Кшм схема: Схема кривошипно-шатунного механизма | Схемы автомобильные

Кривошипно-шатунный механизм двигателя внутреннего сгорания

Кривошипно-шатунный механизм двигателя внутреннего сгорания служит для преобразования прямолинейного движения поршня во вращательное движение коленчатого вала. С помощью газораспределительного механизма или электронных актуаторов заменяемый его цилиндр заполняется горючей смесью и освобождается от отработанных газов.

Крайнее положение поршня при движении его в цилиндре называется мертвыми точками. Положение, при котором поршень максимально удален от оси коленчатого вала, называется верхней мертвой точкой, а положение, при котором он минимально удален от оси коленчатого вала, — нижней мертвой точкой. Ход поршня — это расстояние между верхней и и нижней мертвыми точками.

Составные части и схема кривошипно-шатунного механизма

Кривошипно шатунный механизм двигателя состоит из таких составных частей: цилиндра, поршня с кольцами и поршневым пальцем, шатуна с подшипниками, коленчатого вала с подшипниками, маховика, картера.

Схема 1 кривошипно-шатунного механизма.

1. Головка цилиндра
2. Декомпрессор
3. Свеча
4. Камера сгорания
5. Жаропрочная прокладка головки цилиндра
6. Ребра для охлаждения
7. Карбюратор
8. Воздухоочиститель
9. Механизм ауска двигателя
10. Коленчатый вал
11. Картер
12. Подпипник шатуна
13. Шатун
14. Поршень
15. Поршневой палец
16. Цилиндр
17. Поршневое кольцо

Цилиндр в схеме кривошипно-шатунного механизма

В цилиндре 16 (схема 1) происходит сгорание рабочей смеси. Внутренняя поверхность цилиндра является направляющей для движения поршня. Цилиндры изготавливают из чугуна или алюминиевого сплава. Внутреннюю поверхность цилиндра, по которой двигается поршень 14 (схема 1), полируют до блеска (ее называют зеркалом). Снаружи на цилиндре есть ребра 6 (схема 1), которые увеличивают поверхность контакта с окружающим воздухом. Головку цилиндра 1 (схема 1) отливают из алюминиевого сплава. Снаружи на ней также имеются ребра. Внутри головки расположена камера сгорания 4 (схема 1).

Видео полного процесса изготовления блока цилиндров

В головке есть отверстие: одно для свечи зажигания 3 (схема 1), а другое для декомпрессора 2 (схема 1). Между головкой и цилиндром установлена жаропрочная прокладка 5 (схема 1) для уплотнения их соединения. Соединяется головка с цилиндром с помощью винтов.

Из чего состоит поршень и его роль

Поршень 14 (схема 1) принимает давление газов и передает его через палец 15 (схема 1) и шатун 13 (схема 1)на коленчатый вал. Под влиянием пламени и горячих газов поршень нагревается до высокой температуры и расширяется. Для предупреждения заклинивания его во время работы работы между поршнем и цилиндром имеется зазор. А чтобы через этот зазор не проникали газы из камеры сгорания, поршень уплотняют в цилиндре разрезными поршневыми кольцами 17 (схема 1).

Для поршневых колец 7 (рис. 2) в верхней части вытачивают кольцевые канавки 1 (рис. 2). Поршневые кольца имеют разрез и пружинят при сжатии. Установленные в канавках поршня, они благодаря своей упругости плотно прижимаются к зеркалу цилиндра. Поршневые кольца бывают компрессионные и маслосъемные. Компрессионные кольца предупреждают проникновение газов через зазор между цилиндрами и поршнем, а также отводят часть тепла, которое передается на дно поршня при сгорании рабочей смеси.

Маслосъемное кольцо имеет на наружной поверхности канавку и сквозные отверстия. Выступами наружной поверхности оно снимает с зеркала цилиндра масло и через канавку и отверстия пропускает его в картер. Как правило, на поршнях двухтактных двигателей мотоциклов маслосъемные кольца не устанавливают.

В средней части поршня имеется радиальное отверстие, куда вставляется поршневой палец 2 (рис. 2), с помощью которого поршень шарнирно соединяется с верхней головкой 6 (рис. 2) шатуна.

В нижней части поршня двухтактного двигателя делают вырезы 4 (рис. 2) для пропускания горючей смеси и отработанных газов.

