая работа может приносить дивиденды. В первом женщина-солдат, заглянув в большую спортивную сумку десятилетнего мальчика, обнаружила сотовый телефон с подключенными проводами, а под ним бомбу. На допросе оказалось, что мальчик ничего не знает о бомбе. Судя по всему, мужчина возле блокпоста всего несколько минут назад предложил ему несколько шекелей, чтобы он пронес сумку.Армейские чиновники считают, что бомбардировщик просто пытался пронести бомбу через контрольно-пропускной пункт, но они всегда беспокоятся о том, что Омер называет «стандартной угрозой»: вероятность того, что бомбардировщик, будучи обнаруженным, взорвет бомбу, где бы он ни находился.

Второй инцидент произошел девять дней спустя. Солдат Омера по имени Дорон, девятнадцати лет, из города Ришон ле-Цион, к югу от Тель-Авива, в то утро дежурил на контрольно-пропускном пункте. Он рассказал мне, что произошло: «Было, может быть, два часа ночи.м., а мне позвонили из Шин Бет и сказали: «В вашей очереди бомбардировщик!» А я сказал: «Как они выглядят?» Они сказали: «Может, девочка, может, мальчик, может, четырнадцать, может, шестнадцать». ‘» Шин Бет отслеживает передачи сотовых телефонов в районе блокпоста и подслушивает звонок террориста. Дорон немедленно закрыл контрольно-пропускной пункт и приказал всем, ожидавшим в очереди, отступить, а затем по одному подойти к солдатам для тщательного обыска. «Потом ребенок — мы сказали: «Сними куртку», а он не хотел; его трясло, — вспоминал Дорон.«Но потом он это сделал, и мы могли видеть что-то под его майкой. Поэтому мы сказали: «Подними рубашку». Так он и сделал». Когда солдаты увидели, что на мальчике был жилет, начиненный взрывчаткой, они направили на него оружие. Был задействован робот-бомба, который доставил мальчику ножницы, которыми он отрезал жилет. Затем солдаты взорвали бомбу.

Армия хотела, чтобы мир узнал об опасностях, с которыми сталкиваются ее солдаты на палестинских территориях, поэтому израильские официальные лица вызвали стрингера AP в Наблусе и организовали телекамеру для записи инцидента.Изображения испуганного мальчика, одетого в жилетку и поднявшего руки, вскоре разлетелись по всему миру. Позже, на память об этом эпизоде, солдаты Омера сделали футболку с изображением мальчика и надписью: «Мне обещали 72 девственницы на небесах, но вместо этого я получил солдат из 202».

Отсидев свой срок на контрольно-пропускном пункте Хавара, Омер и его компания провели несколько полных адреналина месяцев в Наблусе, городе, бурлящем политикой и восстаниями, который израильтяне считали главным источником терроризма.Их опыт был ужасным и, по словам Омера, волнующим. Под покровом ночи они проскальзывали в город — иногда на бронетранспортере, иногда пешком, иногда переодевшись — арестовывать подозреваемых. Они проехали через обнищавший лагерь беженцев Балата на юго-восточной окраине Наблуса, пытаясь вызвать на себя огонь повстанцев, чтобы обнаружить их убежища. Они снесли дома палестинцев, которые, по данным разведки, совершали нападения на Израиль.В одном случае палестинский мальчик бросил камень, который разбил Омеру нос. В другом случае заместитель Омера попал в засаду, а сам Омер, выйдя из-за вызванной на место происшествия машины скорой помощи, наткнулся прямо на мальчика, который держал в руках зажженную коктейль Молотова. Омер рефлекторно выстрелил ему четырнадцать или пятнадцать раз «в ноги» — «но он умер».

Омер и некоторые из его солдат также вспоминают, что им приходилось ехать в Наблус — несколько раз средь бела дня — чтобы спасти товарищей, чьи машины застряли или вышли из строя.Во время некоторых из этих миссий жители на крышах атаковали автомобили различными тяжелыми предметами, от шлакоблоков до печи. Я спросил одного из водителей Омера, человека с черным юмором по имени Адам, какие районы Наблуса самые опасные. Какие были плохие места? — Весь Наблус — плохое место, — пробормотал он.

Однажды Омер повез меня на холм с видом на контрольно-пропускной пункт Хавара, мимо израильской дороги, ведущей в Браху, еврейское поселение с населением 400-450 человек (там тоже есть казармы у солдат на блокпосту), и, чуть выше, через древний город самаритян, которые теперь являются гражданами Израиля.Гора, называемая горой Гаризим, упоминается в Библии; Авраам, только что получив обещание от Бога: «Я произведу от тебя великий народ», привел свое племя, чтобы разбить лагерь в дубовой роще между Гаризимом и горой Гевал, холмом к северу. Из этого лагеря вырос библейский город Шхем, который сегодня является Наблусом, где проживает 300 000 палестинцев. Многих из них оскорбляет — и это свидетельствует о проблемах, стоящих перед этим регионом, — что израильские дорожные знаки называют их город не Наблусом, а Шхемом.

Мой мысленный образ Наблуса, основанный на описаниях солдат, с которыми я разговаривал, представлял собой большие вонючие трущобы. Поэтому я был удивлен, увидев сверкающие белые здания, многие из которых были высокими и маняще возвышались по обе стороны долины. По крайней мере, издалека Наблус был прекрасен. Но для Омера вид был менее великолепным. Он указывал одну достопримечательность за другой, где с ним и его компанией случались плохие вещи. Когда мы спускались, он указал на здание, которое солдаты назвали «Дискотека»: это был палестинский зал для вечеринок, который десантники захватили во время напряженности 2002 года, чтобы обеспечить поселенцам дополнительную защиту.Однажды ночью, когда солдаты спали, двое палестинских боевиков напали на них, убив сержанта и лейтенанта, прежде чем сами были убиты. Потеря этих двух солдат казалась самым болезненным испытанием для Омера, и все же я видел, что какая-то его часть действительно хотела, чтобы я узнал, что произошло в Наблусе. Это была его идея прийти сюда. Несколько недель спустя, когда я снова встретился с Омером и сказал ему, что вернулся в Наблус один, он казался удивленным, а также немного завистливым.

Военным приказом израильским гражданам запрещен въезд в палестинские города; на самом деле, для большинства из них это было бы опасно.Но мне сказали, что это не обязательно будет опасно для меня, как для не израильтянина и нееврея. Итак, в надежде понять контрольно-пропускные пункты с палестинской точки зрения, я пошел.

Мне нужен был палестинский пассажир, и я нашел его в лице Абдул-Латифа М. Халеда, гидролога, получившего образование в Голландии. Он жил не в Наблусе, а в Джаюсе, деревне примерно в двадцати милях к западу. По его словам, когда-то его ежедневная поездка на работу занимала не более тридцати минут. Теперь между домом и офисом маячили два постоянных КПП и целых пять летающих КПП, а дорога часто занимала более двух часов в одну сторону.Во второй половине дня моего визита Халед пригласил меня посетить презентацию на тему сохранения водных ресурсов, которую он проводил в Наблусе для официальных лиц из более чем двух десятков местных деревень. Когда все закончилось, мы сели в общее «служебное такси» — стареющий желтый фургон «Мерседес», типичный полуобщественный транспорт, доступный на Западном берегу, — чтобы добраться до его дома.

Халед — высокий, хорошо одетый мужчина лет тридцати, отлично говорящий по-английски и явно пользующийся уважением официальных лиц.Когда мы вдвоем уселись в такси, он болтал с другими пассажирами о ситуации на дневном контрольно-пропускном пункте, пытаясь оценить, что ждет впереди. Это была палестинская версия сообщения о дорожном движении по радио. Альтернативного маршрута не было, но, по крайней мере, он знал, чего ожидать.

Проехав летающий контрольно-пропускной пункт в Наблусе, мы высадились из такси в Бейт-Ибе, районе на северо-западной окраине города, и направились к контрольно-пропускному пункту в стиле терминала, похожему на те, что в Каландии и Хаваре.Примерно 250 человек ожидали прохода, и Халед ожидал, что нам потребуется около получаса, чтобы добраться до фронта, если все пойдет хорошо. Когда я вздохнул, он сказал, чтобы я радовался, что нас не было там в четверг днем, когда студенты близлежащего национального университета Ан-Наджа отправились домой на выходные. Их количество, по его словам, обычно увеличивало очередь до нескольких сотен.

Через пятнадцать-двадцать минут волны и течения толпы разделили нас, и я оказался прижатым к мужчине в клетчатой ​​рубашке, или, точнее, к его спутниковой антенне.Очевидно, он собирался пронести через очередь блюдо высотой по пояс. Каким бы абсурдным это ни казалось поначалу, вскоре мне пришло в голову, что у него, вероятно, не было другого выбора, и поэтому я сделал все, что мог, чтобы помочь. Другие тоже. Вскоре толпа высадила меня у турникета прямо перед ним.

Пока я ждал в короткой очереди, чтобы добраться до солдата, который будет проверять мои документы, я услышал лязг и увидел, что спутниковая тарелка застряла в турникете. Не испугавшись, мужчина в клетчатой ​​рубашке сумел сдвинуть тарелку и начал просовывать ее через ряд вертикальных прутьев рядом с турникетом.Когда работа была почти закончена, я протянул руку, чтобы помочь зафиксировать спутниковую антенну на решетке сбоку.

Большая ошибка. Солдат, в очереди которого я ждал, встал и закричал на меня, требуя, чтобы я явился прямо на фронт. Его английский был плохим, но он ясно дал понять, что я нарушил правила и что он недоволен этим. Я очень извинялся; я впервые проходил через этот контрольно-пропускной пункт, сказал я, и я не понимал, что делаю что-то не так. Когда он забрал мой паспорт и пропуск для израильской прессы, я подумал, что со мной все будет в порядке.Но он указал на заднюю часть человеческого моря, в котором я недавно дрейфовал, и заявил: «Конец линии!» Вздрогнув от этого наказания, я попытался остановиться, пообещав, что это больше не повторится. Халед, сидевший впереди следующего солдата, начал спорить от моего имени. За свои проблемы его отправили в загон для задержанных, небольшой участок с жесткими скамейками за кучей кустов, который был заполнен восемью или девятью другими мужчинами, которые по какой-то причине поссорились с властями. Тем не менее я уперся в пятки.“ Конец строки! », — закричал солдат.

Когда я начал поворачивать назад, среди солдат, казалось, поднялась тихая тревога: что-то пошло не так в конце линии. Мой мучитель и еще пятеро солдат подхватили свои М4 и выбежали за пределы сарая, быстро растворившись в толпе. КПП был официально закрыт.

Через двадцать минут солдаты вернулись и медленно приступили к своим обязанностям. Никаких объяснений предложено не было, а толпа была настолько велика, что я не мог понять, что вызвало шум.Солдаты были одинаково молоды и с тусклыми глазами, их выгорание было видно насквозь. Я снова подошел к своему солдату, и он начал пересматривать мой паспорт с видом напускного равнодушия. Халед увидел меня из загона и начал кричать на солдат; они проигнорировали его.

Солдат позвал своего командира, который минут пятнадцать задавал мне вопросы, прежде чем решил пропустить меня. Однако Халеду пришлось остаться. Я прошел мимо солдат и занял позицию в дальнем конце терминала, чтобы дождаться его.Видеть, как с таким неуважительным отношением к человеку масштаба Халеда обращаются, было тревожно. Несколько раз он указывал на меня; Я боялся, что за защиту моего дела его могут избить.

Но минут через двадцать солдаты решили его отпустить. Халед покраснел, когда сказал мне, что его задержание продолжалось бы, если бы он не смог указать на меня и рассказать солдатам о плохой рекламе, которую они создали для себя. Когда я винила себя в его проблемах, он отмахивался от этого.По его словам, прежде чем его отпустили, его заставили сказать: «Я намруд ». Он спросил, знаю ли я, что это значит, и я сказал, что это звучит как «нимрод» — «идиот»? «смутьян»? Да, сказал он, хотя по-арабски это было больше похоже на «непослушный».

На стоянке за блокпостом мы столкнулись с мэром Джаюса, который предложил подвезти нас на своем пикапе. Когда мы забрались внутрь, Халед сказал: «Иногда они держат вас в этом загоне до закрытия, пока все такси не уедут.— Он указал на группу кустов рядом с участком. «Однажды мне пришлось спать там, рядом с теми».

По дороге домой нужно было пройти всего один контрольно-пропускной пункт, но относительно чистая дорога не улучшила настроения Халеда. Мы подошли к перекрестку, где, по его словам, за неделю до этого солдаты на летучем блокпосту собрали у всех удостоверения личности, хранили их больше часа, а затем бросили в кучу на дороге. Это вызвало безумную схватку, которая только позабавила солдат. Без удостоверения личности ни один палестинец не может никуда пойти.

База 202-й парашютно-десантной роты, расположенная недалеко от 60-й дороги, располагалась на округлой вершине холма, являвшейся частью стайки округлых вершин холмов, выстроенных подобно бусинкам на нитке. Это явно была спорная территория. По склонам одних холмов располагались палестинские деревни, а на вершинах других холмов располагались незаконные израильские поселения. Ночью их было легче различить, когда можно было видеть, что огни в селах расположены неравномерно, разной яркости и цвета, причем мечеть обозначается одним ярко выраженным зеленым светом, тогда как в населенных пунктах огни располагались равномерно и равномерно. яркость и оттенок.Это произошло из-за того, что поселения были построены по принципу подразделений с множеством одинаковых единиц.

Поселенцы годами чувствовали себя наиболее небезопасно не в своих домах, а на дорогах. По словам Марка Провизора, начальника службы безопасности поселения Шайло, участок 60-й дороги был назван «Шоссе смерти» четырьмя годами ранее, что я мог ясно видеть из трейлера Омера. Многие поселенцы были обстреляны на 60-й дороге и по меньшей мере двадцать два человека были убиты. Когда по дороге напали на семью из четырех человек из Шило (родители погибли, младенцы как-то выжили), поселенцы потребовали защиты от израильской армии и получили ее.По словам Провайзора, благодаря усердию солдат, подобных солдатам из 202-го десантника, дорога стала намного безопаснее.

Я спросил Омера, как его подразделению удалось сократить количество атак на 60-й дороге. Комбинация мер, сказал он: контрольно-пропускные пункты, разведка, рейды по домам и оповещать о присутствии солдат различными способами — просто проезжая через деревни или используя таланты своего снайперского отделения. Когда я спросил, что именно могут делать снайперы, он рассказал мне эту историю.

Месяц или два назад, сразу после того, как его рота переместилась на свою базу (известную как аванпост 773, потому что находится на высоте 773 метра над уровнем моря), поступили сообщения о том, что ночью с близлежащего холма бросали камни. на машинах поселенцев, едущих по дороге 60. Омер послал отряд снайперов в камуфляжной форме для расследования, и однажды ночью, используя специальную оптику, они поймали 20-летнего палестинца из деревни Синджил на месте преступления. Они выстрелили ему чуть ниже колена из мощной винтовки.Как ни странно, Омер стоял рядом с военным врачом, а через пять минут после выстрела мужчину лечила та же армия, которая его только что покалечила. Израильская скорая помощь доставила его в больницу в Иерусалиме, где его лечение оплатило правительство. Часть ноги мужчине пришлось ампутировать, но дело в том, что он был жив и мог служить живым предупреждением. «Теперь каждый день его деревня будет вспоминать о том, что произошло», — сказал Омер.

Я спросил Омера, нужно ли было вообще стрелять в этого человека.Разве солдаты не могли просто арестовать его или сделать ему строгое предупреждение? Мои вопросы озадачили Омера. С его точки зрения, он действовал сдержанно, потому что «по закону мы могли его застрелить — убить». Омер утверждал, что действия этого человека представляли смертельную опасность для тех, кто ехал по дороге 60; могли погибнуть люди. На самом деле, как напомнил мне Омер, в марте 2002 года недалеко от того места, где мы стояли, палестинский снайпер открыл огонь по контрольно-пропускному пункту на 60-й дороге, известному как британская полиция (в честь тех, кто его построил), убив семерых израильских солдат и трех мирные жители с древней винтовкой.Снайпера так и не поймали. Британская полиция, стоявшая рядом с высокими соснами, была заброшена, но этот инцидент, как и многие другие в этой части мира, далеко не забыт.

Однажды вечером, в сумерках, я вышел с Омером и двумя его людьми на патрулирование двух арабских деревень возле базы, Синджил и Джильджилья. Омер водил «Шторм» — специальный бронированный джип с пуленепробиваемыми окнами и непроницаемыми шинами. Узкая дорога, по которой мы ехали, по большей части грязная, вилась вверх по холму мимо простых побеленных домов Синджила, первой деревни, где солдат указал мне на стену, на которой была карта Израиля и Западный берег был окрашен — весь он был заполнен зелеными, черными и белыми полосами палестинского флага.Для солдат это было безошибочным свидетельством отказа палестинцев признать право Израиля на существование и явным признаком того, что мы находимся на вражеской территории.

Никто из солдат не сказал мне, чего ожидать, так что летящий камень застал меня врасплох. С грохотом он отскочил от крыши «Шторма» и пролетел по капоту, заставив меня подпрыгнуть. Мы покинули Синджил, прошли около двух миль по засушливому пустынному склону холма и как раз въезжали в Джилджилью. Я посмотрел в толстые окна Грозы, чтобы увидеть, откуда взялся камень, но никого не было видно.Однако по обе стороны дороги были остатки импровизированной баррикады, построенной местными жителями; когда-то он перекрывал дорогу, а теперь превратился в руины из камней, ящиков, стульев и телевизора. «Думаю, сегодня вечером мы не поедем до конца», — сказал Омер, разворачивая машину на другом конце деревни.

Только позже я узнал, что Омер считал небезопасным ехать только с одним грузовиком. Это было на следующий вечер, после того как я спросил, можем ли мы вернуться и проехать дальше.Хотя он не мог приехать сам, Омер дал согласие на поездку, отправив меня в «Шторм» с Адамом, опытным водителем, и Руи, радистом. За нами следовали другие солдаты на «хаммере», за рулем которого находилась молодая женщина, которая, как и примерно четверть солдат Омера, была иммигранткой из России. Солдаты болтали друг с другом и с базой по радио.