Видео полного цикла изготовления поршней

Поршень отливают из алюминиевого сплава, поршневые кольца — из чугуна или стали. Стальной поршневой палец укрепляют упругими кольцами 3 (рис. 2) или алюминиевыми заглушками.

Из чего состоит шатун

В шатуне 13 (схема 1) различают среднюю часть 3 (рис. 3), или так называемый стержень, верхнюю 2 (рис. 3) и нижнюю 5 (рис. 3) головки. В верхней головке запрессована бронзовая втулка 1 (или игольчатый подшипник) для шарнирного соединения с поршневым пальцем. В нижней головке, которую надевают на шейку пальца 6 (рис. 3)коленчатого вала, монтируют роликовый подшипник 4 (рис. 3). В головках шатуна есть отверстия для смазывания подшипников.

Коленчатый вал и его кривошипы

Коленчатый вал имеет столько кривошипов, сколько цилиндров в двигателе. Кривошип состоит из шатунной шейки 6 (рис. 3) двух щек 8 (рис. 3) и двух коренных шеек 7. (рис. 3).

Щеки коленчатого вала 8 делают массивными, и они выполняют роль маховика в двигателе.

Картер двигателя внутреннего сгорания

Нижняя часть двигателя называется картером. Картер 13 (схема 1) изготавливают из алюминиевого сплава. С помощью картера двигатель прикрепляется к раме. Во внутренней части полости картера расположен кривошип коленчатого вала.

Картеры двигателей легких и средних мотоциклов изготавливают обычно в одном блоке с картерами муфты сцепления и коробки передач. Картеры в этих мотоциклов состоят из двух половин и крышек, соединенных между собой болтами. Картеры двухтактных двигателей герметичны.

Кривошипно-шатунный механизм (КШМ). Маятник Капицы » РобоВики

Данная статья является вводной теорией к занятию по робототехнике «Кривошипно-шатунный механизм из Lego EV3″

Первые КШМ

Первые упоминания об использовании кривошипно-шатунного механизма можно отнести ко временам Древнего Рима (примерно III век н.э.). Машина для распиливания каменных блоков передавала вращение от водяного колеса с помощью зубчатой передачи на кривошипно-шатунный механизм, который преобразовывал вращательное движение в возвратно-поступательное движение полотна пилы. Также такие устройства могли использоваться на древних лесопилках.

Схема водяного древнеримского распиловочного станка с КШМ

Большого распространения такие машины не получили – деревянные части из-за большого количества трущихся деталей быстро изнашивались и требовали частого ремонта, а рабский труд был намного дешевле и не требовал большой квалификации рабочих.

В XVI веке кривошипно-шатунный механизм появился на деревянных самопрялках. Самопрялка – это ручной станок для прядения нити из шерсти, состоящий из двух катушек. В самопрялке для скручивания нити использовался принцип ременной передачи. Раньше большую катушку приходилось раскручивать рукой. К самопрялке добавили педаль. Нажимая ногой на педаль, работник смог раскручивать катушку без использования рук. Этот механизм упростил работу и позволил за то же время производить больше пряжи. В данном устройстве возвратно-поступательное движение педали передавалось через деревянный шатун на кривошип и преобразовывалось во вращательное движение большой катушки (шкива).

Самопрялка с педалью и КШМ позволяла освободить руки и сделать работу более производительной

КШМ в паровых машинах

Начиная с начала XVIII века большую популярность среди изобретателей и ученых начинают получать паровые машины. Первый паровой двигатель для водяного насоса построил в 1705 году английский изобретатель Томас Ньюкомен для выкачивания воды из глубоких шахт.

Позднее устройство парового двигателя было усовершенствовано шотландским инженером и механиком Джеймсом Уаттом (1736-1819). Кстати, именно Джеймс Уатт ввел в оборот термин «лошадиная сила», а его именем назвали единицу мощности Ватт. Паровая машина Уатта получила сложную систему связанных тяг, а планетарная зубчатая передача преобразовывала возвратно-поступательное движение поршня во вращательное движение маховика (большого тяжелого колеса). Данная паровая машина стала универсальной, так как в отличие от машины Ньюкомена поршень имел рабочий ход в обе стороны. Машина Уатта получила широкое распространение на ткацких фабриках, в металлургии, при строительстве первых паровозов для железных дорог XVIII века.