Болтовня прекратилась, когда первый камень с грохотом ударил в Грозу — мы снова проезжали мимо разрозненных остатков баррикады в Джилжилии.Я подпрыгнул, но Адам продолжал, печально улыбаясь. «Даже для нас первый всегда немного пугает», — сказал он. «Первый?» Я сказал.

Потом еще два камня попали в Грозу, а другие пролетели мимо, едва не задев нас. На этот раз я увидел, откуда они пришли — кучка детей за стеной. Но солдаты проигнорировали их, и мы поехали в третью деревню, Абвейн.

Через пять минут в Абвейне я впервые услышал громкий пронзительный свист — сигнал, которым палестинцы сообщают, что армейские машины уже в пути.На нас снова посыпались камни, но наш кортеж из двух машин продолжал двигаться, не ускоряясь и не замедляясь, а лицо Адама ничего не выражало.

«Почему именно мы здесь?» Я спросил его.

— Просто чтобы показать им, что мы здесь, — сказал он, мрачно улыбаясь. Другими словами, подумал я про себя, запугивание .

Вскоре мы дошли до конца дороги — армия насыпала через нее большой земляной вал. Такие стратегически расположенные перекрытия дорог (в отличие от контрольно-пропускных пунктов) распространены по всему Западному берегу; армия использует их, чтобы ограничить доступ к дорогам, которые предпочитают поселенцы, и усилить свой контроль над такими палестинскими районами, как этот.Мы начали разворачиваться, что занимало много времени на узкой улице, особенно для Хамви. — Ты имеешь в виду, что мы должны вернуться тем же путем, которым пришли? Я попросил. Адам подумал, что этот вопрос был забавным.

Многочисленные камни обрушивались на Шторм в течение следующих нескольких минут, и снова, когда мы приблизились к полуразрушенной баррикаде в Джилжилии. С дороги, по которой мы шли, не было выхода, и камнеметчики знали, что нам придется вернуться по нашему маршруту. — Это все, что у них есть? — пробормотал Адам, пока мы медленно катились сквозь град камней.Это произошло, когда бутылка из-под кока-колы, наполненная машинным маслом, ударилась о лобовое стекло, и по пятнам темного масла на руке и штанах я обнаружил, что уплотнения Storm не были идеально герметичны. Я оглянулся, чтобы посмотреть, что привлечет Хамви, и увидел, как коктейль Молотова взорвался прямо перед ним, прочертив прямую линию пламени по диагонали через дорогу между нами.

Оба автомобиля остановились. Адам включил дворники Шторма и выругался, когда они успели только размазать масло.«Я бы хотел, чтобы вместо этого они поразили нас коктейлем», — сказал он. Хаммер начал разворачиваться, направляясь в том направлении, куда мы только что приехали.

«Что они собираются делать?» — спросил я Адама.

«Если они могут их поймать, они могут прострелить им ноги», — ответил радист Руи с заднего сиденья. С точки зрения военных, бросать коктейль Молотова — это агрессия более высокого порядка, чем бросание камней. Стрельба по голеням является стандартной практикой, если провокация жестокая, но не смертельная.(Есть даже такая израильская детская игра, как вышибалы, в которой цель состоит в том, чтобы попасть противнику ниже колена.) «Хамви» исчез на десять минут, пока он грохотал по закоулкам Джилжилии, но затем вернулся в наш тыл. обзорные зеркала; он не смог поймать метателей.

Вернувшись на базу, Омер проявил больше беспокойства, чем обычно. «Бутылки и камни нормальные, а вот коктейли Молотова — такого еще не было на этой дороге», — сказал он мне. «Это говорит о них что-то очень серьезное, о том, насколько они готовы напасть на нас.Коктейли Молотова действительно могут взорвать машину».

«А разве бронетехника не застрахована?» Я попросил.

«Ну, в теории», — ответил он.

Днем позже Омер пригласил меня пойти с ним, пока он и горстка солдат установили среди ночи летающий контрольно-пропускной пункт на пустынном участке дороги между Синджилом и Джилжилией. Было около двух часов ночи, очень темно и очень тихо. В нескольких шагах от контрольно-пропускного пункта мы могли смотреть на запад, на Средиземное море, и видеть яркие огни Тель-Авива.Это такая маленькая страна.

Машин почти не было видно. Но даже когда существует «очень низкая вероятность фактического контакта с террористической деятельностью», сказал Омер, «проверка дороги случайным образом вызывает неопределенность, делая практически невозможным сказать, когда и где вы можете улизнуть из деревни, не будучи проверенным». ». Он продолжил: «Работа в разное время и в разных местах снижает уровень угрозы, с которой сталкиваются наши силы». Когда первая машина наконец подъехала к блокпосту, солдаты Омера в последний момент направили на нее мощные прожекторы и, казалось, напугали водителя чуть ли не до смерти.Водитель сказал солдатам, что он фармацевт, возвращающийся после ночного пополнения своего магазина, и он очень любезен на их просьбы обыскать его багажник, заднее сиденье и под капотом. Еще через час и всего через две машины мы отправились обратно на базу.

Когда наше служебное такси проехало мимо ныне заброшенного контрольно-пропускного пункта  британской полиции на 60-й дороге, Халдун   аль-Хатиб, студент Бирзейтского университета недалеко от Рамаллы, указал на него как на достопримечательность, как и Омер.Однако для него блокпост носил другое название — Айун аль-Харамия («Глаза воров») — и расправа над израильтянами таинственным боевиком была не трагедией, а триумфом. «Даже с палестинской стороны мы до сих пор не знаем, как он это сделал», — сказал Халдун, сияя. «Это как Человек-Паук!»

Путешествуя на юг по 60-й дороге, я снова посещал знакомую местность, но с настолько другим гидом, что это казалось совершенно другой землей. Брат Халдуна, Ахмед, мой знакомый, который учится в Пенсильвании, предложил мне поискать Халдуна.Когда я добрался до Рамаллаха и рассказал Халдуну о своем интересе к контрольно-пропускным пунктам, он предложил нам поехать на выходные на юг в дом его родителей в Хевроне, где часто контрольно-пропускной пункт был установлен прямо на улице.

Двадцатидвухлетний Халдун, стройный, красивый и гиперактивный, учился на третьем курсе в Бирзейт и изучал психологию. Пока мы мчались на юг в череде служебных такси, переключаясь всякий раз, когда этого требовал блокпост или шлагбаум, он продолжал утверждать, что ни один из блокпостов не является неприступным.Покажи мне контрольно-пропускной пункт, говорил он, и я покажу тебе, как его обойти. Контрольно-пропускной пункт в Каландии между Рамаллахом и Иерусалимом был доказательством № 1: если вы были готовы сделать большой крюк и заплатить примерно в восемь раз больше обычной платы за проезд на такси, вы могли полностью избежать его. К югу от «Глаз воров» мы так и сделали, сменив такси на перекрестке под названием Аррам и оказавшись на стоянке такси к югу от Каландии. Наш окольный и дорогостоящий маршрут продемонстрировал, почему большинство палестинцев предпочитают проходить через контрольно-пропускной пункт.

Но в других местах, как сказал мне Халдун, уклонение было более рискованным. Блокпост можно было обойти по грунтовой проселочной дороге или отдаленной тропинке, но армия не была дурой: зная, что в сети есть дыры, они посылали патрули ловить проскользнувшую рыбу. Каждый палестинец слышал истории, подобные той, что рассказал мне официант в Наблусе. Вернувшись домой поздно вечером и обнаружив, что контрольно-пропускной пункт Хавара закрыт, он поднялся на гору Геризим, чтобы прогуляться. Солдаты, поймавшие его, избили его и приставили к голове пистолет.Служебные такси регулярно штрафуют или конфискуют, когда их ловят на объезде контрольно-пропускного пункта. Халдун, тем не менее, звучал вызывающе. «Они закрывают дорогу, мы находим сто дорог!» — провозгласил он. «Мы сделаем больше дорог! В любом месте!»

Я уже начал ему верить, когда наше служебное такси остановилось у университета Аль-Кудс в Восточном Иерусалиме. Через улицу панорамный вид на город сменился длинным участком нового израильского защитного забора — глухой, внушительной конструкции, которая тянулась вдоль края пыльных игровых площадок школы.Первоначальный план предусматривал, что стена пересекает поля, делая их бесполезными, но после вмешательства Кондолизы Райс он был изменен. На тот момент оставалось установить только одну панель, прежде чем натяжка стены была завершена. «Ты не собираешься прокладывать дорогу вокруг этого», — прокомментировал я. Халдун бросил на меня несчастный взгляд и больше ничего не сказал на эту тему до конца поездки.

За пределами Хеврона Халдун воспользовался мобильным телефоном, чтобы предупредить своего отца Авни аль-Хатиба, что ему придется забрать нас из центра города.Но его отец тут же перезвонил: по его словам, на контрольно-пропускном пункте возле их дома было так много пробок, что пройдет несколько часов, прежде чем он сможет туда добраться. Было выбрано альтернативное место встречи. Когда мы подъезжали к городу, такси высадило меня и Халдуна на обочину. Мы перелезли через пятифутовый земляной барьер (армия построила их сотни, чтобы ограничить доступ палестинцев к основным магистралям, таким как 60-я дорога) и прошли около четверти мили по переулку, чтобы встретиться с отцом Халдуна.

Авни, привлекательный, общительный мужчина лет пятидесяти, приветствовал нас в своем Volkswagen Polo, где мы также познакомились с его младшим сыном Мухаммадом. Мы ехали около десяти минут до перекрестка, который был полностью забит длинными очередями легковых и грузовых автомобилей.

«О-о, — сказал я.

Но у Халдуна была другая реакция. — Нет, нет, мы дома! — воскликнул он. Он вылез из «фольксвагена», пробрался через дорогу через плотное движение и открыл то, что оказалось воротами на подъездную дорожку к семье.Примерно через пять минут водители поблизости смогли освободить достаточно места для VW, и мы выехали на подъездную дорожку. — Видишь, с чем нам приходится мириться, — сказал Авни, когда Халдун закрыл ворота. Я сначала не понял, но потом Халдун объяснил: все эти машины и грузовики стояли в очереди на местный контрольно-пропускной пункт в сотне ярдов дальше по дороге. «Когда они устанавливают контрольно-пропускной пункт, они не ставят достаточно солдат», — заметил Халдун. «Людям приходится долго ждать».

Авни — ученый со степенью доктора неорганической химии Университета Флориды в Гейнсвилле.Он получил степень бакалавра и магистра в Университете штата Юта и был приглашенным ученым Фулбрайта в Университете Оклахомы. У него есть семья из шести человек, которые много лет жили в многоквартирном доме после того, как переехали в Хеврон. Повышение Авни до вице-президента Хевронского университета позволило им построить этот изящный дом, расположенный на склоне холма на окраине города, с балконом, цветниками и захватывающим видом на оливковый сад через долину.

Но их жизнь полностью изменилась с появлением на пороге контрольно-пропускного пункта в 2001 году.Пока мать Халдуна, Латифа, подавала нам чай во внутреннем дворике за пределами гостиной, череда палестинцев каждые несколько минут украдкой пробиралась мимо сада, вызывая дикий лай немецкой овчарки. «Они обходят контрольно-пропускной пункт», — объяснил Халдун. По его словам, для этого им придется пересечь дорогу поселенцев под домом, а затем пройти через оливковый сад. Пока их не поймают, они сэкономят много времени.

Мне было любопытно, сколько времени, поэтому на следующий день мы пошли по дороге туда, где были солдаты.Один стоял на страже на эстакаде, еще двое стояли внизу. Я присоединился к толпе из сорока палестинцев, которые с нетерпением ждали внимания солдат. Я обнаружил, что то, что я американец, не ускорило события. Спустя более получаса, когда мне наконец разрешили подойти к нему, молодой солдат с рыжими волосами изучил мои документы, а затем подошел достаточно близко, чтобы прошептать мне на ухо, что в городе опасно. «На твоем месте я бы взобрался туда, — признался он, указывая на дорогу для поселенцев вверх по набережной, — и выбрался бы отсюда автостопом.Я поблагодарил его за заботу обо мне; он был явно взволнован, и от него не требовалось повышать мою безопасность. — Но я с другом, — сказал я, указывая на Халдуна. — Думаю, я буду в порядке. Солдат удивился и пропустил нас обоих.

Омер постоянно упоминал «старые 60» и «новые 60», и однажды я спросил, что он имеет в виду. Он объяснил, что старые 60 соединяли все крупные палестинские города Западного берега. Но с ростом израильских поселений на территории и с тем, что израильские поселенцы сталкивались с проблемами, когда они путешествовали через палестинские города, были созданы объездные дороги.Пик этого строительства пришелся на конец 1990-х годов. Объездные дороги теперь составляют главную дорогу 60, которая огибает не только города, но и многие деревни.

Как-то утром разведка сообщила, что бомбардировщики из Наблуса направляются на юг, и Омер решил установить летающий контрольно-пропускной пункт на новой 60-й дороге, где она пересекалась со старой 60-й, прямо под базой роты. В конце концов, умный бомбардировщик может решить избегать основных маршрутов с их постоянными контрольно-пропускными пунктами в пользу более длительного путешествия по проселочным дорогам.

В середине утра четверо солдат вышли с водителем «Хаммера», чтобы установить летающий контрольно-пропускной пункт, а я пошел наблюдать. Руководил операцией один из наиболее доверенных командиров взводов Омера, двадцатиоднолетний мужчина по имени Ори, который выгрузил из «Хамви» два ящика с боеприпасами, содержащие пакал махсом, комплект контрольно-пропускного пункта, в который входили отражатели, предупреждающий знак на треноге и две длины «зубов дракона» — складных шипов, которые простираются примерно на шесть футов через дорогу, чтобы автомобили останавливались там, где они должны.

Я долго разговаривал с Ори накануне вечером за столом для пикника на базе. Невысокий, красивый и добросовестный, он два года служил в армии после восьмимесячной службы на флоте. Как и многие его приятели, он все еще пытался перейти от активной жизни солдата, патрулирующего Наблус, к относительно более пассивной жизни на контрольно-пропускных пунктах. «В Наблусе чувствуешь себя воином, — сказал он мне. «Вы арестовываете людей, вы привлекаете их к ответственности и все такое. Но здесь вы не видите плодов труда.Проблема в людях и их проблемах, в том давлении, которое они на вас оказывают, и в ваших солдатах, которые смотрят на вас и пытаются понять, как вы это делаете. А бороться нужно с угрозами, которых на КПП очень много. Угроза может быть в дамской сумке, или в двигателе за воздухоочистителем, или за ближайшим холмом, или граната может быть брошена в вас с пятидесяти метров». Пока Ори говорил, я подумал о символе его взвода: клоун, жонглирующий гранатами.

Низкими точками его военной службы, как сказал мне Ори, были три месяца, которые он провел, работая на контрольно-пропускном пункте Хавара, и недавнее опасное задание в Газе.Его отправили в Газу на следующий день после того, как реактивная граната убила пятерых израильских солдат, передвигавшихся на бронетранспортерах. Задача Ори в разгар снайперского огня заключалась в том, чтобы попытаться вернуть оставшиеся мелкие части тел убитых солдат, чтобы их родственникам было что похоронить.

Но сегодня он снова был на контрольно-пропускном пункте, борясь с жарой и скукой, изучая каждый документ, переданный ему из медленно движущейся вереницы машин.Когда очередь начала тянуться обратно через холм и скрылась из виду, очень похоже на сцену в Хевроне, когда я ждал с Халдуном, Ори, выставленный на асфальте, вызывал одну машину за раз, чтобы двигаться впереди остальных, а затем говорил с водителем арабскими фразами, которые выучил во время обучения в учебном лагере.

Уэйн Рай? (Куда ты идешь?)
Джай мин вейн? (Откуда?)
Лахалак фи ас-сайара? (Один в машине?)
Лаиш райех? Шу аль-шугул? (Зачем идешь? По какому делу?)
Итфи аль-саиара! (Выключите машину! [Приказ, который сначала часто игнорируется.])
Итла мин аль-саиара! (Выходи из машины!)
Ифтах аль-сандук! (Открой багажник!)
Ирфа камисак! (Поднимите рубашку!)

Все утро я наблюдал, как Ори и его коллеги делают свою работу. Я видел, как они остановили машину скорой помощи и заставили всех выйти, включая старика сзади, который, очевидно, направлялся в больницу и выглядел на грани смерти. Позже в свою защиту Ори и другие солдаты указали, что машины скорой помощи неоднократно использовались для перевозки взрывчатых веществ.

Я видел, как машины с желто-черными израильскими номерами (в отличие от бело-зеленых палестинских) пропускали без очереди и проезжали через блокпост по полосе встречного движения. Большинство из них встретились глазами с Ори, прежде чем продолжить, но некоторые просто пронеслись мимо.

Я видел, как беременную женщину заставили ждать более двадцати минут на палящем солнце, пока солдат просматривал ее удостоверение личности через компьютер на базе.

Я смотрел, как они приказали нескольким палестинцам вылезти из служебного такси, оставив внутри недееспособного мужчину, чья нога была обмотана марлей, сквозь которую сочилась кровь… Мне было интересно, что произошло.Ори, опасаясь ловушки, заставил мужчину, несмотря на его очевидную боль, выйти из такси и прыгнуть к нему с документами. После того, как все было ясно, мужчина был отнесен к такси другими пассажирами.

Я смотрел, как старуха вылезла из машины, в которой ехала, и поковыляла по дороге, сказав, что ее муж может забрать ее, как только он пройдет через блокпост, но она не собиралась ждать ни минуты больше. «Давай, стреляй в меня!» — сказала она Ори, проходя мимо.