Паровая машина Джеймса Уатта. Вместо кривошипа — сложная планетарная зубчатая передачаШотландский изобретатель Джеймс Уатт (James Watt)

Нужно сказать, что паровыми машинами занимались в те времена очень многие изобретатели. Так, в Российской Империи свою двухцилиндровую паровую машину изобрел инженер Иван Иванович Ползунов (1728-1766).

В XIX веке паровую машину Уатта упростили, заменив сложный планетарный механизм на кривошипно-шатунный механизм.

Паровая машина с кривошипно-шатунным механизмомСхема паровой машины с кривошипно-шатунным механизмом

Паровая машина с КШМ нашла широкое применение при строительстве первых автомобилей на паровой тяге и паровозов, перевозящих грузы по железной дороге.

Паровоз

КШМ в двигателях внутреннего сгорания

До этого мы рассматривали использование кривошипно-шатунного механизма в паровых двигателях. В паровом двигателе топливо сгорает в печи (вне цилиндра) и нагревает водяной котел, и уже водяной пар в цилиндре толкает поршень.

В двигателе внутреннего сгорания топливная смесь (воздух + газ, или воздух + бензин и т.д.) поджигается внутри цилиндра и продукты горения толкают поршень. Сокращенно такие двигатели называют ДВС.

Первый одноцилиндровый ДВС на газовом топливе построил в 1860 году в Париже французский изобретатель Жан Ленуар.

Двигатель внутреннего сгорания Жана Ленуара (внешне очень похож на паровую машину)

Однако широкое применение двигатели внутреннего сгорания нашли в конце XIX века после получения керосина и бензина из нефти. Появление жидкого топлива позволило создать экономичные двигатели небольшой массы, которые можно было использовать для привода транспортных машин.

В 1881-1885 гг. российский изобретатель Огнеслав Костович сконструировал и построил в России восьмицилиндровый двигатель мощностью 59 кВт.

Двигатель внутреннего сгорания Огнеслава Костовича

В 1897 г. немецким инженером Рудольфом Дизелем был спроектирован и построен первый двигатель с воспламенением от сжатия. Это был компрессорный двигатель, работающий на керосине, впрыскиваемом в цилиндр при помощи сжатого воздуха.

Рудольф Дизель и его двигатель внутреннего сгорания

Все эти ДВС имели схожие черты и использовали кривошипно-шатунный механизм для преобразования возвратно-поступательного движения поршня во вращательное движение коленвала.

Давайте посмотрим на схему устройства современного двигателя внутреннего сгорания.

Схема кривошипно-шатунного механизма в двигателе внутреннего сгорания

Общие определения:

Поршень совершает возвратно-поступательное движение вдоль цилиндра – он ходит вверх и вниз.

Шатун – деталь, связывающая кривошип и поршень.

Кривошип – условная деталь, которая связывает шатун с коленвалом.

Противовес снижает вибрации при вращении коленвала.  

Блок цилиндров – корпус, в котором находятся цилиндры двигателя.

Поршневой палец – цилиндрическая деталь, ось вращения шатуна относительно поршня.

Коленвал (коленчатый вал) – ось вращения ступенчатой формы.

Верхняя мертвая точка – крайнее верхнее положение поршня, где меняется направление его движения.

Нижняя мертвая точка — крайнее нижнее положение поршня, где меняется направление его движения.

Ход поршня — расстояние между крайними положениями поршня. Равно удвоенному радиусу кривошипа.

Блок цилиндров, поршень с шатуном и коленвал

Видео:

1. Старинная русская прялка с кривошипно-шатунным механизмом 
2. Паровая машина. Джеймс Уатт 
3. Принцип работы противовесов

Литература:

1. КИНЕМАТИКА И ДИНАМИКА КРИВОШИПНОШАТУННОГО МЕХАНИЗМА ПОРШНЕВЫХ ДВИГАТЕЛЕЙ 

Маятник Капицы

Обычный маятник, если перевернуть его кверху ногами, неустойчив. Для него крайне трудно найти верхнюю точку равновесия. Но если совершать быстрые вертикальные возвратно-поступательные колебания, то положение такого маятника становится устойчивым.

Петр Леонидович Капица

Советский академик и нобелевский лауреат по физике Петр Леонидович Капица (1894 — 1984) использовал модель маятника с вибрирующим подвесом для построения новой теории, которая описывала эффекты стабилизации тел или частиц. Работа Капицы по стабилизации маятника была опубликована в 1951 году, а сама модель получила название «маятник Капицы». Более того, было открыто новое направление в физике — вибрационная механика. Данная модель позволила наглядно показать возможности высокочастотной электромагнитной стабилизации пучка заряженных частиц в ускорителях.

Владимир Игоревич Арнольд

Другой советский математик и академик Владимир Игоревич Арнольд (1937-2010), который был заместителем Капицы, вспоминал его слова:

«Он (Капица — примечание) сказал: «Вот смотрите — когда придумывается какая-то физическая теория, то прежде всего надо сделать маленький какой-нибудь прибор, на котором его наглядно можно было-бы продемонстрировать кому угодно. Например, Будкер и Векслер хотят делать ускорители на очень сложной системе. Но я посмотрел, что уравнения, которые говорят об устойчивости этого пучка, означают, что если маятник перевернут кверху ногами, он обычно неустойчив, падает. Но если точка подвеса совершает быстрые вертикальные колебания, то он становится устойчивым. В то время как ускоритель стоит много миллионов, а этот маятник можно очень легко сделать. Я его сделал на базе швейной электрической машинки, он вот здесь стоит». Он нас отвел в соседнюю комнату и показал этот стоящий  вертикально маятник на базе швейной машинки».

Демонстрация динамической стабилизации перевернутого маятника с помощью электробритвы

У математика Арнольда не было своей швейной машинки, и он огорчился. Но у него была электробритва «Нева», из которой и был собран перевернутый маятник. К сожалению, в первой конструкции маятник падал. Тогда Арнольд вывел формулу и увидел, что длина маятника не должна быть больше 12 сантиметров. Известный математик укоротил подвес до 11 сантиметров и все получилось.

Давайте посмотрим, какие силы действуют на «маятник Капицы». После прохождения верхней мертвой точки подвес маятника начинает тянуть грузик вниз. После прохождения нижней мертвой точки подвес толкает грузик вверх. Так как углы вежду векторами сил в верхней и нижней точке разные, то сумма их векторов дает силу, направленную к оси вертикальных колебаний маятника. Если эта сила больше силы тяжести, то верхнее положение маятника становится устойчивым.

А эта формула описывает взаимосвязь частоты вибраций подвеса, амплитуды колебаний и длины жесткого подвеса.

Видео:

1. GetAClass. Маятник Капицы 
2. Маятник Капицы: диалог академика Арнольда и Капицы, вывод формулы

Кривошипно-шатунный механизм

Силы, действующие на детали кривошипно-шатунного механизма.

Сила Р₁ (рис. 1), приложенная к поршневому пальцу, при такте сгорание—расширение слагается из двух сил: силы Р давления газов на поршень и силы инерции Р

И¹. Суммарную силу P_i можно разложить на силу S, направленную вдоль оси шатуна, и силу N, прижимающую поршень к стенкам цилиндра.

Силу S перенесем в центр шатунной шейки, а к центру коленчатого вала приложим две равные силе S и параллельные ей силы S₁ и S₂. Тогда совместное действие сил S₁ и S создаст (на плече R) крутящий момент, приводящий во вращение коленчатый вал, а сила S₂ нагрузит коренные подшипники и через них будет передаваться на картер двигателя.

Рис 1. Схема сил, действующих на детали кривошипно-шатунного механизма.

Разложим силу S₂ на две перпендикулярно направленные силы N

1 и P₂. Сила N₁ численно равна силе N, но направлена в противоположную сторону; совместное действие сил N и N₁ образует момент N_l, который стремится опрокинуть двигатель в сторону, обратную вращению коленчатого вала. Сила Р₂, численно равная силе Р₁ действует вниз, а сила P давления газов действует на головку цилиндра вверх, т. е. в противоположную сторону. Разность между силами P и Р₁ представляет собой силу инерции поступательно движущихся масс P_И. Наибольшей величины эта сила достигнет в момент изменения направления движения поршня.

Вращающиеся массы шатунной шейки, щек кривошипа и нижней части шатуна создают центробежную силу P

Ц, направленную по радиусу кривошипа в сторону от центра вращения.

Таким образом, в кривошипно-шатунном механизме одноцилиндрового двигателя, кроме крутящего момента, возникающего на коленчатом валу, действует ряд неуравновешенных моментов и сил:

1. реактивный, или опрокидывающий, момент N_l, воспринимаемый опорами двигателя через картер;
   
2. сила инерции поступательно движущихся масс Р_И, направленная по оси цилиндра;
   
3. центробежная сила вращающихся масс Р_Ц, направленная по кривошипу вала.