Примерно через три часа прибыл Омер и решил, что, хотя ни один террорист или контрабандист не был задержан, контрольно-пропускной пункт выполнил свою задачу.Вернувшись на базу, Ори и другие солдаты, казалось, были рады снять свое тяжелое боевое снаряжение и пообедать. Ори сказал мне, что он хотел бы быть солдатом во времена Хаганы — предшественника Армии обороны Израиля — или в ранней элитной ударной группе, такой как Пальмах. По его словам, такие бойцы вербовались сами, жили в группе и работали вместе ради одной цели. «Сейчас это кажется таким сложным — ты не знаешь, кто прав, а кто виноват, и правильно ли мы каждый раз поступали».

Наверняка это мнение разделяют тысячи солдат — израильских, русских, американских — на заре двадцать первого века, когда оказывается, что самое трудное — это не взять под контроль территорию (Западный берег, Чечню, Ирак ), но пытаетесь управлять им, когда вы там.Поле боя — это уже не сильно милитаризованный плацдарм, равнина или джунгли, а дорога, контрольно-пропускной пункт; а задача — выбрать врага — подростка в длинном пальто; женщина с детской коляской — из большой массы гражданских, некомбатантов, не создавая при этом дополнительных врагов. Великий риск, когда вы боретесь с невидимым, заключается в том, что вы можете демонизировать даже тех, кто не является частью сопротивления. Это то, что делает работа. Неудивительно, что Ори испытывал ностальгию по старым временам.

И неудивительно, что Омер, командовавший базой, окруженной историческими врагами, совсем не боялся традиционного поражения. Его сторона явно обладала подавляющим военным превосходством. Но Омер очень беспокоился о душевном состоянии своих людей. Вернувшись однажды утром на базу перед самым рассветом, после особенно тяжелого ареста в доме в палестинской деревне, он сел на свою койку и с горечью рассказал мне о дрожании мальчика и рыданиях матери. Они поймали плохого парня, сказал он, но работа все равно брала свое.Он расшнуровал ботинок. «Настоящая ежедневная битва, — сказал он, беспокоясь о своих солдатах, — это борьба за душу».

Христос на контрольно-пропускном пункте — Библейский колледж Вифлеема

Хотите узнать больше о Стране Библии? Вы хотите провести время с палестинскими христианами и понять богословские, социальные и политические реалии, относящиеся к земле с точки зрения палестинских христиан?

«Христос на контрольно-пропускном пункте» предлагает вам уникальную возможность каждые два года погрузиться в контекст конфликта и узнать из первых рук о миротворчестве и примирении.Международная конференция, проводимая раз в два года в Вифлееме, собирает сотни евангельских лидеров и ученых для обсуждения и размышлений о конфликте — все в диалоге с Писанием. Эта конференция имеет евангельский дух. Среди отличительных черт, которые делают его уникальным: 1) качественные ораторы, 2) предоставление голоса палестинским христианам, 3) открытость к различным точкам зрения, 4) диалог и 5) активность.

Таким образом, эта двухгодичная конференция может служить в качестве курса погружения в рамках международной учебной программы Вифлеемского библейского колледжа для тех, кто заинтересован в посещении для получения академического кредита.

Миссия «Христос на контрольно-пропускном пункте» состоит в том, чтобы призвать евангелистов взять на себя ответственность за помощь в разрешении конфликтов в Израиле/Палестине, участвуя в учении Иисуса о Царстве Божьем.

В этом контексте цель состоит в том, чтобы реализовать четыре основные цели конференции «Христос на контрольно-пропускном пункте»:

  1. Усиление и поощрение роли палестинской церкви в достижении мира путем укрепления доверия между народами этой земли, устранения ненависти, проявления терпимости и принятия, а также способности ценить и понимать всех людей, проживающих на этой земле.
  2. Обсуждайте реалии несправедливости на палестинских территориях и информируйте о препятствиях на пути к примирению и миру.
  3. Создать платформу для серьезного взаимодействия с христианским сионизмом и открытый форум для постоянного диалога между всеми позициями в евангелическом богословском спектре.
  4. Мотивируйте участников стать защитниками примирительной работы церкви в Израиле/Палестине и ее разветвлений на Ближнем Востоке и в мире.

 

Для получения дополнительной информации посетите сайт www.christatthecheckpoint.bethbc.edu

Контроль контрольных точек повреждения ДНК в клетках, подвергшихся воздействию ионизирующего излучения

  • Abraham RT . (2001). Гены Дев. , 15 , 2177–2196.

  • Агами Р. и Бернардс Р. (2000). Сотовый , 102 , 55–66.

  • Амати Б., Далтон С., Брукс М.В., Литтлвуд Т.Д., Эванс Г.И. и Лэнд Х. (1992). Природа , 359 , 423–426.

  • Андерсон К.В. и Картер Т.Х. (1996). Курс. Верхняя. микробиол. Иммунол. , 217 , 91–111.

  • Андерсон Л., Хендерсон С. и Адачи Ю. . (2001). Мол. Клетка. биол. , 21 , 1719–1508.

  • Андо Т., Кавабе Т., Охара Х., Дюкоммун Б. и Ито М. (2001). Дж. Биол. хим. , 276 , 42971–42977.

  • Асаад Н.А., Зенг З.С., Гуан Дж., Такер Дж. и Илиакис Г. .(2000). Онкоген , 19 , 5788–5800.

  • Atchley WR и Fitch WM . (1995). Проц. Натл. акад. науч. США , 92 , 10217–10221.

  • Баккенист С.Дж. и Кастан М.Б. (2003). Природа , 421 , 499–506.

  • Банин С., Мойал Л., Ши С-Ю., Тая Ю., Андерсон К.В., Чесса Л., Смородинский Н.И., Привес С., Рейсс Ю., Шилох Ю. и Зив Ю. . (1998). Наука , 281 , 1674–1677.

  • Бао С., Тиббеттс Р.С., Брамбо К.М., Фанг Ю., Ричардсон Д.А., Алл А., Чен С.М., Авраам Р.Т. и Ван Х-Ф. (2001). Природа , 411 , 969–974.

  • Бартек Дж., Фальк Дж. и Лукас Дж. (2001). Нац. Преподобный Мол. Клеточная биол. , 2 , 877–886.

  • Бартек Дж. и Лукас С. (2001а). ФЭБС Письмо. , 490 , 117–122.

  • Бартек Дж. и Лукас Дж. (2001б). Курс.мнение Клеточная биол. , 13 , 738–747.

  • Белл С.П. и Датта А. (2002). год. Преподобный Биохим. , 71 , 333–374.

  • Бермудес В.П., Линдси-Больц Л.А., Чезаре А.Дж., Манива Й., Гриффит Дж.Д., Гурвиц Дж. и Санкар А. . (2003). Проц. Натл. акад. науч. США , 100 , 1633–1638.

  • Бернхард Э.Дж., Майти А., Мушел Р.Дж. и МакКенна В.Г. (1995). Радиация. Окружающая среда. Биофиз. , 34 , 79–83.

  • Бернхард Э.Дж., Маккенна В.Г. и Мушел Р.Дж. (1999). Рак Дж. , 5 , 194–204.

  • Бласина А., Прайс Б.Д., Туренн Г.А. и МакГоуэн Ч.Г. (1999). Курс. биол. , 9 , 1135–1138.

  • Бухер Р.Н., Холман П.С. и Фаттей А. (1997). Дж. Биол. хим. , 272 , 22300–22306.

  • Браун Э.Дж. и Балтимор Д. (2000). Гены Дев. , 14 , 397–402.

  • Кисть Г.С. и Келли Т.Дж. (1996). Механизмы репликации ДНК . Издательство лаборатории Колд-Спринг-Харбор: Нью-Йорк.

    Google ученый

  • Булавин Д.В., Амундсон С.А. и Форнас-младший А.Дж. (2002). Курс. мнение Жене. Дев. , 12 , 92–97.

  • Canman CE, Lim D-S, Cimprich KA, Taya Y, Tamai K, Sakaguchi K, Appella E, Kastan MB и Siliciano JD. (1998). Наука , 281 , 1677–1679.

  • Чан Д.В., Сон С.-К., Блок В., Йе Р., Ханна К.К., Уолд М.С., Дуглас П., Гударзи А.А., Пелли Дж., Тая И., Лавин М.Ф. и Лис-Миллер С.П. (2000а). Дж. Биол. хим. , 275 , 7803–7810.

  • Чан Т.А., Хермекинг Х., Ленгауэр С., Кинзлер К.В. и Фогельштейн Б. (1999). Природа , 401 , 616–620.

  • Чан Т.А., Хван П.М., Хермекинг Х., Кинзлер К.В. и Фогельштейн Б. (2000б). Гены Дев. , 14 , 1584–1588.

  • Кливер Дж. Э., Роуз Р. и Митчелл Д. Л. . (1990). Радиация. Рез. , 124 , 294–299.

  • Cliby WA, Roberts CJ, Cimprich KA, Stringer CM, Lamb JR, Schreiber SL и Friend SH . (1998). EMBO J. , 17 , 159–169.

  • Кортес Д., Гунтуку С., Цинь Дж. и Элледж С.Дж. (2001). Наука , 294 , 1713–1716.

  • Кортез Д., Ван И, Цинь Дж. и Элледж С.Дж. (1999). Наука , 286 , 1162–1166.

  • Костанцо В., Робертсон К., Ин С.И., Ким Э., Авведименто Э., Готтесман М., Грико Д. и Готье Дж. (2000). Мол. Сотовый , 6 , 649–659.

  • Кроуфорд Д.Ф. и Пивница-Вормс Х. (2001). Дж. Биол. хим. , 276 , 37166–37177.

  • Д’Амур Д., Деснойерс С., Д’Сильва И. и Пуарье Г.Г. (1999). Биохим. Дж. , 342 , 249–268.

  • ДеПамфилис МЛ . (1999). BioEssays , 21 , 5–16.

  • Десаи-Мехта А., Черосалетти К.М. и Конкэннон П. (2001). Мол. Клетка. биол. , 21 , 2184–2025.

  • Дезимоун Дж. Н., Бенгтссон У., Ван К., Лао С. Ю., Редпат Дж. Л. и Стэнбридж Э. Дж. . (2003). Радиация. Рез. , 159 , 72–85.

  • DiBiase SJ, Zeng Z-C, Chen R, Hyslop T, Curran Jr WJ и Iliakis G .(2000). Рак Res. , 60 , 1245–1253.

  • Дональдсон А.Д. и Блоу Дж.Дж. (2001). Курс. биол. , 11 , Р979–Р982.

  • Дотто ГП . (2000). Биохим. Биофиз. Акта , 1471 , М43–М56.

  • Драэтта Г. и Экштейн Дж. (1997). Биохим. Биофиз. Acta , 1332 , M53–M63.

  • Дюрочер Д. и Джексон С.П. (2001). Курс. мнениеКлеточная биол. , 13 , 225–231.

  • Дутта А и Белл С.П. (1997). Энн. Преподобный Cell Biol. , 13 , 293–332.

  • Эдвардс Р.Дж., Бентли Н.Дж. и Карр А.М. (1999). Нац. Клеточная биол. , 1 , 393–398.

  • Эйзенман Р.Н. и Купер Дж.А. (1995). Природа , 378 , 438–439.

  • Элия АЭХ, Кэнтли Л.С. и Яффе М.Б. (2003). Наука , 299 , 1228–1231.

  • Элледж С.Дж. (1996). Наука , 274 , 1664–1672.

  • Falck J, Mailand N, Syljuasen RG, Bartek J и Lukas J . (2001). Природа , 410 , 842–847.

  • Фальк Дж., Петрини Дж.Х., Уильямс Б.Р., Лукас Дж. и Бартек Дж. (2002). Нац. Жене. , 30 , 290–294.

  • Friedberg EC, Walker GC и Siede W . (1995). Мутагенез репарации ДНК .ASM Press: Вашингтон, округ Колумбия.

    Google ученый

  • Фурнари Б., Бласина А., Бодди М.Н., Макгоуэн К.Х. и Рассел П. . (1999). Мол. биол. Сотовый , 10 , 833–845.

  • Галактионов К, Чен Х и Бич Д . (1996). Природа , 382 , 511–517.

  • Гейтей М., Скотт С.П., Филиппович И., Сороника Н., Лавин М.Ф., Вебер Б. и Ханна К.К. (2000а). Рак Res., 60 , 3299–3304.

  • Гейти М., Янг Д., Черосалетти К.М., Десаи-Мехта А., Спринг К., Козлов С., Лавин М.Ф., Гатти Р.А., Конкэннон П. и Ханна К.К. (2000б). Нац. Жене. , 25 , 115–119.

  • Джачча А.Дж. и Кастан М.Б. (1998). Гены Дев. , 12 , 2973–2983.

  • Гловер Д.М., Хаган И.М. и Таварес А.А.М. (1998). Гены Дев. , 12 , 3777–3787.

  • Голдберг М., Штуки М., Фальк Дж., Д’Амур Д., Рахман Д., Паппин Д., Бартек Дж. и Джексон С.П.(2003). Природа , 421 , 952–956.

  • Готтифреди В., Ши С.Ю., Тая Ю. и Привес К. (2001). Проц. Натл. акад. науч. США , 98 , 1036–1041.

  • Graves PR, Yu L, Schwarz JK, Gales J, Sausville EA, O’Connor PM и Piwnica-Worms H . (2000). Дж. Биол. хим. , 275 , 5600–5605.

  • Грин CM, Erdjument-Bromage H, Tempst P и Lowndes NF . (2000). Курс. биол., 10 , 39–42.

  • Griffiths DJ, Barbet NC, McCready S, Lehmann AR и Carr AM. (1995). EMBO J. , 14 , 5812–5823.

  • Гуань Дж., ДиБиасе С. и Илиакис Г. (2000). Рез. нуклеиновых кислот. , 28 , 1183–1192.

  • Го С.И., Д’Анна Дж.А. и Ларнер Дж.М. (1999). Радиация. Рез. , 151 , 125–132.

  • Guo Z, Kumagai A, Wang SX и Dunphy WG.(2000). Гены Дев. , 14 , 2745–2756.

  • Хэгтинг А., Карлссон С., Клют П., Джекман М. и Пайнс Дж. (1998). EMBO J. , 17 , 4127–4138.

  • Харпер Дж.В., Адами Г.Р., Вей Н., Кейомарси К. и Элледж С.Дж. (1993). Сотовый , 75 , 805–816.

  • Harris EE, Kao GD, Muschel RJ и McKenna WG . (1998). Лечение рака. Рез. , 93 , 169–190.

  • Хартвелл Л.Х. и Кастан М.Б.(1994). Наука , 266 , 1821–1828 гг.

  • Хартвелл Л.Х. и Вейнерт Т.А. (1989). Наука , 246 , 629–634.

  • Hermeking H, Lengauer C, Polyak K, He T-C, Zhang L, Thiagalingam S, Kinzler KW и Vogelstein B . (1997). Мол. Сотовый , 1 , 3–11.

  • Hermeking H, Rago C, Schuhmacher M, Li Q, Barrett JF, Obaya AJ, O’Connell BC, Mateyak MK, Tam W, Kohlhuber F, Dang CV, Sedivy JM, Eick D, Vogelstein B и Kinzler KW .(2000). Проц. Натл. акад. науч. США , 97 , 2229–2234.

  • Хикман Э.С., Морони М.С. и Хелин К. . (2002). Курс. мнение Жене. Дев. , 12 , 60–66.

  • Хирао А., Конг Ю.Ю., Мацуока С., Уэйкхэм А., Руланд Дж., Йошида Х., Лю Д., Элледж С.Дж. и Мак Т.В. (2000). Наука , 287 , 1824–1827.

  • Hoeijmakers JHJ . (2001). Природа , 411 , 366–374.

  • Хаулдсворт Дж. и Лавин М.Ф.(1980). Рез. нуклеиновых кислот. , 8 , 3709–3720.

  • Хванг А., Майти А., МакКенна В.Г. и Мушел Р.Дж. (1995). Дж. Биол. хим. , 270 , 28419–28424.

  • Илиакис Г . (1988). Междунар. Дж. Радиат. биол. , 53 , 541–584.

  • Илиакис Г . (1997). Семин. Онкол. , 24 , 602–615.

  • Джексон С.П. (2002). Канцерогенез , 23 , 687–696.

  • Джегго Пенсильвания. (1997). Мутат. Рез. , 384 , 1–14.

  • Джегго Пенсильвания. (1998). Доп. Жене. , 38 , 186–218.

  • Джин П., Гу И и Морган Д.О. (1996). Дж. Сотовый. биол. , 134 , 963–970.

  • Джин П., Харди С. и Морган Д.О. (1998). J. Cell Biol. , 141 , 875–885.

  • Канг Д., Чен Дж., Вонг Дж. и Фанг Г.(2002). J. Cell Biol. , 156 , 249–259.

  • Као Г.Д., МакКенна В.Г. и Мушел Р.Дж. (1999). Дж. Биол. хим. , 274 , 34779–34784.

  • Кастан МБ . (2001). Природа , 410 , 766–767.

  • Кастан МБ и Лим Д-С. (2000). Нац. Преподобный Мол. Клеточная биол. , 1 , 179–186.

  • Кавабе Т., Суганума М., Андо Т., Кимура М., Хори Х. и Окамото Т. .(2002). Онкоген , 21 , 1717–1726.

  • Ханна К.К. и Джексон С.П. (2001). Нац. Жене. , 27 , 247–254.

  • Ханна К.К., Китинг К.Е., Козлов С., Скотт С., Гейти М., Хобсон К., Тая Ю., Габриэлли Б., Чан Д., Лиз-Миллер С.П. и Лавин М.Ф. (1998). Нац. Жене. , 20 , 398–400.

  • Ким С.Т., Лим Д.С., Канман К.Э. и Кастан М.Б. (1999). Дж. Биол. хим. , 274 , 37538–37543.

  • Ким С-Т, Сюй Б и Кастан МБ. (2002). Гены Дев. , 16 , 560–570.

  • Lamb JR, Petit-Frere C, Broughton BC, Lehmann AR и Green MHL. (1989). Междунар. Дж. Радиат. биол. , 56 , 125–130.

  • Ларнер Дж.М., Ли Х. и Хэмлин Дж.Л. (1997). Рак Surv. , 29 , 25–45.