Боковая сила N достигает наибольшей величины при расширении газов, когда поршень прижимается к левой (см.рис.1) стенке цилиндра, чем и объясняется ее обычно больший износ.

Блок цилиндров.

Для автомобильных двигателей применяют блоки, состоящие из 4, 6 и 8 цилиндров, реже — из 12 (БелАЗ-540). Расположение цилиндров может быть однорядным или двухрядным. При двухрядном V-образном расположении цилиндров двигатели получаются легче и короче, с лучшей формой камеры сгорания и более рациональным газораспределением; повышается также жесткость коленчатого вала. Угол между двумя рядами цилиндров (угол развала) 90 или 75° (ЯМЗ-240).

На рис. 2 и 3 показаны детали 6-цилиндрового V-образного двигателя ЯМЗ с расположением цилиндров под углом 90°. Правый и левый шатуны (см. рис. 3) каждого цилиндра установлены рядом на одну шейку коленчатого вала, поэтому один ряд цилиндров соответственно сдвинут относительно другого вдоль оси вала.

Рис 2. Блок и головки цилиндров двигателя ЯМЗ-236

1 — крышка распределительных шестерен; 2 — сталеасбестовая прокладка; 3 — головка правого ряда цилиндров; 4 — площадка для установки топливного насоса высокого давления; 5 — головка левого ряда цилиндров; 6 — отверстие для форсунки; 7 — картер маховика; 8 — блок цилиндров; 9 — крышки коренных подшипников; 10 — гильза цилиндров; 11 — резиновое уплотнительное кольцо гильзы; 12 — вкладыши коренных подшипников

Двигатели современных автомобилей выполняют короткоходными, т. е. у них S/D — отношение хода поршня к диаметру цилиндра — меньше единицы (0,87—0,95). Такая конструкция позволяет получить при высоких числах оборотов коленчатого вала двигателя умеренную скорость поршня, уменьшает отдачу теплоты в охлаждающую жидкость, разгружает подшипники от инерционных сил, улучшает износостойкость поршней и цилиндров, уменьшает механические потери в двигателе.

Блок цилиндров отливают вместе с верхней частью картера двигателя из чугуна (ЗИЛ-131), легированного чугуна (ЯМЗ) или из алюминиевого сплава (ЗМЗ-66). Плоскость разъема картера двигателей обычно располагают ниже оси коленчатого вала, что повышает жесткость картера.

Для лучшей приспособленности двигателя ЗИЛ-131 к работе при значительных продольных и поперечных наклонах автомобиля, а также к преодолению глубоких бродов его нижний картер по сравнению с ЗИЛ-130 изменен. Он имеет колодец, в который постоянно погружен неподвижный маслоприемник.

Для повышения износостойкости стенок цилиндров и упрощения ремонта и сборки двигателя в блоки цилиндров запрессовывают вставные сменные гильзы из кислотостойкого чугуна. Уменьшение износа верхней части гильзы достигается установкой в нее короткой износостойкой вставки (у двигателей ЗМЗ длина вставки 50 мм).

Рис 3. Кривошипно-шатунный и газораспределительный механизмы двигателя ЯМЗ-236

1 — толкающая штанга; 2 и 13 — шайбы; 3 — ось коромысла; 4 и 5 — клапанные пружины; 6 — клапан; 7 — опорная шайба пружин; 8 — сухари; 2 — направляющая втулка; 10 — коромысло; 11 — контргайка; 12 — регулировочный винт; 14 и 23 — стопорные кольца; 15 — толкатель; 16 — распорная втулка; 17 — чугунные втулки; 18 — ось толкателей; 19 — распределительный вал; 20 — компрессионные кольца; 21 и 24 — маслосъемные кольца; 22 — поршневой палец; 25 — поршень; 26 — шатун; 27 — вкладыши; 28 — крышка шатуна; 29 — замочная шайба; 30 — шатунный болт; 31 — шестерня коленчатого вала: 32 — шестерня распределительного вала

Головки цилиндров делают съемными и отливают из алюминиевого сплава, который, помимо уменьшения веса, улучшает отвод теплоты и позволяет повысить степень сжатия примерно на 0,2—0,3 единицы.

Дизельные двигатели ЯМЗ имеют чугунные головки цилиндров, по одной на каждый ряд цилиндров. В головку цилиндров запрессованы металлокерамические направляющие втулки клапанов и чугунные седла выпускных клапанов. Сталеасбестовая прокладка головки цилиндров (толщиной 1,4 мм) имеет окантовку из стального листа для отверстий цилиндров и медную окантовку отверстий для прохода воды. Между головкой цилиндров и крышкой коромысел устанавливают профилированную резиновую прокладку.

Существенное влияние на протекание рабочего процесса, на детонацию и экономичность двигателя оказывает форма камеры сгорания. При нижних клапанах распространенной формой является Г-образная вихревая камера с расположением свечи зажигания над клапанами, при верхних клапанах — клиновидная с односторонним расположением клапанов или полусферическая с двусторонним расположением клапанов. Камера сгорания двигателей ЯМЗ выполнена в виде выемки в поршне (см. рис. 3).

Шатунно-поршневая группа.

Поршни двигателей отливают из алюминиевых сплавов, так как их теплопроводность в 3—4 раза выше, чем чугуна, что понижает температуру поршня, повышает наполнение и позволяет увеличить степень сжатия (без появления детонации) примерно на 0,5 единицы. Кроме того, поршни из алюминиевых сплавов легче чугунных.

В связи с более сильным нагревом и большим расширением днища и головки поршня его диаметр в верхней части должен быть меньше, чем в нижней. При сборке двигателей поршни подбирают по цилиндрам так, чтобы зазор между юбкой поршня и цилиндром (гильзой) для разных двигателей составлял 0,012—0,08 мм.

Поршни, изготовленные из алюминиевого сплава, обычно имеют прорези, которые предупреждают заедание поршня при нагреве и позволяют уменьшить зазор между стенкой цилиндра и юбкой поршня.

При нагреве поршень расширяется сильнее в направлении оси поршневого пальца, где в бобышках сосредоточена наибольшая масса металла. Чтобы поршень при нагреве получил цилиндрическую форму, его диаметр в плоскости, перпендикулярной оси пальца, делают больше, чем в осевом направлении. Покрытие юбки поршня тонким слоем олова (0,004—0,006 мм) улучшает приработку поршней к цилиндрам и предохраняет их от задиров.

Для уменьшения силы ударов поршня о стенки гильзы при переходе его через в. м. т. в процессе сгорания—расширения ось отверстия под поршневой палец смещают от оси поршня в наиболее нагруженную сторону (на рисунке 1 влево) на 1,5 мм (ЗМЗ-66).

В головку поршня двигателя ЗИЛ-131 залито упрочняющее чугунное кольцо 4 (см. рис. 4, в), в котором прорезана канавка для верхнего компрессионного кольца 1.

Для облегчения поршня и свободного хода противовесов коленчатого вала при нижних положениях поршней нерабочая часть юбки вырезается.

Поршень двигателей ЯМЗ отлит из высококремнистого алюминиевого сплава. Головка поршня имеет форму овала. Разность диаметров головки и юбки поршня составляет 0,43 мм.

Поршневые кольца отливают из серого чугуна или чугуна, легированного хромом и вольфрамом (ЯМЗ). Для повышения износостойкости поверхность верхнего компрессионного кольца подвергают пористому хромированию, остальные кольца для ускорения приработки покрывают слоем олова (0,003—0,006 мм).

Зазоры между кольцами и канавками поршня по высоте не должны превышать 0,08 мм, зазор в стыке кольца — 0,2—0,5 мм; стык (замок) у колец чаще прямой.

Для ускорения приработки колец на их наружной и внутренней поверхностях выполняют фаски или канавки (рис. 4), способствующие скручиванию кольца в такте сгорание—расширение. В результате скручивания кольцо прижимается к цилиндру только нижней кромкой, следовательно, быстрее прирабатывается. У двигателей ЯМЗ для тех же целей на наружной поверхности второго и третьего компрессионных колец выполнены канавки (рис. 4, б) глубиной 0,3 мм, поверхность которых покрыта слоем олова (0,05—0,10 мм).

Маслосъемные кольца устанавливают ниже компрессионных; количество их одно-два. Маслосъемное кольцо двигателя ЗИЛ-131 (рис. 4, г) состоит из двух стальных кольцевых дисков 5, осевого 6 и радиального 7 расширителей. Вследствие быстрой прирабатываемости и эластичности стальные кольца хорошо прилегают к стенкам цилиндра.