  • Ларнер Дж.М., Ли Х., Литтл Р.Д., Дийквел П.А., Шильдкраут К.Л. и Хэмлин Д.Л.(1999). Рез. нуклеиновых кислот. , 27 , 803–809.

  • Ларсон Дж.С., Тонкинсон Дж.Л. и Лай М.Т. (1997). Рак Res. , 57 , 3351–3355.

  • Лавин М.Ф. и Шредер А.Л. (1988). Мутат. Рез. , 193 , 193–206.

  • Lee C-H и Chung JH. (2001). Дж. Биол. хим. , 276 , 30537–30541.

  • Ли Х., Ларнер Дж.М. и Хэмлин Дж.Л. (1997). Проц. Натл. акад. науч. США , 94 , 526–531.

  • Ли Дж., Кумагаи А. и Данфи В.Г. (2001). Мол. биол. Сотовый , 12 , 551–563.

  • Ли М. и медсестра П. (1988). Тенденции Жене. , 4 , 287–290.

  • Lees-Miller SP . (1996). Биохим. Клеточная биол. , 74 , 503–512.

  • Леманн А.Р., Арлетт С.Ф., Берк Дж.Ф., Грин М.Х.Л., Джеймс М.Р. и Лоу Дж.Е.(1986). Междунар. Дж. Радиат. биол. , 49 , 639–643.

  • Леоне Дж., ДеГрегори Дж., Сирс Р., Джакой Л. и Невинс Дж.Р. (1997). Природа , 387 , 422–425.

  • Ли Дж., Мейер А.Н. и Донохью Д.Дж. (1995). Мол. биол. Сотовый , 6 , 1111–1124.

  • Ли С., Тин Н.С.И., Чжэн Л., Чен П.Л., Зив И., Шайло И., Ли Э.И.-Х.П. и Ли В.Х. (2000). Природа , 406 , 210–215.

  • Лим Д-С, Ким С-Т, Сюй Б, Мазер Р.С., Лин Дж., Петрини Дж.Х.Дж. и Кастан М.Б.(2000). Природа , 404 , 613–617.

  • Линдси-Больц Л.А., Бернудес В.П., Гурвиц Дж. и Санкар А. . (2001). Проц. Натл. акад. науч. США , 98 , 11236–11241.

  • Лю Ф.Ф., Стэнтон Дж.Дж., Ву З. и Пивница-Вормс Х. (1997). Мол. Клетка. биол. , 17 , 571–583.

  • Лю К., Гунтуку С., Цуй Х.С., Мацуока С., Кортез Д., Тамаи К., Луо Г., Караттини-Ривера С., ДеМайо Ф., Брэдли А., Донехауэр Л.А. и Элледж С.Дж.(2000). Гены Дев. , 14 , 1448–1459.

  • Лопес-Хирона А., Кано Дж. и Рассел П. (2001). Курс. биол. , 11 , 50–54.

  • Лу З., Минтер-Дайкхаус К., Ву С. и Чен Дж. (2003). Природа , 421 , 957–961.

  • Люке-Хюле C . (1982). Радиация. Рез. , 89 , 298–308.

  • Лукас С., Барткова Дж., Лателла Л., Фальк Дж., Майланд Н., Шредер Т., Сехестед М., Лукас Дж. и Бартек Дж.(2001). Рак Res. , 61 , 4990–4993.

  • Lupardus PJ, Byun T, Yee M-c, Hekmat-Nejad M и Cimprich KA. (2002). Гены Дев. , 16 , 2327–2332.

  • Лидалл Д. и Вайнерт Т. . (1995). Наука , 270 , 1488–1491.

  • Mailand N, Falck J, Lukas C, Syljuasen RG, Welcker M, Bartek J и Lukas J . (2000). Наука , 288 , 1425–1429.

  • Майти А., Хванг А., Янсс А., Филлипс П., МакКенна В.Г. и Мушел Р.Дж.(1996). Онкоген , 13 , 1647–1657.

  • Майти А., МакКенна В.Г. и Мушел Р.Дж. (1994). Радиотер. Онкол. , 31 , 1–13.

  • Марку К.Б., Боссоне С.А. и Патель А.Дж. (1992). год. Преподобный Биохим. , 61 , 809–860.

  • Мазер Р.С., Мирзоева О.К., Уэллс Дж., Оливарес Х., Уильямс Б.Р., Зинкель Р.А., Фарнхэм П.Дж. и Петрини Дж.Х.Дж. (2001). Мол. Клетка. биол. , 21 , 6006–6016.

  • Мацуока С., Хуан М. и Элледж С.Дж. (1998а). Наука , 282 , 1893–1897.

  • Мацуока С., Хуан М. и Элледж С.Дж. (1998б). Наука , 282 , 1893–1897.

  • Мацуока С., Ротман Г., Огава А., Шайло Ю., Тамаи К. и Элледж С.Дж. (2000). Проц. Нац. акад. науч. США , 97 , 10389–10394.

  • McKenna WG . (1995). 37-е ежегодное собрание Американского общества терапевтической радиологии и онкологии .Майами-Бич, Флорида.

    Google ученый

  • McKenna WG, Iliakis G, Weiss MC, Bernhard EJ и Muschel RJ . (1991). Радиация. Рез. , 125 , 283–287.

  • Мельчионна Р., Чен Х-Б., Бласина А. и Макгоуэн К.Х. (2000). Нац. Клеточная биол. , 2 , 762–765.

  • Мецгер Л. и Илиакис Г. (1991). Междунар. Дж. Радиат. биол. , 59 , 1325–1339.

  • Морган Д.О. (1995). Природа , 374 , 131–134.

  • Muschel RJ, Zhang HB, Iliakis G и McKenna WG. (1992). Радиация. Рез. , 132 , 153–157.

  • Нигг Э.А. (1998). Курс. мнение Клеточная биол. , 10 , 776–783.

  • Норбери С. и Медсестра П. (1992). год. Преподобный Биохим. , 61 , 441–470.

  • Медсестра П .(1990). Природа , 344 , 503–508.

  • Медсестра П . (1994). Сотовый , 79 , 547–550.

  • Медсестра П . (1997). Сотовый , 91 , 865–867.

  • Нюберг К.А., Майкельсон Р.Дж., Патнэм К.В. и Вейнерт Т.А. (2002). год. Преподобный Жене. , 36 , 617–656.

  • О’Коннелл М.Дж., Уолворт, Северная Каролина, и Карр А.М. (2002). Trends Cell Biol. , 10 , 296–303.

  • Пачотти В., Клеричи М., Луккини Г. и Лонгхез М.П. (2000). Гены Дев. , 14 , 2046–2059.

  • Художник РБ. (1981). Мутат. Рез. , 84 , 183–190.

  • Художник РБ. (1986). Междунар. Дж. Радиат. биол. , 49 , 771–781.

  • Пейнтер Р.Б. и Янг Б.Р. (1980). Проц. Нац. акад. науч. США , 77 , 7315–7317.

  • Паркер А.Э., Ван де Вейер И., Лаус М.К., Оствеен И., Йон Дж., Верхасселт П. и Луйтен ВМЛ.(1998). Дж. Биол. хим. , 273 , 18332–18339.

  • Паркер Л.Л. и Пивница-Вормс Х. (1992). Наука , 257 , 1955–1957.

  • Паулович А.Г., Точиски Д.П. и Хартвелл Л.Х. (1997). Сотовый , 88 , 315–321.

  • Пэн С.-И., Грейвс П.Р., Тома Р.С., Ву З., Шоу А.С. и Пивника-Вормс Х. (1997). Наука , 277 , 1501–1505.

  • Петрини Дж.Х.(2000). Курс. мнение Клеточная биол. , 12 , 293–296.

  • Сосны Дж . (1995). Семин. Рак биол. , 6 , 63–72.

  • Пайнс Дж. и Хантер Т. (1991). J. Cell Biol. , 115 , 1–17.

  • Пайнс Дж. и Хантер Т. (1994). EMBO J. , 13 , 3772–3781.

  • Пивница-Вормс H . (1999). Природа , 401 , 535–537.

  • Пауэлл С.Н., ДеФранк Дж.С., Коннелл П., Эоган М., Преффер Ф., Домбковски Д., Танг В. и Френд С. . (1995). Рак Res. , 55 , 1643–1648.

  • Райнд Н. и Рассел П. (2000). J. Cell Sci. , 113 , 3889–3896.

  • Ротман Г. и Шайло Ю. . (1998). Мол. человека. Жене. , 1998 , 1555–1563.

  • Ротман Г. и Шайло Ю. . (1999). Онкоген , 18 , 6135–6144.

  • Роуз Дж. и Джексон С.П. (2000). EMBO J. , 19 , 5801–5812.

  • Сэмпат Д. и Планкетт В. (2001). Курс. мнение Онкол. , 13 , 484–490.

  • Санчес Й., Вонг С., Тома Р.С., Ричман Р., Ву З., Пивника-Вормс Х. и Элледж С.Дж. (1997). Наука , 277 , 1497–1501.

  • Сантони-Ругиу Э., Фальк Дж., Майланд Н., Бартек Дж. и Лукас Дж. (2000). Мол.Клетка. биол. , 20 , 3497–3509.

  • Шульц Л.Б., Чехаб Н.Х., Маликзай А. и Халазонетис Т.Д. (2000). J. Cell Biol. , 151 , 1381–1390.

  • Сколник Д.М. и Халазонетис Т.Д. (2000). Природа , 406 , 430–435.

  • Скалли Р. и Ливингстон Д.М. (2000). Природа , 408 , 429–442.

  • Сендерович А.М. и Сосвилл Е.А. (2000). Дж.Нац. Рак инст. , 92 , 376–387.

  • Seoane J, Le H-V и Massague J . (2002). Природа , 419 , 729–734.

  • Шин Дж. Х. и Диксон Р.Б. (2002). Мол. Клетка. биол. , 22 , 1819–1833.

  • Шерр СиДжей. (1995). Тенденции биол. науч. , 20 , 187–191.

  • Шерр СиДжей. (1996). Наука , 274 , 1672–1677.

  • Шерр С.Дж. и Робертс Дж.М.(1995). Гены Дев. , 9 , 1149–1163.

  • Шерр С.Дж. и Робертс Дж.М. (1999). Гены Дев. , 13 , 1501–1512.

  • Шайло Ю. (2001). Курс. мнение Жене. Дев. , 11 , 71–77.

  • Sillje HHW и Nigg EA. (2003). Наука , 299 , 1190–1192.

  • Smeets MFMA, Mooren EHM, Abdel-Wahab AHA, Bartelink H и Begg AC . (1994). Радиация. Рез. , 140 , 153–160.

  • Smith GCM, Cary RB, Lakin ND, Hann BC, Teo SH, Chen DJ и Jackson SP . (1999). Проц. Натл. акад. науч. США , 96 , 11134–11139.

  • Smith GCM и Jackson SP . (1999). Гены Дев. , 13 , 916–934.

  • Смит С . (2001). Тренды Биохим. науч. , 26 , 175–180.

  • Смитс В.А.Дж., Кломпмакер Р., Арно Л., Райксен Г., Нигг Э.А. и Медема Р.Х.(2000). Нац. Клеточная биол. , 2 , 672–676.

  • Смитс В.А.Дж. и Медема Р.Х. (2001). Биохим. Биофиз. Acta , 1519 , 1–12.

  • Сомасундарам К., Чжан Х., Цзэн Ю.С., Хуврас Ю., Пэн Ю., Ву Г.С., Лихт Д.Д., Вебер Б.Л. и Эль-Дейри В.С. (1997). Природа , 389 , 187–190.

  • Стюарт Г.С., Ван Б., Ригнелл К.Р., Тейлор А.М.Р. и Элледж С.Дж. (2003). Природа , 421 , 961–966.

  • Стиллман Б . (1994). Сотовый , 78 , 725–728.

  • Стиллман Б . (1996). Наука , 274 , 1659–1664.

  • Стоукс М.П., ​​Ван Хаттен Р., Линдси Х.Д. и Майкл В.М. (2002). J. Cell Biol. , 158 , 863–872.

  • Su L и Little JB. (1993). Радиация. Рез. , 133 , 73–79.

  • Суганума М., Кавабе Т., Хори Х., Фунабики Т. и Окамото Т. .(1999). Рак Res. , 59 , 5887–5891.

  • Такаи Х., Томинага К., Мотояма Н., Минамисима Ю.А., Нагахама Х., Цукияма Т., Икеда К., Накаяма К. и Наканиши М. (2000). Гены Дев. , 14 , 1439–1447.

  • Taylor WR, Agarwall ML, Agarwal A, Stacey D и Stark GR . (1999). Онкоген , 18 , 283–295.

  • Тейлор В.Р. и Старк Г.Р. (2001). Онкоген , 20 , 1803–1815.

  • Терада Ю., Тацука М., Джинно С. и Окаяма Х. (1995). Природа , 376 , 358–362.

  • Томпсон Л.Х. и Шильд Д. (2001). Мутат. Рез. , 477 , 131–153.

  • Томпсон Л.Х. и Шильд Д. (2002). Мутат. Рез. , 509 , 49–78.

  • Тиббеттс Р.С., Брамбо К.М., Уильямс Дж.М., Саркария Дж.Н., Клиби В.А., Ши С.И., Тая И., Привес С. и Абрахам Р.Т. (1999). Гены Дев. , 13 , 152–157.

  • Тиббеттс Р.С., Кортес Д., Брамбо К.М., Скалли Р., Ливингстон Д., Элледж С.Дж. и Абрахам Р.Т. (2000). Гены Дев. , 14 , 2989–3002.

  • Тоби Р.А. (1975). Природа , 254 , 245–247.

  • Тойошима Ф., Моригути Т., Вада А., Фукуда М. и Нисида Э. (1998). EMBO J. , 17 , 2728–2735.

  • Тай БК .(1999). год. Преподобный Биохим. , 68 , 649–686.

  • ван Гент Д.С., Хоймейкерс Дж.Х.Дж. и Канаар Р. (2001). Нац. Преподобный Жене. , 2 , 196–206.

  • van Vugt MATM, Smits VAJ, Klompmaker R и Medema RH. (2001). Дж. Биол. хим. , 276 , 41656–41660.

  • Венкитараман АР . (2001). J. Cell Sci. , 114 , 3591–3598.

  • Фогельштейн Б., Лейн Д.П. и Левин А.Дж.(2000). Природа , 408 , 307–310.

  • Фолькмер Э. и Карниц Л.М. (1999). Дж. Биол. хим. , 274 , 567–570.

  • Вакаяма Т., Кондо Т., Андо С., Мацумото К. и Сугимото К. . (2001). Мол. Клетка. биол. , 21 , 755–764.

  • Уолтерс Р.А., Герли Л.Р. и Тоби Р.А. (1974). Биофиз. Дж. , 14 , 99–118.

  • Уолворт, Северная Каролина. (2001). Курс. мнение Жене. Дев. , 11 , 78–82.

  • Ван Х, Ван Х, Илиакис Г и Ван Ю. (2003а). Радиация. Рез. , 159 , 420–425.

  • Ван Х., Цзэн З.С., Буй Т.А., ДиБиасе С.Дж., Цинь В., Ся Ф., Пауэлл С.Н. и Илиакис Г. . (2001а). Рак Res. , 61 , 270–277.

  • Ван Х., Зенг З.С., Буй Т.А., Сонода Э., Таката М., Такеда С. и Илиакис Г. . (2001б). Онкоген , 20 , 2212–2224.

  • Ван ДЖИ. (2000). Природа , 405 , 404–405.

  • Ван X, Ван Х, Илиакис Г и Ван Ю. (2003б). Радиация. Рез. . (в прессе).

  • Ван Ю., Кортес Д., Язди П., Нефф Н., Элледж С.Дж. и Цинь Дж. (2000). Гены Дев. , 14 , 927–939.

  • Ван Ю, Хук М.С., Ченг Х и Илиакис Г. (1995). Радиация. Рез. , 142 , 169–175.

  • Ван Ю, Чжоу Сюй, Ван Х-Ю и Илиакис Г .(1999). Дж. Биол. хим. , 274 , 22060–22064.

  • Weichselbaum RR, Nove J и Little JB. (1978). Природа , 271 , 261–262.

  • Волков Т.Д. и Енох Т. . (2002). Мол. биол. Сотовый , 13 , 480–492.

  • Wu X, Ranganathan V, Weisman DS, Heine WF, Ciccone DN, O’Neill TB, Crick KE, Pierce KA, Lane WS, Rathbun G, Livingston DM и Weaver DT. (2000). Природа , 405 , 477–482.

  • Ся Ф., Тагиан Д.Г., ДеФранк Дж.С., Цзэн З.С., Уиллерс Х., Илиакис Г. и Пауэлл С.Н. (2001). Проц. Натл. акад. науч. США , 98 , 8644–8649.

  • Се С., Ву Х., Ван К., Когсвелл П., Хусейн И., Конн С., Стэмбрук П., Джанвар-Униял М. и Дай В. . (2001). Дж. Биол. хим. , 276 , 43305–43312.

  • Сюн Ю, Чжан Х и Бич Д. (1992). Сотовый , 71 , 505–514.

  • Сюй Б., Ким С-т и Кастан М.Б.(2001). Мол. Клетка. биол. , 21 , 3445–3450.

  • Сюй Б., Ким С.Т., Лим Д.С. и Кастан М.Б. (2002). Мол. Клетка. биол. , 22 , 1049–1059.

  • Яманэ К., Ву С. и Чен Дж. (2002). Мол. Клетка. биол. , 22 , 555–566.

  • Yang J, Bardes ESG, Moore JD, Brennan J, Powers MA и Kornbluth S . (1998). Гены Дев. , 12 , 2131–2143.

  • Ярден Р.И., Пардо-Реойо С., Сгагиас М., Коуэн К.Х. и Броуди Л.С.(2002). Нац. Жене. , 30 , 285–289.

  • Yazdi PT, Wang Y, Zhao S, Patel N, Lee EY-HP и Qin J . (2002). Гены Дев. , 16 , 571–582.

  • Ю К., Гэн Ю. и Сичински П. (2001). Природа , 411 , 1017–1021.

  • Zachos G, Rainey MD и Gillespie DAF. (2003). EMBO J. , 22 , 713–723.

  • Чжао Х., Уоткинс Дж.Л. и Пивника-Вормс Х.(2002). Проц. Натл. акад. науч. США , 99 , 14795–14800.

  • Чжао С., Венг Ю.С., Юань С.Ф., Линь Ю.Т., Хсу Х.С., Лин С.С.Дж., Гербино Э., Сонг М.Х., Здзеницка М.З., Гатти Р.А., Шай Дж.В., Зив И., Шайло И. и Ли Э.Ю. ХП. (2000). Природа , 405 , 473–477.

  • Чжоу Б-Б.С., Чатурведи П., Спринг К., Скотт С.П., Йохансон Р.А., Мишра Р., Маттерн М.Р., Винклер Д.Д. и Ханна К.К. (2000). Дж. Биол. хим. , 275 , 10342–10348.

  • Чжоу Б-Б.С. и Элледж С.Дж. (2000). Природа , 408 , 433–439.

  • Чжоу X-Y, Ван X, Ху Б, Гуань Дж, Илиакис Г и Ван Ю. (2002). Рак Res. , 62 , 1598–1603.

  • Циглер М. и Оэй С.Л. (2001). BioEssays , 23 , 543–548.

  • Зоу Л., Кортез Д. и Элледж С.Дж. (2002). Гены Дев. , 16 , 198–208.

  • Контрольная точка клеточного цикла — обзор

    3 GAPDH — Контрольная точка клеточного цикла в клетках млекопитающих?

    Контрольные точки клеточного цикла представляют собой важный механизм, с помощью которого клетки контролируют свое продвижение через сложные процессы, которые в конечном итоге приводят к росту и делению клеток.Подробные исследования показали роль многочисленных белков, которые функционируют как сигналы «стоп/вперед», когда клетки проходят каждую стадию клеточного цикла. Соответственно, те белки, которые используются клетками для этой цели, по определению имеют значение и важность.

    Недавние данные свидетельствуют о том, что GAPDH, работающий по совместительству, может быть одним из тех белков, которые определяют ход клеточного цикла. В первоначальном исследовании антисмысловые конструкции GAPDH использовались для изучения эффекта истощения GAPDH в ряде клеток карциномы шейки матки человека (Kim et al., 1999). Эти исследования продемонстрировали не только значительное ингибирование клеточной пролиферации, но и снижение эффективности образования колоний. Никакого эффекта ни в одной из экспериментальных парадигм не наблюдалось при использовании смысловых или антисмысловых конструкций.

    По большей части исследования по совместительству GAPDH обычно не начинаются с этой целью, хотя такие исследования часто заканчиваются определением новой активности GAPDH. Как показатель этой темы, учитывая роль белка p21 в клеточной регуляции, было начато исследование для определения белок-белковых взаимодействий p21.Белок p21 считается важным, учитывая его взаимодействие с циклинами и с циклин-зависимыми киназами (cdk). Соответственно, была проведена аффинная хроматография с использованием GSTp21 Cip1 в качестве зонда. Этот анализ выявил связывающий белок массой 38 кДа, впоследствии идентифицированный как GAPDH. Однако, возможно, что сбивает с толку, при использовании очищенного GAPDH не было обнаружено связывания этого белка с аффинной матрицей.

    Поскольку это указывает на то, что для связывания GAPDH с p21 Cip1 могут потребоваться дополнительные белки, в качестве зонда использовали аффинную колонку GAPDH.В этом эксперименте был обнаружен белок массой 39 кДа, идентифицированный как SET, который был идентифицирован как белок, связывающий p21 Cip1 (Примечание: он также обнаружил ряд белков массой 13–18 кДа, идентифицированных как гистоны, что также представляет интерес в отношении GAPDH). функции по совместительству — объяснялось ранее в этой главе). Контрольные эксперименты с использованием как иммуноблоттинга, так и коиммунопреципитации подтвердили это белок-белковое взаимодействие.

    Поскольку p21 Cip1 и SET могут участвовать в регуляции клеточного цикла, взаимодействие GAPDH-SET было исследовано с использованием модели голодания/добавления сыворотки сначала для синхронизации клеток, а затем для высвобождения их для пролиферации.Колокализацию определяли с помощью иммуноцитохимии. Эти исследования выявили преимущественную колокализацию как в S-фазе, так и в G 2 /M. Протоколы коиммунопреципитации использовались для проверки их физической связи in vivo.

    Затем была определена функциональная значимость взаимодействия GAPDH-SET. В частности, известно, что SET ингибирует активность циклина B-cdk1. Анализ доза-эффект показал, что эта активность SET была уменьшена GAPDH. Это окажет значительное влияние на регуляцию клеточного цикла in vivo.Впоследствии взаимодействие GAPDH и SET с циклином B было подтверждено как аффинной хроматографией in vitro, так и иммунопреципитацией in vivo. Соответственно, представляется, что третичный белковый комплекс может быть вовлечен в функцию GAPDH по совместительству. Как указано в главе 8, это может быть общим свойством взаимодействий белков GAPDH.

    Физиологическая значимость этой серии исследований взаимодействия белков была изучена с использованием анализа трансфекции конструкций GAPDH с последующим определением влияния сверхэкспрессии GAPDH на пролиферацию клеток.При использовании синхронизированных клеток не было обнаружено никакого влияния на прохождение через S-фазу, определяемое включением ( 3 H)-тимидина в ДНК. Напротив, при иммуноцитохимическом анализе митотического маркера, фосфорилированного гистона h4, оказалось, что число митозов в клетках, сверхэкспрессирующих GAPDH, увеличилось на 50% по сравнению с контролем. С помощью иммунопреципитации в сочетании с биохимическим анализом in vitro было установлено, что кинетика активности циклина B-cdk1 в клеточном цикле изменялась в зависимости от экспрессии GAPDH, т.е.т. е. его максимальная активность наблюдалась раньше, чем обычно выявляется в синхронно растущих клетках. На основании этих исследований было высказано предположение, что GAPDH может регулировать переход G 2 /M. Это открытие, наряду с теми, которые были описаны ранее в отношении регуляции клеточного цикла транскрипции и биосинтеза мРНК GAPDH, указывает далее на критическую природу временной последовательности в отношении активности GAPDH, связанной с клеточным циклом.

    Важность подработки GAPDH в контроле клеточной пролиферации была снова подтверждена исследованиями, в которых изучалась взаимосвязь между GAPDH, клеточным циклом и эффективностью химиотерапевтических средств против рака (Phadke et al., 2009). В этих исследованиях использовались клеточные линии карциномы легких и почек человека, короткие дуплексы РНКи и два противоопухолевых химиотерапевтических агента, цитарабин и доксорубицин. Важные результаты этого исследования показали, что истощение GAPDH привело к снижению пролиферации клеток; скопление клеток в G 0 /G 1 ; механизм, лежащий в основе этого блока клеточного цикла с участием p53 и p21; повышенная резистентность к химиотерапевтическому агенту рака цитарабину (araC, цитозинарабинозиду).

    Уменьшение клеточного роста как функцию истощения GAPDH отслеживали в трех различных линиях раковых клеток: A549, U031 [обе (p53-способные) и h458 (p53-null)]. Введение РНКи GAPDH в клетки A549 и U031, обладающие p53, устраняло клеточную пролиферацию в соответствии с предыдущими исследованиями (Kim et al., 1999). Напротив, пролиферация клеток наблюдалась в клеточной линии h458 p53-null. Однако он был снижен примерно на 50% по сравнению с контролем h458. При этом это исследование было первым, указывающим на роль p53 в контроле роста клеток с помощью GAPDH.

    Анализ клеточного цикла в клеточной линии A549, богатой p53, показал специфические изменения в распределении клеточного цикла в зависимости от истощения GAPDH. В частности, процент клеток в G 0 /G 1 увеличился с 57% до 77%; в фазе S она уменьшилась с 12% до 6%, а в G 2 /М с 22% до 11%. Это было первым признаком того, что наблюдаемое снижение числа клеток с истощением GAPDH было связано с блокировкой в ​​G 0 /G 1 .

    Поскольку разница в ответе на истощение GAPDH наблюдалась в первую очередь в клетках, содержащих p53, любопытно, что иммуноблот-анализ показал не только накопление p53, но также накопление p21, ингибитора cdk.Следует отметить, что при инкубации клеточной линии A549, богатой p53, как с siGAPDH, так и с sip21, уровень p21 был ниже по сравнению с пролиферацией в клетках, обработанных только siGAPDH. Однако скорость роста клеток была снижена. Эти исследования были первыми, показавшими, что GAPDH-индуцированный клеточный блок G 0 /G 1 опосредован изменениями в экспрессии как p53, так и p21.

    Функциональная значимость этого блока клеточного цикла G 0 /G 1 была показана путем определения влияния истощения GAPDH на эффективность двух ставших уже классическими химиотерапевтических агентов против рака, цитарабина (araC, цитозинарабинозид) и доксорубицина. .Первый является агентом, специфичным для клеточного цикла (CCS); последний — неспецифический препарат клеточного цикла (CCNS). Истощение GAPDH снижало чувствительность обработанных клеток к цитарабину в 50 раз, в то время как цитотоксичность доксорубицина не влияла. Кроме того, накопление индуцированных цитарабином двухцепочечных разрывов ДНК (DSB) было ниже в клетках, истощенных по GAPDH, по сравнению с контролем. Никакой разницы в степени индуцированных доксорубицином DSB не наблюдалось в первом случае по сравнению со вторым. В целом, эти кумулятивные исследования демонстрируют значение не только GAPDH как белка, контролирующего рост, но и его потенциальное влияние на эффективность химиотерапии рака.

    Как описано выше, эти исследования предполагают, что блок клеточного цикла G 0 /G 1 , опосредованный истощением GAPDH, может быть опосредован повышенной экспрессией p53 и cdk-p21. Последнее происходит, предположительно, за счет p53-опосредованной понижающей регуляции транскрипции cdk-p21. Интересно, что описанное выше исследование выявило эффект GAPDH-опосредованного клеточного цикла, опосредованный взаимодействием белка GAPDH не только с белком cdk-p21, но также с белком SET и циклином B, каждый из которых связан с белком cdk-p21. соответствующие механизмы контроля клеточного цикла (Carujo et al., 2006). Таким образом, как и постулируемая роль G 2 /M GAPDH в клеточном цикле, эти данные относительно GAPDH-опосредованного блока G 0 /G 1 снова подчеркивают сложность функции GAPDH по совместительству.

    Контрольная точка транскрипционного ответа — PMC

    Клеточный цикл. 1 сентября 2012 г .; 11(17): 3166–3174.

    Обязательно выключите его, когда будете удовлетворены

    , 1 , * , 1 , 2 и 2 , 3 , *

    Маркус Б.Смолька

    1 Кафедра молекулярной биологии и генетики; Институт клеточной и молекулярной биологии Вейля; Корнелл Университет; Итака, штат Нью-Йорк, США

    Франциско М. Бастос де Оливейра

    1 Кафедра молекулярной биологии и генетики; Институт клеточной и молекулярной биологии Вейля; Корнелл Университет; Итака, штат Нью-Йорк, США

    Michael R. Harris

    2 MRC Лаборатория молекулярно-клеточной биологии; Университетский колледж Лондона; Лондон, Великобритания

    Робертус А.M. de Bruin

    2 MRC Лаборатория молекулярно-клеточной биологии; Университетский колледж Лондона; Лондон, Великобритания

    3 Институт рака UCL; Университетский колледж Лондона; Лондон, Великобритания

    1 Кафедра молекулярной биологии и генетики; Институт клеточной и молекулярной биологии Вейля; Корнелл Университет; Итака, штат Нью-Йорк, США

    2 MRC Лаборатория молекулярной клеточной биологии; Университетский колледж Лондона; Лондон, Великобритания

    3 Институт рака UCL; Университетский колледж Лондона; Лондон, Великобритания

    Эта статья была процитирована другими статьями в PMC.

    Abstract

    Сигнальная сеть контрольных точек репликации отслеживает наличие повреждений ДНК, вызванных репликацией, и координирует сложный клеточный ответ, который включает обширное перепрограммирование транскрипции. Недавняя работа установила две основные группы генов, индуцированных репликационным стрессом, в Saccharomyces cerevisiae , гены ответа на повреждение ДНК (DDR) и гены G 1 /S клеточного цикла (CC). В обоих случаях активация транскрипции опосредуется зависимым от контрольной точки ингибированием репрессора транскрипции ( Crt1 для DDR и Nrm1 для CC), который участвует в регуляции с отрицательной обратной связью.Эта опосредованная репрессором регуляция позволяет быстро подавлять транскрипцию, как только клетки справляются со стрессом репликации. Недавняя находка нового класса CC генов, названных «switch генами», дополнительно раскрывает способ регуляции транскрипции, который предотвращает избыточную экспрессию генов, индуцируемых стрессом репликации, во время G 1 . В совокупности эти результаты подчеркивают необходимость механизмов, которые жестко контролируют транскрипцию, индуцированную репликационным стрессом, позволяя быстро активировать транскрипцию во время репликационного стресса, но также избегая длительного гипераккумуляции индуцированного белкового продукта, который может быть вредным для клеточной пролиферации.

    Ключевые слова: стресс репликации, контрольная точка репликации, дрожжи, транскрипция G1-S, Rad53, Nrm1, SBF и MBF, переключающие гены, эффекторы контрольной точки, дозозависимые гены

    Введение

    Стресс, возникающий в процессе репликации ДНК возможно, является одной из самых важных проблем, с которыми должны справиться пролиферирующие клетки, чтобы обеспечить выживание клеток и поддержание целостности генома. 1-5 Каждая клетка, проходящая через S-фазу, испытывает определенный уровень репликативного стресса, возникающего либо в результате столкновений репликационной вилки с механизмами транскрипции, локализованными в высоко транскрибируемых областях ДНК (например,например, гены рДНК и тРНК), за счет репликации «труднореплицируемых» повторяющихся последовательностей ДНК, за счет ограниченного количества dNTP или когда репликационная вилка сталкивается с матрицами ДНК, поврежденными эндогенными или экзогенными факторами (например, активными формами кислорода). и ультрафиолетовое излучение соответственно). 6-12 Транскрипционная активация выбранных генов является важной частью клеточного ответа, который позволяет клеткам лучше справляться со стрессом репликации ДНК. Однако эта активация транскрипции должна жестко регулироваться, поскольку избыточная экспрессия некоторых белков может неблагоприятно влиять на способность клеток прогрессировать в клеточном цикле после прекращения стресса.

    Здесь мы обсуждаем наше текущее понимание молекулярных цепей, которые контролируют уровни транскрипции генов, индуцированных стрессом репликации ДНК. Наша недавняя работа, опубликованная параллельно с группой Виттенберга в The EMBO Journal , устанавливает две основные группы генов, индуцированных репликационным стрессом, в Saccharomyces cerevisiae , гены реакции на повреждение ДНК (DDR) и G . 1 /S генов клеточного цикла (CC). В обоих случаях активация транскрипции опосредуется зависимым от контрольной точки ингибированием репрессора транскрипции ( Crt1 для DDR и Nrm1 для CC), который участвует в регуляции с отрицательной обратной связью. 13,14 Эта регуляция, опосредованная репрессором, обеспечивает быструю репрессию транскрипции после того, как клетки справились со стрессом репликации, и имеет сходство с механизмами репрессии транскрипции, обнаруженными у бактерий и млекопитающих. 15,16 Наше недавнее открытие избранной группы промоторных генов CC, которые подвергаются переключению факторов транскрипции во время перехода G 1 -к-S (которое мы назвали «переключающими генами»), еще раз иллюстрирует необходимость жесткого контроля генов, индуцированных стрессом репликации.