Рис 4. Поршневые кольца: а — 3M3-66; б — ЯМЗ; в и г — ЗИЛ-131

1 — верхние компрессионные кольца; 2 — средние компрессионные кольца; 3 — маслосъемные кольца; 4 — упрочняющее чугунное кольцо; 5 — кольцевые диски маслосъемного кольца; 6 — осевой расширитель; 7 — радиальный расширитель

Поршневой палец изготовляют полым из легированной цементованной или углеродистой стали, закаленной нагревом токами высокой частоты. Наиболее распространены плавающие пальцы, свободно поворачивающиеся в верхней головке шатуна и в бобышках поршня. От осевого смещения плавающий палец предохраняется пружинными кольцами, расположенными в выточках бобышек поршня.

Шатуны изготовляют из легированной или углеродистой стали. В верхнюю головку шатуна запрессовывают втулку из специальной или оловянистой бронзы. Нижняя головка — разъемная, с тонкостенными стальными вкладышами, залитыми слоем баббита (толщиной 0,3—0,4 мм) или свинцовистого сплава СОС-6-6.

Двигатели автомобилей ЗИЛ-131 имеют триметаллические вкладыши — на стальную ленту нанесен медноникелевый подслой, залитый сплавом СОС-6-6. Вкладыши шатунных подшипников V-образных двигателей Заволжского моторного завода выполнены из сталеалюминиевой ленты, антифрикционный слой которой состоит из 20% олова и 0,5% меди на алюминиевой основе. В двигателях ЯМЗ применены трехслойные вкладыши коренных и шатунных подшипников: стальное основание, рабочий слой из свинцовистой бронзы и тонкий слой специального свинцовооловянистого сплава, уменьшающий износ шеек и повышающий долговечность коленчатого вала.

Шатун двигателей ЯМЗ имеет масляный канал, в который запрессована втулка, дозирующая поступление масла для смазки поршневого пальца. Плоскость разъема крышки нижней головки шатуна расположена под углом 55° к оси стержня шатуна. Такая конструкция позволяет монтировать шатун через цилиндр. Для надежной фиксации крышки на плоскости разъема сделаны треугольные шлицы.

Коленчатый вал.

Форма коленчатого вала зависит от тактности двигателя, числа, расположения (рядности) и порядка работы цилиндров. Формы валов, количество опор и наиболее распространенные порядки работы цилиндров четырехтактных двигателей указаны в таблице 1.

Число цилиндров	Формы коленчатых валов	Количество опор	Наиболее распространенные порядки работы цилиндров
4		2, 3, 4 и 5	1-3-4-2 1-2-4-3
6		3, 4 и 7	1-5-3-6-2-4 1-4-2-6-3-5
V6		4	1-4-2-5-3-6
V8		5	1-5-4-2-6-3-7-8

Таблица 1. Формы коленчатых валов и порядок работы цилиндров четырехтактных двигателей с рядным и V-образным расположением цилиндров.

Коленчатые валы штампуют из стали или отливают из магниевого чугуна (ЗМЗ-66). Коренные шейки имеют больший диаметр, чем шатунные; для подвода смазки от коренных шеек к шатунным просверливают наклонные каналы. Коренные и шатунные шейки коленчатого вала выполняют полыми; полости шатунных шеек представляют собой грязеуловители, которые при ремонте можно очищать, отвертывая пробки. Эти пробки для предотвращения самоотвертывания раскернивают.

Для уравновешивания центробежных сил и ослабления вибрации двигателя применяют противовесы, которые выполняют как одно целое с валом или крепят к щекам вала винтами (ЯМЗ). Двигатели ЯМЗ имеют, кроме того, выносные противовесы на носке коленчатого вала и на маховике. Коренные и шатунные шейки коленчатого вала закалены нагревом токами высокой частоты.

В коренных подшипниках коленчатых валов применяют тонкостенные вкладыши той же конструкции, что и в шатунных. Вкладыши коренных подшипников двигателей Заволжского моторного завода изготовляют из триметаллической ленты: стальная лента, металлокерамический подслой (60% меди и 40% никеля) и антифрикционный сплав СОС-6-6.

Рис 5. Передний конец коленчатого вала и привод распределительного вала (ЗМЗ-66): 1 — шкив коленчатого вала; 2 — датчик ограничителя оборотов; 3 — эксцентрик привода топливного насоса; 4 — балансир; 5 — упорный фланец; 6 — шестерня распределительного вала; 7 — штифт; 8 и 9 — стальные