    Обнаружение стресса репликации с помощью киназ контрольных точек повреждения ДНК

    Индуцированные стрессом репликации транскрипционные ответы в основном регулируются опосредованными фосфорилированием сигналами, испускаемыми киназами контрольных точек повреждения ДНК. Киназы контрольных точек повреждения ДНК представляют собой эволюционно консервативные белки, которые постоянно контролируют структуру ДНК на любой стадии клеточного цикла. 17,18 Участие киназ контрольных точек в специфическом мониторинге структур ДНК во время репликации ДНК часто называют контрольными точками репликации.Во многих обзорах особое внимание уделяется киназам контрольных точек ДНК и их многочисленным ролям в ответе на повреждение ДНК, и мы обращаемся к ним за более подробной информацией об их роли в контроле независимых от транскрипции ответов. 19-21 В основе контрольной точки повреждения ДНК в клетках человека лежат фосфатидилинозитол-3-киназоподобные сенсорные киназы ATR/ATM и расположенные ниже эффекторные киназы CHK2/CHK1. ATR и ATM находятся на вершине сигнального каскада и действуют частично избыточно, фосфорилируя общие субстраты по мотивам S/T-Q. 22 ATR и ATM фосфорилируют и контролируют активность CHK1 и CHK2. 17,23-26 ATM и CHK2 в основном активируются двухцепочечными разрывами ДНК (DSB), тогда как ATR и CHK1 реагируют на широкий спектр повреждений, вызванных репликацией, которые приводят к накоплению одноцепочечной ДНК (оцДНК) . Хотя существует некоторая степень перекрестных помех между двумя киназами, ATR играет преобладающую роль в передаче сигналов контрольной точки репликации. В клетках млекопитающих ATR и CHK1 являются важными киназами, которые фосфорилируют чрезвычайно сложную сеть субстратов; однако, как эти фосфорилирования регулируют реакцию на стресс репликации, не совсем понятно. 27

    Почкующиеся дрожжи представляют собой очень удобную систему для изучения контрольной точки репликации благодаря высокой степени консервативности киназ основных контрольных точек. В дополнение к своей мощной генетике использование почкующихся дрожжей позволяет делецию функциональных аналогов ATR и CHK1 человека (Mec1 и Rad53 соответственно) при наличии спасительной делеции ингибитора рибонуклеотидредуктазы Sml1. 28 Напротив, делеция этих незаменимых киназ приводит к гибели большинства модельных организмов, включая клетки культур тканей человека.Архитектура пути у почкующихся дрожжей и человека поразительно похожа. Аналогично ATR и CHK1, Mec1 и Rad53 играют центральную роль в реакции на стресс репликации, а дисфункции этих киназ вызывают гиперчувствительность к стрессу репликации и вызывают нестабильность генома. 17,18,24,29-31 Зависимая от Mec1 и Rad53 передача сигналов имеет решающее значение для обеспечения стабилизации и восстановления репликационных вилок, ингибирования активации позднего происхождения, увеличения продукции дезоксирибонуклеотидов (dNTPs) среди других ответов. 1,9,10,14,28,31-38 В то время как резкая потеря жизнеспособности, наблюдаемая в клетках, лишенных Mec1 и/или Rad53, подвергшихся репликативному стрессу, связана с трансляционно-независимыми функциями, идентификация множественных функциональных связей между Mec1 Передача сигналов /Rad53 и транскрипция подчеркивают центральную важность регуляции транскрипции во время стресса репликации. 30,31,39,40

    Зависимая от контрольной точки регуляция транскрипции у дрожжей

    С самых ранних работ в 80-х годах по мониторингу экспрессии генов в ответ на повреждение ДНК было известно, что генотоксичность приводит к репрессии и активации различных субпопуляций генов. 41-45 Это стало ясно в конце 90-х годов с использованием технологий высокопроизводительных микрочипов. 46 Полногеномный анализ экспрессии в дрожжах показал, что в ответ на стресс репликации, вызванный метилметансульфонатом (MMS), ионизирующим излучением (IR), гидроксимочевиной (HU) и УФ-излучением, сотни генов либо индуцируются, либо репрессируются. 46-48 В соответствии с представлением о том, что контрольная точка повреждения ДНК является центральным триггером для большинства транскрипционных ответов на стресс репликации, было обнаружено, что подавляющее большинство наблюдаемых специфичных для репликации изменений экспрессии действительно зависят от Mec1/ Киназо-сигнальный путь Rad53. 47,49 Этот путь можно разделить на две основные ветви, одна из которых опосредована самой нижестоящей протеинкиназой контрольной точки Dun1, киназой, которая непосредственно фосфорилируется и активируется Rad53, а другая ветвь независима от Dun1 (). 13,14,50,51

    Рисунок 1. (A) Зависимые от контрольных точек пути транскрипции у почкующихся дрожжей. При генотоксическом стрессе Rad53 дерепрессирует транскрипцию генов ответа на повреждение ДНК (DDR) и G 1 /S клеточного цикла (CC) через пути Dun1/Crt1 и Nrm1/MBF соответственно.Указана авторегуляция Crt1 и Nrm1. (B) Активность Crt1 и Nrm1 регулируется петлей отрицательной обратной связи. При стрессе репликации ДНК репрессоры Crt1 и Nrm1 (обозначенные буквой «R») фосфорилируются в зависимости от контрольной точки. Фосфорилирование высвобождает Crt1 и Nrm1 из промоторов-мишеней, включая их собственные промоторы, что приводит к активации транскрипции. Увеличение транскрипции приводит к продолжению продукции нефосфорилированных Crt1 и Nrm1 во время реакции на стресс, что позволяет быстро подавлять транскрипцию после устранения генотоксического стресса.

    Гены транскрипционной регуляции реакции на повреждение ДНК (DDR)

    Первый набор корегулируемых генов, индуцируемых как часть реакции контрольной точки репликации ДНК и повреждения, был идентифицирован у S. cerevisiae и назван реакцией на повреждение ДНК (DDR). гены. Эта небольшая группа генов включает гены, кодирующие субъединицы рибонуклеотидредуктазы (RNR2 , RNR3 и RNR4 ), и дополнительные гены, функции которых недостаточно изучены, такие как HUG1 , FSh4 , FSh4 , 4 и NTh3 . 14,52 Первоначальное исследование, проведенное в лаборатории Elledge, показало, что механизм регуляции транскрипции DDR включает Dun1-зависимое фосфорилирование и инактивацию репрессора транскрипции Crt1. Crt1 связан с промоторами генов DDR, а также со своим собственным промотором и высвобождается при фосфорилировании. Следовательно, Dun1-зависимое фосфорилирование Crt1 приводит к дерепрессии и последующей активации генов DDR. 14 Регуляторная цепь Dun1-Crt1 не является консервативной у высших эукариот, а у почкующихся дрожжей она представляет лишь небольшую часть зависимого от контрольной точки транскрипционного ответа.

    Транскрипционная регуляция генов G

    1 /S клеточного цикла (CC) во время стресса репликации

    Недавняя работа показала, что транскрипция большой группы генов, зависящих от клеточного цикла, известных как гены G 1 /S, также индуцируется как часть реакции транскрипции на стресс репликации ДНК у S. cerevisiae . 13,51 В невозмущенных условиях транскрипция генов G 1 /S клеточного цикла достигает пика во время перехода от G 1 к S-фазе, а по мере перехода клеток в S-фазу транскрипция G 1 Гены клеточного цикла /S инактивированы (обзор генов G 1 /S см.53). В условиях стресса репликации ряд генов G 1 /S демонстрировал устойчивую транскрипцию в S фазе. Эта группа генов G 1 /S, индуцированных репликационным стрессом, включает около 100 генов и, следовательно, представляет собой одну из крупнейших групп совместно регулируемых мишеней среди генов, индуцированных повреждением ДНК. 13,51 Хорошо известно, что транскрипция G 1 /S зависит от комплексов факторов транскрипции SBF и MBF, которые регулируют более 200 генов клеточного цикла. 53,54 SBF и MBF состоят из общего регуляторного компонента Swi6 и специфического ДНК-связывающего белка, Swi4 или Mbp1, соответственно. 53,55 Swi4 и Mbp1 распознают различные элементы последовательности ДНК, названные SCB и MCB, соответственно, которые определяют промоторы-мишени SBF и MBF. В то время как большинство мишеней G 1 /S регулируются либо SBF, либо MBF, считается, что небольшое подмножество регулируется обоими. 56-58 SBF необходим для активации транскрипции во время G 1 , в то время как MBF участвует в репрессии транскрипции G 1 /S вне G 1 , тем самым ограничивая экспрессию G 1 фазы клеточного цикла. 56,59,60

    Наша недавняя работа, опубликованная в The EMBO Journal , показала, что гены CC, инактивация которых зависит от MBF после перехода клеток в S-фазу, транскрипционно индуцируются при репликационном стрессе. Эти два исследования показывают, что мишени MBF, но не мишени SBF, активируются посредством зависящей от контрольной точки инактивации ко-репрессора Nrm1. Было обнаружено, что регуляция Nrm1 является Rad53-зависимой, но Dun1-независимой, и ясно, что она представляет собой путь, параллельный пути Rad53-Dun1-Crt1-DDR ниже Rad53.Интересно, что подобно Crt1, Nrm1 также нацеливается на свой собственный промотор и репрессирует его экспрессию.

    Контрольная точка Интерференция петель отрицательной обратной связи

    Как описано выше, во время стресса репликации ДНК часть программы транскрипции клеточного цикла G 1 /S поддерживается в активном состоянии за счет вмешательства петли отрицательной обратной связи, включающей транскрипционный репрессор. №1. 61,62 Интересно, что репрессор Crt1, участвующий в регуляции генов, индуцируемых повреждением ДНК, также участвует в реакции отрицательной обратной связи.Способность как Nrm1, так и Crt1 подавлять собственную экспрессию позволяет быстро подавлять транскрипцию их мишеней после восстановления клеток после ареста репликации ДНК (10). В целом, интерференция репрессоров транскрипции, которые участвуют в отрицательной обратной связи, как часть транскрипционного ответа контрольной точки, по-видимому, сохраняется на протяжении всей эволюции. В E. coli LexA опосредует регуляцию обратной связи во время SOS-ответа, а Mdm2 млекопитающих, негативный регулятор p53, опосредует регуляцию транскрипции по обратной связи во время восстановления после ответа контрольной точки повреждения ДНК. 15,16 Консервация этой конкретной сети показывает, что транскрипционный ответ, инициированный повреждением ДНК и стрессом репликации, должен быть быстро подавлен, как только эти проблемы будут устранены.

    «Переключающие гены:» новый класс генов клеточного цикла G

    1 /S

    Наша работа установила, что только гены G 1 /S, репрессия которых зависит от MBF во время S фазы, индуцируются репликационным стрессом. Интересно, что мы обнаружили, что этот набор генов включает не только гены G 1 /S, регулируемые исключительно MBF на протяжении всего клеточного цикла, но также новое подмножество генов G 1 /S, регулируемых SBF во время G 1 и MBF во время S-фазы. 13 Это подмножество генов было названо «переключающими генами» на основании переключения SBF на MBF в их промоторах во время перехода G 1 -в S. Переключение SBF на MBF впервые было установлено для гена G 1 /S TOS4 . Поскольку белок Tos4 накапливается в ответ на стресс репликации, подобно MBF-зависимым генам, но ранее был идентифицирован как мишень SBF, был проведен подробный анализ, чтобы установить его способ регуляции транскрипции. Это показало, что пик экспрессии TOS4 во время G 1 зависит от SBF, тогда как репрессия вне G 1 требует MBF.Эксперименты по иммунопреципитации хроматина (ChIP) показали, что SBF связывает промотор TOS4 во время G 1 , но впоследствии заменяется MBF, как только клетки переходят в S-фазу. Анализ промотора TOS4 показал, что он содержит перекрывающийся мотив MCB/SCB, который поддерживает обе консенсус-связывающие последовательности (2). Дальнейший анализ установил, что в отсутствие Swi4 Mbp1 способен дополнительно связываться с промотором TOS4 во время G 1 , указывая на то, что Swi4 конкурирует за связывание в перекрывающемся сайте во время G 1 .Поскольку Swi4 покидает промоторы-мишени G 1 /S, как только клетки переходят в S-фазу, зависимым от Clb/CDK образом, Mbp1 способен связываться с промотором TOS4 в перекрывающемся сайте MCB/SCB. Анализ промоторов-мишеней SBF и MBF, идентифицированных в трех полногеномных исследованиях связывания, привел к списку из 44 генов, содержащих перекрывающийся сайт MCB/SCB, которые были аннотированы как предполагаемые гены-переключатели (4). 54,63,64 Дополнительный анализ этих генов подтвердил, что большинство из них регулируются клеточным циклом, индуцируются в ответ на обработку HU и демонстрируют переключение SBF на MBF на своих промоторах.Но какова биологическая значимость этого механизма переключения SBF на MBF? Мы предполагаем, что гены G 1 /S, которые необходимо индуцировать в ответ на стресс репликации, но чья конститутивная экспрессия вредна для прогрессирования клеточного цикла, выиграют от регуляции переключения SBF-to-MBF. В обстоятельствах, когда функция MBF нарушена, эта регуляция переключения будет работать как «отказоустойчивый» механизм, позволяя генам-переключателям вести себя как ген, индуцируемый стрессом репликации, во время S-фазы, но, в отличие от гена, регулируемого только MBF, позволит избежать конститутивной высокой экспрессии и гипераккумуляции ().В соответствии с этим представлением, переключающие гены значительно обогащены чувствительными к дозировке генами, которые, как сообщается, приводят к задержке клеточного цикла и/или дефектам роста при сверхэкспрессии. 65,66 Более того, анализ индукции транскрипции при стрессе репликации показал, что эта группа генов обогащена генами, которые активируются в условиях стресса репликации. 13,51

    Рисунок 2. (A) Прототип перекрывающегося мотива SBF (SCB) и MBF (MCB), идентифицированный в промоторе TOS4 (от -232 до -214 от стартового кодона ATG).Серый оттенок представляет область перекрытия SCB/MCB. (B) Механизм переключения SBF на MBF позволяет избежать накопления белка вне S-фазы. Во время стресса репликации гены G 1 /S, регулируемые MBF или переключением SBF на MBF, репрессируются во время G 1 и остаются активными во время S-фазы. Однако в случае неисправности MBF переключение SBF на MBF на промоторах G 1 /S обеспечивает отказоустойчивый механизм, который позволяет экспрессию генов во время S-фазы, но предотвращает потерю периодичности и гипераккумуляцию генов, чувствительных к дозировке, вне ее. S-фазы.Звездочка обозначает неисправность MBF.

    Таблица 1. Список предполагаемых генов-переключателей.

    + 9266 5 √
    + 92 661 + 92 661 + + + + + + + + + 926 65 не наблюдается
    # ORF (SGD) Switch Gene Function Up in HU? Сверхэкспрессия (фенотип) Ген клеточного цикла?




    де Оливейра 2012
    Travesa 2012

    Travesa 2012
    Спеллмане 1998
    Orlando 2008
    1
    YBR070C
    ALG14
    гликозилирование


    не наблюдается



    2
    YBR071W
    YBR071W
    Неизвестный


    вегетативный рост: снижение скорости



    3
    YBR162C
    TOS1
    Неизвестный
    X

    не наблюдается

    X

    4
    YCR065W
    HCM1
    фактор транскрипции


    не наблюдается



    5
    YDL003W
    MCD1
    Cohesin субъединицей


    вегетативный рост: снижение скорости



    6
    YDL055C
    PSA1
    Биосинтез клеточной стенки
    X
    не наблюдается


    Х
    7
    YDL127W
    PCL2
    циклин
    Х

    не наблюдается



    8
    YDR222W
    YDR222W
    Неизвестный

    X
    вегетативный рост: снижение скорости

    Х

    9
    YDR224C
    HTB1
    гистонов H3B

    Х
    вегетативный рост: снижение скорости



    10
    YDR225W
    HTA1
    гистонов h3a

    Х
    вегетативный рост: снижение скорости



    11
    YDR501W
    Plm2
    гомолог TOS4


    вегетативный рост: снижение скорости



    12
    YER001W
    MNN1
    гликозилирование


    не наблюдается



    13
    YER111C
    SWI4
    Субу нит из SBF комплекса


    прогрессии аномальный клеточный цикл в G 2

    Х

    14
    YER112W
    LSM4
    РНК обработки

    Х
    не наблюдается

    Х
    Х
    15
    YGL096W
    TOS8
    Предполагаемый фактор транскрипции
    Х

    вегетативный рост: снижение скорости

    Х
    Х
    16
    YGL179C
    TOS3
    Киназа: активирует Snf1p

    √ 926 66 не наблюдается

    Х

    17
    YGR140W
    CBF2
    кинетохор белок

    Х
    вегето рост: снижение скорости



    18
    YGR151C
    YGR151C
    Неизвестный


    не наблюдается


    X
    19
    YGR153W
    YGR153W
    Неизвестный


    не наблюдается
    X
    х
    х
    20 926 66 YIL123W
    SIM1
    Неизвестный


    не наблюдается

    Х

    21
    YIL141W
    YIL141W
    Неизвестный


    не наблюдается


    X
    22
    YJL187C
    SWE1
    Киназные: ингибирует Cdc28


    вегетативный рост: снижение скорости



    23
    YJR054W
    ERM6
    Вакуолярный белок
    X

    вегетативный рост: снижение скорости



    24
    YKL008C
    LAC1
    Керамид синтез

    X
    не наблюдается



    25
    YKL102C
    YKL102C
    Неизвестный
    X

    не наблюдается

    Х
    Х
    26
    YLR183C
    TOS4
    Checkpoint эффектор, HDAC регулятор


    аномальный клеточный последовательность циклов в G 1 /S



    27
    YLR332W
    MID2
    целостность клеточных стенок


    вегетативный рост: снижение скорости

    X
    X
    28
    YMR144W
    YMR144W
    Неизвестный


    не наблюдается



    29
    YNL231C
    PDR16
    липидный гомеостаз


    вегетативный рост: снижение скорость



    30
    YNL278W
    CAF120
    фактор транскрипции

    Х
    вегетативный рост: снижение скорости

    Х

    31
    YNL283C
    92 403 WSC2
    целостность клеточных стенок


    вегетативный рост: снижение скорости



    32
    YNL301C
    RPL18B
    рибосомального белка
    Х

    не наблюдается

    Х
    Х
    33
    YOL007C
    CSI2
    Неизвестно
    X
    926 67

    вегетативный рост: снижение скорости



    34
    YOR247W
    SRL1
    целостность клеточных стенок

    Х
    вегетативный рост: снижение скорости



    35
    YOR342C
    YOR342C
    Неизвестный
    Х

    не наблюдается

    Х

    36
    YPL126W
    NAN1
    рибосомального белка


    не наблюдается

    X
    Х
    37
    YPL127C
    HHO1
    гистонов h2


    прогрессирование аномальный клеточный цикл в G 1



    38
    YPR204W
    YPR204W
    ДНК хеликазную


    не наблюдается

    Х
    X
    39
    YKL007W
    CAP1
    актина полимеризации ингибитор


    не наблюдается

    X

    40
    YPL267W
    ACM1 92 404
    ингибитором APC


    вегетативный рост: снижение скорости



    41
    YBR161W
    CSh2
    гликозилирование


    вегетативный рост: снижение скорости



    42
    YGL027C
    GLS1
    гликозилирование


    вегетативный рост: снижение скорости


    Х
    43
    YGR221C
    TOS2
    Бутонизация





    44 YNL300W TOS6 GPI-зависимой клеточной стенки белка не наблюдается

    Гены-переключатели как чувствительные к дозировке эффекторы контрольных точек

    Гены TOS .

    Среди генов, которые, как было установлено, регулируются переключением SBF на MBF, семь были ранее идентифицированы в исследовании Iyer ChIP-chip как мишени для SBF ( TOS1, 2, 3, 4, 6 и 8 ). . 54 Почему эти гены, содержащие перекрывающиеся мотивы MCB/SCB, были ранее идентифицированы как мишени SBF, до сих пор неясно. Однако хорошо известно, что обогащение промоторной ДНК при анализе ChIP мишеней MBF при опускании Mbp1 намного ниже, чем обогащение промоторов-мишеней SCB при опускании Swi4.Предполагается, что это является отражением методологии сшивки, а не отражением фактического связывания. Поскольку TOS1 4 , 6 и 8 имеют как SCB, так и MCB, они были аннотированы как гены SBF только после полногеномного анализа ChIP, вероятно, потому, что сигналы для SBF были намного выше, чем для MBF pulldowns. Было обнаружено, что из белков Tos TOS4 кодирует белок, содержащий домен Forkhead-associated (FHA). Интересно, что при репликационном стрессе Tos4 накапливается в зависимости от контрольной точки и взаимодействует с субъединицами Hos2 и Rpd3 histone deacetylases (HDAC), которые являются частью двух основных комплексов HDAC. 13 Взаимодействие между Tos4 и HDAC опосредовано его FHA-доменом, и это взаимодействие имеет решающее значение для функции Tos4. Генетические данные свидетельствуют о том, что Tos4 важен для жизнеспособности клеток во время репликативного стресса и функционирует параллельно пути протеинкиназы контрольных точек Dun1. 13 Хотя роль Tos4 во время ответа на стресс репликации до сих пор неясна, мы предполагаем, что в ответ на генотоксический стресс Tos4 может быть вовлечен либо в стимулирование, либо в ингибирование рекрутирования HDAC на промоторы определенных генов или в модулирование активности определенных HDAC.Функция генов TOS остается в значительной степени неизвестной. Однако, хотя гены TOS не имеют гомологии последовательностей, они являются частью очень избранной группы генов, связанных своим профилем экспрессии и механизмом контроля транскрипции как во время клеточного цикла, так и в ответ на стресс репликации. На основании этого предполагается, что белки, кодируемые этими генами, играют специфическую роль вне фазы G 1 клеточного цикла и в ответ на активацию контрольных точек.

    MCD1 , SWE1 и ACM1 .

    Среди генов, контролируемых переключением SBF-to-MBF, мы также идентифицировали MCD1 , ген, который кодирует субъединицу дрожжевого комплекса cohesin, который необходим для сцепления, репарации DSB и рекомбинации между сестринскими хроматидами во время митоза. Предыдущая работа показала, что Mcd1 является мишенью контрольной точки, и было показано, что зависящее от контрольной точки фосфорилирование Mcd1 важно для сцепления во время G 2 /M. 67 Подобно MCD1, SWE1 является еще одним переключающим геном, который также играет важную роль во время перехода G 2 /M. SWE1 кодирует протеинкиназу, участвующую в ингибировании циклинзависимой киназы (CDK) Cdc28. Swe1-зависимое ингибирование CDK является центральным механизмом регуляции перехода клеточного цикла во время G 2 /M. 68 Ген-переключатель ACM1 играет роль в более позднем переходе клеточного цикла, а именно в выходе из митоза, путем ингибирования комплекса, стимулирующего анафазу (APC), посредством конкурентного ингибирования.Коактиватор APC Cdh2, который участвует в привлечении целевых субстратов к APC, ингибируется от связывания своих целей Cdc28-зависимой стабилизацией Acm1. 69

    TOS4, MCD1 , SWE1 и ACM1 регулируются клеточным циклом, и, подтверждая нашу гипотезу о том, что экспрессия генов переключения должна жестко регулироваться, сверхэкспрессия этих генов была связана с дефектом роста и/ или остановка клеточного цикла. 65,66 Дальнейший анализ других генов-переключателей, таких как генов TOS и восьми предполагаемых ORF, покажет их потенциальную роль в качестве эффекторов контрольных точек.

    Заключение

    С открытием переключения SBF-на-MBF у почкующихся дрожжей мы идентифицировали группу генов, участвующих в ответе контрольных точек, которые требуют своевременной инактивации транскрипции. Механизм переключения не только позволяет активировать гены, которые важны для ответа контрольной точки во время S-фазы, но также предотвращает сверхэкспрессию этих чувствительных к дозировке генов за пределами G 1 в случае нарушения функции MBF. Кроме того, предварительная работа лаборатории де Брюина на делящихся дрожжах показывает, что, хотя уровни транскрипции G 1 /S поддерживаются на высоком уровне в ответ на генотоксический стресс, репрессия вне G 1 необходима для поддержания стабильности генома. С.Каэтано и RdB). Вместе с механизмом отрицательной обратной связи Nrm1 репрессии транскрипции, который быстро отключает транскрипцию мишеней MBF, переключение SBF на MBF обеспечивает важный регуляторный механизм для жесткого контроля накопления белка не только во время S-фазы, но и во всей клетке. цикл. Следовательно, переключающие гены обогащены генами, регулируемыми клеточным циклом, дозозависимыми и генами, индуцированными стрессом репликации. Эти особенности могут направить будущую характеристику этой избранной группы совместно регулируемых генов, многие из которых имеют неизвестную функцию.Кроме того, будущие исследования прольют свет на то, насколько широко используется этот способ регуляции, и на важность этой конкретной сети для выживания клеток в ответ на стресс и во время эволюции.

    Благодарности

    Авторы признательны за поддержку в виде гранта исследователя № RSG-11-146-01-DMC от Американского онкологического общества для MBS, исследовательской стипендии Корнелла Флеминга для FMBdO и награды RdB MRC Career Development Award (G0800297).

    Каталожные номера

    1.Сегурадо М., Терсеро Дж.А. Контрольная точка S-фазы: нацеливание на вилку репликации. Биол Клетка. 2009; 101: 617–27. doi: 10.1042/BC200. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]2. Бранцеи Д., Фояни М. Реакция на повреждение ДНК во время репликации ДНК. Curr Opin Cell Biol. 2005; 17: 568–75. doi: 10.1016/j.ceb.2005.09.003. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]3. Патнэм К.Д., Йехниг Э.Дж., Колоднер Р.Д. Перспективы повреждений ДНК и реакции контрольных точек репликации у Saccharomyces cerevisiae. Восстановление ДНК (Амст) 2009; 8: 974–82.doi: 10.1016/j.dnarep.2009.04.021. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]4. Зегерман П., Диффли Дж. Ф. Репликация ДНК как мишень контрольной точки повреждения ДНК. Восстановление ДНК (Амст) 2009; 8: 1077–88. doi: 10.1016/j.dnarep.2009.04.023. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]5. Фридель А.М., Пайк Б.Л., Гассер С.М. ATR/Mec1: согласование стабильности и ремонта вилки. Curr Opin Cell Biol. 2009; 21: 237–44. doi: 10.1016/j.ceb.2009.01.017. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]6. Бранцеи Д., Фояни М. Поддержание стабильности генома на вилке репликации.Nat Rev Mol Cell Biol. 2010;11:208–19. doi: 10.1038/nrm2852. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]7. Ивесса А.С., Ленцмайер Б.А., Бесслер Ю.Б., Гудсузян Л.К., Шнакенберг С.Л., Закян В.А. Хеликаза Rrm3p Saccharomyces cerevisiae облегчает репликацию после комплексов негистоновый белок-ДНК. Мол Ячейка. 2003; 12:1525–36. doi: 10.1016/S1097-2765(03)00456-8. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]8. Торрес Дж.З., Бесслер Дж.Б., Закиан В.А. Локальная структура хроматина в рибосомной ДНК вызывает паузу репликационной вилки и нестабильность генома в отсутствие S.cerevisiae ДНК-хеликаза Rrm3p. Гены Дев. 2004; 18: 498–503. doi: 10.1101/gad.1154704. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]9. Лопес М., Котта-Рамусино С., Пелличиоли А., Либери Г., Плевани П., Музи-Фалькони М. и др. Реакция контрольной точки репликации ДНК стабилизирует застопорившиеся вилки репликации. Природа. 2001; 412: 557–61. doi: 10.1038/35087613. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 10. Терсеро Дж. А., Диффли Дж. Ф. Регуляция продвижения вилки репликации ДНК через поврежденную ДНК с помощью контрольной точки Mec1/Rad53.Природа. 2001; 412: 553–7. doi: 10.1038/35087607. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 11. Bermejo R, Lai MS, Foiani M. Предотвращение стресса репликации для поддержания стабильности генома: разрешение конфликтов между репликацией и транскрипцией. Мол Ячейка. 2012;45:710–8. doi: 10.1016/j.molcel.2012.03.001. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 12. Branzei D, Foiani M. Реакция контрольной точки на стресс репликации. Восстановление ДНК (Амст) 2009; 8: 1038–46. doi: 10.1016/j.dnarep.2009.04.014. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 13.Бастос де Оливейра Ф.М., Харрис М.Р., Бразаускас П., де Брюин Р.А., Смолка М.Б. Связывание контрольной точки репликации ДНК с транскрипцией клеточного цикла MBF выявляет отдельный класс генов G1/S. EMBO J. 2012; 31: 1798–810. doi: 10.1038/emboj.2012.27. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]14. Хуан М., Чжоу З., Элледж С.Дж. Пути репликации ДНК и контрольных точек повреждения индуцируют транскрипцию путем ингибирования репрессора Crt1. Клетка. 1998; 94: 595–605. doi: 10.1016/S0092-8674(00)81601-3. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 15.Ву С, Бэйл Дж. Х., Олсон Д., Левин А. Дж. Саморегуляторная петля обратной связи p53-mdm-2. Гены Дев. 1993;7(7А):1126–32. doi: 10.1101/gad.7.7a.1126. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 16. Бутала М., Згур-Берток Д., Басби С.Дж. Бактериальный репрессор транскрипции LexA. Cell Mol Life Sci. 2009;66:82–93. doi: 10.1007/s00018-008-8378-6. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 17. Роуз Дж., Джексон С.П. Интерфейсы между обнаружением, передачей сигналов и восстановлением повреждений ДНК. Наука. 2002; 297: 547–51. doi: 10.1126/наука.1074740. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 18. Колоднер Р.Д., Патнэм К.Д., Мьюнг К. Поддержание стабильности генома у Saccharomyces cerevisiae. Наука. 2002; 297: 552–7. doi: 10.1126/science.1075277. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 19. Полсен Р.Д., Симприх К.А. Путь ATR: тонкая настройка форка. Восстановление ДНК (Амст) 2007; 6: 953–66. doi: 10.1016/j.dnarep.2007.02.015. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 20. Лопес-Контрерас А.Дж., Фернандес-Капетильо О. Барьер ATR для повреждения ДНК, вызванного репликацией. Восстановление ДНК (Амст) 2010; 9: 1249–55.doi: 10.1016/j.dnarep.2010.09.012. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]21. Бартек Дж., Лукас С., Лукас Дж. Проверка повреждения ДНК в S-фазе. Nat Rev Mol Cell Biol. 2004; 5: 792–804. doi: 10.1038/nrm1493. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 22. Ким С.Т., Лим Д.С., Канман С.Э., Кастан М.Б. Специфичность субстрата и идентификация предполагаемых субстратов членов семейства киназ ATM. Дж. Биол. Хим. 1999; 274:37538–43. doi: 10.1074/jbc.274.53.37538. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 23. Сан З., Фэй Д.С., Марини Ф., Фояни М., Стерн Д.Ф.Spk1/Rad53 регулируется Mec1-зависимым фосфорилированием белка в репликации ДНК и путях контрольных точек повреждения. Гены Дев. 1996; 10: 395–406. doi: 10.1101/gad.10.4.395. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 24. Санчес И., Бачант Дж., Ван Х., Ху Ф., Лю Д., Тецлафф М. и др. Контроль контрольной точки повреждения ДНК с помощью протеинкиназ chk1 и rad53 посредством различных механизмов. Наука. 1999; 286:1166–71. doi: 10.1126/science.286.5442.1166. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 25. Мацуока С., Хуанг М., Элледж С.Дж.Связь ATM с регуляцией клеточного цикла протеинкиназой Chk2. Наука. 1998; 282:1893–1897. doi: 10.1126/science.282.5395.1893. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 26. Санчес Ю., Десани Б.А., Джонс В.Дж., Лю К., Ван Б., Элледж С.Дж. Регуляция RAD53 с помощью ATM-подобных киназ MEC1 и TEL1 в путях контрольных точек клеточного цикла дрожжей. Наука. 1996; 271: 357–60. doi: 10.1126/science.271.5247.357. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 27. Мацуока С., Баллиф Б.А., Смогоржевская А., Макдональд Э.Р., 3-й, Хуров К.Е., Луо Дж. и др.Анализ субстрата ATM и ATR выявляет обширные белковые сети, реагирующие на повреждение ДНК. Наука. 2007; 316:1160–6. doi: 10.1126/science.1140321. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 28. Zhao X, Muller EG, Rothstein R. Супрессор двух основных генов контрольных точек идентифицирует новый белок, который негативно влияет на пулы dNTP. Мол Ячейка. 1998; 2: 329–40. doi: 10.1016/S1097-2765(00)80277-4. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 29. Мён К., Чен С., Колоднер Р.Д. Множественные пути взаимодействуют в подавлении нестабильности генома у Saccharomyces cerevisiae.Природа. 2001; 411:1073–1076. дои: 10.1038/35082608. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 30. Аллен Дж. Б., Чжоу З., Сиде В., Фридберг Э. С., Элледж С. Дж. Протеинкиназа SAD1/RAD53 контролирует множественные контрольные точки и транскрипцию, индуцированную повреждением ДНК, у дрожжей. Гены Дев. 1994; 8: 2401–15. doi: 10.1101/gad.8.20.2401. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 31. Терсеро Дж. А., Лонгхез, член парламента, Диффли Дж. Ф. Центральная роль вилок репликации ДНК в активации контрольных точек и ответных реакциях. Мол Ячейка. 2003; 11:1323–36. doi: 10.1016/S1097-2765(03)00169-2.[PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 32. Сегурадо М., Диффли Дж. Ф. Отдельные роли протеинкиназ контрольной точки повреждения ДНК в стабилизации вилок репликации ДНК. Гены Дев. 2008; 22:1816–27. doi: 10.1101/gad.477208. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]33. Кобб Дж.А., Шлекер Т., Рохас В., Бьергбек Л., Терсеро Дж.А., Гассер С.М. Нестабильность реплисом, коллапс вилки и грубые хромосомные перестройки возникают синергически из-за мутаций киназы Mec1 и хеликазы RecQ. Гены Дев. 2005;19:3055–69.doi: 10.1101/gad.361805. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]34. Пасеро П., Шимада К., Дункер Б.П. Множественные роли вилок репликации в контрольных точках фазы S: датчики, эффекторы и цели. Клеточный цикл. 2003; 2: 568–72. doi: 10.4161/cc.2.6.577. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 35. Сантоканале С, Диффли JFAA. Mec1- и Rad53-зависимая контрольная точка контролирует поздние источники репликации ДНК. Природа. 1998; 395: 615–8. дои: 10.1038/27001. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 36. Чой Д.Х., О Ю.М., Квон С.Х., Пэ С.Х.Мутация нового гена Saccharomyces cerevisiae SRL4 избавляет от летальности мутаций rad53 и lcd1 путем модулирования уровней dNTP. J микробиол. 2008;46:75–80. doi: 10.1007/s12275-008-0013-6. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 37. Чжао X, Ротштейн Р. Киназа контрольной точки Dun1 фосфорилирует и регулирует ингибитор рибонуклеотидредуктазы Sml1. Proc Natl Acad Sci USA. 2002; 99: 3746–51. doi: 10.1073/pnas.062502299. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]38. Чжао Х, Чабес А, Домкин В, Теландер Л, Ротштейн Р.Ингибитор рибонуклеотидредуктазы Sml1 является новой мишенью киназного каскада Mec1/Rad53 во время роста и в ответ на повреждение ДНК. EMBO J. 2001; 20: 3544–53. doi: 10.1093/emboj/20.13.3544. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]39. Сидорова Ю.М., Бриден Л.Л. Rad53-зависимое фосфорилирование Swi6 и подавление транскрипции CLN1 и CLN2 происходят в ответ на повреждение ДНК у Saccharomyces cerevisiae. Гены Дев. 1997; 11:3032–45. doi: 10.1101/gad.11.22.3032. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]40.Кисер Г.Л., Вейнерт Т.А. Различные роли генов контрольных точек дрожжей MEC и RAD в индукции транскрипции после повреждения ДНК и последствия для функции. Мол Биол Селл. 1996; 7: 703–18. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]41. Maga JA, McClanahan TA, McEntee K. Транскрипционная регуляция генов, реагирующих на повреждение ДНК (DDR), в различных мутантных штаммах rad Saccharomyces cerevisiae. Мол Ген Жене. 1986; 205: 276–84. doi: 10.1007/BF00430439. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]42. Баркер Д.Г., Уайт Дж.Х., Джонстон Л.Х.Нуклеотидная последовательность гена ДНК-лигазы (CDC9) из Saccharomyces cerevisiae: ген, который регулируется клеточным циклом и индуцируется в ответ на повреждение ДНК. Нуклеиновые Кислоты Res. 1985; 13:8323–37. doi: 10.1093/нар/13.23.8323. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]43. Руби С.В., Шостак Дж.В. Специфические гены Saccharomyces cerevisiae экспрессируются в ответ на агенты, повреждающие ДНК. Мол Селл Биол. 1985; 5: 75–84. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]45. Трегер Дж.М., Хайхман К.А., МакЭнти К.Экспрессия дрожжевого гена UB14 увеличивается в ответ на агенты, повреждающие ДНК, и в мейозе. Мол Селл Биол. 1988; 8: 1132–6. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]46. Желинский С.А., Самсон Л.Д. Общий ответ Saccharomyces cerevisiae на алкилирующий агент. Proc Natl Acad Sci USA. 1999; 96: 1486–91. doi: 10.1073/pnas.96.4.1486. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]47. Гаш А.П., Хуанг М., Мецнер С., Ботштейн Д., Элледж С.Дж., Браун П.О. Ответы геномной экспрессии на агенты, повреждающие ДНК, и регуляторная роль дрожжевого гомолога ATR Mec1p.Мол Биол Селл. 2001; 12: 2987–3003. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]48. Бентон М.Г., Сомасундарам С., Гласнер Д.Д., Палечек С.П. Анализ дозозависимости глобальной транскрипционной реакции Saccharomyces cerevisiae на метилметансульфонат и ионизирующее излучение. Геномика BMC. 2006; 7:305. дои: 10.1186/1471-2164-7-305. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]49. De Sanctis V, Bertozzi C, Costanzo G, Di Mauro E, Negri R. Остановка клеточного цикла определяет интенсивность глобального транскрипционного ответа Saccharomyces cerevisiae на ионизирующее излучение.Радиационное разрешение 2001; 156: 379–87. doi: 10.1667/0033-7587(2001)156[0379:CCADTI]2.0.CO;2. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]50. Fu Y, Pastushok L, Xiao W. Индуцированная повреждением ДНК экспрессия генов в Saccharomyces cerevisiae. FEMS Microbiol Rev. 2008;32:908–26. doi: 10.1111/j.1574-6976.2008.00126.x. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]51. Травеса А., Куо Д., де Брюин Р.А., Калашникова Т.И., Гуадеррама М., Тай К. и др. Стресс репликации ДНК по-разному регулирует гены G1/S посредством Rad53-зависимой инактивации Nrm1.EMBO J. 2012; 31: 1811–22. doi: 10.1038/emboj.2012.28. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]52. Zaim J, Speina E, Kierzek AM. Идентификация новых генов, регулируемых фактором транскрипции Crt1, эффектором пути контрольной точки повреждения ДНК у Saccharomyces cerevisiae. Дж. Биол. Хим. 2005; 280: 28–37. [PubMed] [Google Scholar]53. Виттенберг С., Рид С.И. Зависимая от клеточного цикла транскрипция у дрожжей: промоторы, факторы транскрипции и транскриптомы. Онкоген. 2005; 24:2746–55. дои: 10.1038/sj.onc.1208606. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]54. Айер В.Р., Хорак К.Э., Скейф К.С., Ботштейн Д., Снайдер М., Браун П.О. Сайты геномного связывания факторов транскрипции дрожжевого клеточного цикла SBF и MBF. Природа. 2001; 409: 533–8. дои: 10.1038/35054095. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]55. Бриден ЛЛ. Периодическая транскрипция: цикл в цикле. Карр Биол. 2003; 13: Р31–8. doi: 10.1016/S0960-9822(02)01386-6. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]56. Bean JM, Siggia ED, Cross FR. Высокое функциональное перекрытие между фактором связывания коробки клеточного цикла MluI и фактором связывания коробки клеточного цикла Swi4/6 в программе транскрипции G1/S у Saccharomyces cerevisiae.Генетика. 2005; 171:49–61. doi: 10.1534/genetics.105.044560. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]57. Эсер У., Фальер-Феттиг М., Джонсон А., Скотхейм Дж.М. Приверженность к клеточному переходу предшествует полногеномным транскрипционным изменениям. Мол Ячейка. 2011;43:515–27. doi: 10.1016/j.molcel.2011.06.024. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]58. Феррезуэло Ф., Коломина Н., Футчер Б., Алдеа М. Транскрипционная сеть, активируемая циклином Cln3 при переходе G1-к-S клеточного цикла дрожжей.Геном биол. 2010;11:R67. doi: 10.1186/gb-2010-11-6-r67. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]59. Амон А., Тайерс М., Футчер Б., Нэсмит К. Механизмы, которые помогают тикать часам клеточного цикла дрожжей: циклины G2 транскрипционно активируют циклины G2 и подавляют циклины G1. Клетка. 1993; 74: 993–1007. doi: 10.1016/0092-8674(93)
  • -3. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 60. де Брюин Р.А., Калашникова Т.И., Чахван С., Макдональд У.Х., Вольшлегель Дж., Йейтс Дж., 3-й и др. Ограничение транскрипции, специфичной для G1, до поздней фазы G1: связанный с MBF корепрессор Nrm1 действует посредством отрицательной обратной связи.Мол Ячейка. 2006; 23: 483–96. doi: 10.1016/j.molcel.2006.06.025. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 61. де Брюин Р.А., Калашникова Т.И., Асланян А., Вольшлегель Дж., Чахван С., Йейтс Дж.Р., 3-й, и соавт. Контрольная точка репликации ДНК способствует транскрипции G1-S путем инактивации репрессора MBF Nrm1. Proc Natl Acad Sci USA. 2008; 105:11230–5. doi: 10.1073/pnas.0801106105. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]62. де Брюин Р.А., Виттенберг С. Все эукариоты: перед отключением транскрипции G1-S проверьте свою ДНК.Клеточный цикл. 2009; 8: 214–7. doi: 10.4161/cc.8.2.7412. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]63. Simon I, Barnett J, Hannett N, Harbison CT, Rinaldi NJ, Volkert TL, et al. Серийная регуляция регуляторов транскрипции в клеточном цикле дрожжей. Клетка. 2001; 106: 697–708. doi: 10.1016/S0092-8674(01)00494-9. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]64. Harbison CT, Gordon DB, Lee TI, Rinaldi NJ, Macisaac KD, Danford TW, et al. Транскрипционный регуляторный код эукариотического генома. Природа. 2004; 431: 99–104. дои: 10.1038/природа02800. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]65. Сопко Р., Хуанг Д., Престон Н., Чуа Г., Папп Б., Кафадар К. и др. Картирование путей и фенотипов по систематической гиперэкспрессии генов. Мол Ячейка. 2006; 21: 319–30. doi: 10.1016/j.molcel.2005.12.011. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]66. Yoshikawa K, Tanaka T, Ida Y, Furusawa C, Hirasawa T, Shimizu H. Комплексный фенотипический анализ штаммов Saccharomyces cerevisiae с делецией одного гена и гиперэкспрессией. Дрожжи. 2011;28:349–61.doi: 10.1002/yea.1843. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]67. Ström L, Lindroos HB, Shirahige K, Sjögren C. Для восстановления ДНК требуется пострепликативное рекрутирование когезина в двухцепочечные разрывы. Мол Ячейка. 2004; 16:1003–15. doi: 10.1016/j.molcel.2004.11.026. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]68. Харви С.Л., Шарле А., Хаас В., Гиги С.П., Келлогг Д.Р. Cdk1-зависимая регуляция митотического ингибитора Wee1. Клетка. 2005; 122:407–20. doi: 10.1016/j.cell.2005.05.029. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]69.Остапенко Д., Бертон Д.Л., Ван Р., Соломон М.Дж. Псевдосубстратное ингибирование комплекса, способствующего анафазе, с помощью Acm1: регуляция путем протеолиза и фосфорилирования Cdc28. Мол Селл Биол. 2008; 28:4653–64. doi: 10.1128/MCB.00055-08. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

    ваших прав в 100-мильной пограничной зоне | ACLU Техаса

    Это содержимое предназначено для использования в качестве общей информации; это не юридическая консультация и не задумана как юридическая консультация.

    Четвертая поправка к U.С. Конституция защищает людей от случайных и произвольных остановок и обысков. Хотя федеральное правительство утверждает, что имеет право проводить определенные виды несанкционированных остановок в пределах 100 миль от границы США, важные меры защиты Четвертой поправки по-прежнему применяются. Это поможет вам понять свои права в 100-мильной пограничной зоне.​

    Разрешено ли сотрудникам иммиграционной службы останавливать людей в местах, находящихся полностью на территории США?

    Таможенная и пограничная служба США, федеральное агентство, которому поручено патрулирование территории США.S. граница и районы, которые функционируют как границы, претендуют на гораздо большую территорию, чем вы можете себе представить. Федеральный закон гласит, что без ордера CBP может садиться на транспортные средства и суда и искать людей без иммиграционных документов «на разумном расстоянии от любой внешней границы Соединенных Штатов». Эти «внешние границы» включают в себя международные сухопутные границы, а также всю береговую линию США.

    Что такое «разумное расстояние»?

    Федеральное правительство определяет «разумное расстояние» как 100 воздушных миль от любой внешней границы США.S. Таким образом, объединяя это федеральное постановление и федеральный закон о несанкционированных обысках транспортных средств, CBP заявляет о своем праве садиться в автобус или поезд без ордера в любом месте в пределах этой 100-мильной зоны. По данным переписи 2010 года, две трети населения США, или около 200 миллионов человек, проживает в этом расширенном приграничном регионе. Большинство из 10 крупнейших городов США, таких как Нью-Йорк, Лос-Анджелес и Чикаго, попадают в этот регион. Некоторые штаты, такие как Флорида, полностью лежат в пределах этой пограничной полосы, поэтому затронуто все их население.

    Существуют ли ограничения полномочий сотрудников иммиграционной службы?

    Четвертая поправка к Конституции США защищает от произвольных обысков и арестов людей и их имущества даже в этой расширенной приграничной зоне. Кроме того, как правило, юрисдикция этих агентов распространяется только на иммиграционные нарушения и федеральные преступления. И, в зависимости от того, где вы находитесь в этой области и как долго агент вас задерживает, у агентов должен быть разный уровень подозрения, чтобы вас удерживать.

    Мы более подробно рассмотрим конкретные сценарии, в которых можно столкнуться с CBP, но вот ваши основные права. Они применимы к любой ситуации, за пределами таможни и портов въезда.

    • Вы имеете право хранить молчание или сказать агенту, что будете отвечать на вопросы только в присутствии адвоката, независимо от вашего гражданства или иммиграционного статуса. Вам не нужно отвечать на вопросы о вашем иммиграционном статусе. Вы можете просто сказать, что не хотите отвечать на эти вопросы.Если вы решите хранить молчание, агент, скорее всего, будет задавать вам вопросы дольше, но одного вашего молчания недостаточно, чтобы подтвердить возможную причину или разумное подозрение для ареста, задержания или обыска вас или ваших вещей.
      Существует ограниченное исключение: для людей, у которых есть разрешение на пребывание в США по определенной причине и, как правило, в течение ограниченного периода времени (например, «неиммиграционный» по визе), закон требует, чтобы вы предоставить информацию о вашем иммиграционном статусе, если вас попросят.Хотя вы по-прежнему можете хранить молчание или отклонить просьбу о предоставлении ваших документов, люди в этой категории должны знать, что они могут столкнуться с последствиями ареста. Если вы хотите узнать, попадаете ли вы в эту категорию, вам следует проконсультироваться с адвокатом.
    • Как правило, сотрудник иммиграционной службы не может задержать вас без «обоснованных подозрений». Обоснованное подозрение менее надежно, чем вероятная причина, но это, конечно же, не просто предчувствие или интуиция. Агент должен располагать конкретными фактами о вас, которые дают основания полагать, что вы совершаете или совершили нарушение иммиграционного законодательства или федерального закона.Если вас задерживает агент, вы можете запросить у него основания для обоснованного подозрения, и он должен сообщить вам об этом.
    • Сотрудник иммиграционной службы также не может обыскать вас или ваши вещи без «вероятной причины» или без вашего согласия. Если агент спросит вас, могут ли они обыскать ваши вещи, вы имеете право отказаться.
    • Сотрудник иммиграционной службы не может арестовать вас без «вероятной причины». Это означает, что у агента должны быть факты о вас, которые делают вероятным, что вы совершаете или совершили нарушение иммиграционного законодательства или федерального закона.
    • Ваше молчание само по себе не соответствует ни одному из этих стандартов. Одной лишь вашей расы или этнической принадлежности недостаточно ни для вероятной причины, ни для обоснованного подозрения.

    Другие важные факторы, о которых следует помнить:

    • Если агент запрашивает у вас документы, то, что вам нужно предоставить, зависит от вашего иммиграционного статуса. Граждане США не обязаны иметь при себе свидетельство о гражданстве, если они находятся в Соединенных Штатах. Если у вас есть действительные иммиграционные документы и вы старше 18 лет, закон требует, чтобы вы имели при себе эти документы.Если иммиграционный агент попросит вас предъявить их, желательно показать документы агенту, иначе вы рискуете быть арестованным. Если вы иммигрант без документов, вы можете отклонить запрос офицера. Агент, скорее всего, задаст вам дополнительные вопросы, если вы отклоните запрос. Независимо от того, к какой категории вы относитесь, никогда не предоставляйте иммиграционным властям фальшивые документы.
    • Лица, въехавшие в США без проверки со стороны иммиграционной службы, могут подлежать ускоренной депортации из США.S. Ускоренное выдворение — это суммарная депортация в обход иммиграционного судьи. Федеральное правительство заявляет, что оно попытается применить ускоренную высылку только к лицам, которые въехали в Соединенные Штаты без проверки в течение последних 14 дней, были обнаружены сотрудником иммиграционной службы в пределах 100 миль от границы и соответствуют определенным другим критериям. Если вам сказали, что вы подлежите ускоренному удалению, но не подпадаете под эту категорию, вы должны сообщить об этом агентам. Кроме того, если вы опасаетесь преследований в случае возвращения в страну происхождения, вам следует немедленно сообщить агентам о своих опасениях.

    Как это работает в реальной жизни?: CBP на автобусах и поездах

    В рамках своих усилий по обеспечению соблюдения иммиграционного законодательства CBP садится в автобусы и поезда в приграничном районе протяженностью 100 миль либо на станции, либо во время движения автобуса. Обычно в автобус садятся несколько офицеров, и они будут задавать пассажирам вопросы об их иммиграционном статусе, просить пассажиров показать им иммиграционные документы или и то, и другое. Эти вопросы должны быть краткими и касаться проверки законного пребывания в США.S. Хотя эти ситуации пугают, и может показаться, что агенты CBP отдают вам приказ, когда задают вам вопросы, вы не обязаны отвечать и можете просто сказать, что не хотите этого делать. Как всегда, вы имеете право хранить молчание.

    Отказ отвечать на вопросы CBP может привести к тому, что агент продолжит задавать вопросы. В этом случае вам следует спросить, не задержаны ли вы. Другой способ спросить об этом — сказать: «Я свободен уйти?» Если агент действительно желает вас задержать — другими словами, вы не имеете права уехать, — для этого агенту необходимо хотя бы разумное подозрение в том, что вы совершили иммиграционное нарушение.Кроме того, если агент начнет расспрашивать вас о неиммиграционных вопросах, скажем, о контрабанде наркотиков, или если они вытащат вас из автобуса, им нужно хотя бы обоснованное подозрение, что вы совершили правонарушение, чтобы ненадолго задержать вас, пока они расследовать. Вы можете спросить агента об их основании для задержания вас, и они должны сказать вам.

    Чем дольше CBP держит вас под стражей, тем больше подозрений им нужно — в конце концов им понадобится веская причина, как только задержание перейдет от краткого к длительному.Если агент арестует вас или проведет обыск внутри ваших вещей, ему потребуется веская причина того, что вы совершили правонарушение. Вы можете попросить агента рассказать вам об их вероятной причине, и они должны быть в состоянии сформулировать свои подозрения.

    Как это работает в реальной жизни?: CBP на иммиграционном контрольно-пропускном пункте

    CBP управляет иммиграционными контрольно-пропускными пунктами внутри Соединенных Штатов как на основных дорогах — постоянных контрольно-пропускных пунктах, так и на второстепенных дорогах — «тактических контрольно-пропускных пунктах» — в рамках своей стратегии правоприменения.В зависимости от контрольно-пропускного пункта могут быть установлены камеры по всему блокпосту и вести к нему, а с агентами размещены собаки для вынюхивания наркотиков. На этих контрольно-пропускных пунктах каждого автомобилиста останавливают и спрашивают об иммиграционном статусе. Агентам не нужны какие-либо подозрения, чтобы остановить вас и задать вам вопросы на законном контрольно-пропускном пункте, но их вопросы должны быть краткими и касаться проверки иммиграционного статуса. Они также могут провести визуальный осмотр вашего автомобиля. Некоторых автомобилистов отправят в зоны вторичного досмотра на КПП для дальнейшего допроса.Это следует делать только для того, чтобы задать ограниченные и рутинные вопросы об иммиграционном статусе, которые нельзя задать каждому автомобилисту в условиях интенсивного движения. Если вы оказались на иммиграционном контрольно-пропускном пункте во время вождения, никогда не бегите оттуда — это уголовное преступление.

    Как и прежде, находясь на контрольно-пропускном пункте, вы можете хранить молчание, сообщить агенту, что отказываетесь отвечать на его вопросы, или сказать агенту, что будете отвечать на вопросы только в присутствии адвоката. Отказ отвечать на вопрос агента, скорее всего, приведет к дальнейшему задержанию для допроса, направлению на повторную проверку или к тому и другому.Если агент продлевает остановку, чтобы задать вопросы, не связанные с соблюдением иммиграционного законодательства, или продлевает остановку на более длительный период, чтобы узнать об иммиграционном статусе, агенту необходимо, по крайней мере, разумное подозрение в том, что вы совершили иммиграционное правонарушение или нарушили федеральный закон, чтобы его действия были законными. . Если вас задержали на контрольно-пропускном пункте для более чем краткого допроса, вы можете спросить агента, можете ли вы уйти. Если они скажут «нет», им нужны разумные подозрения, чтобы продолжать вас удерживать. Вы можете спросить агента об их основании для разумных подозрений, и они должны сказать вам.Если агент арестовывает вас, задерживает вас на длительный период или обыскивает ваши вещи или места в вашем автомобиле, которые не находятся на виду у офицера, агенту нужны вероятные основания того, что вы совершили иммиграционное правонарушение или что вы нарушили федеральный закон. Вы можете попросить агента сообщить вам их основания для вероятной причины. Они должны сообщить вам.

    Как это работает в реальной жизни?: Передвижные патрули CBP

    CBP проводит еще одну внутреннюю правоохранительную деятельность: передвижное патрулирование.Во время этих патрулей CBP объезжает внутреннюю часть США, останавливая автомобилистов. Для этих операций Верховный суд требует, чтобы у CBP были обоснованные подозрения, что водитель или пассажиры в машине, которую они остановили, совершили иммиграционное нарушение или федеральное преступление. Если вас остановят, вопросы агента должны быть ограничены подозрениями, которые у него возникли в отношении вас, и агенты не должны продлевать остановку для допросов, не связанных с целью остановки. Для любого ареста или длительной остановки требуется веская причина.Вы можете спросить у агента их основание для вероятной причины, и они должны сказать вам. В этой ситуации и водитель, и любые пассажиры имеют право хранить молчание и не отвечать на вопросы о своем иммиграционном статусе.

  • Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован.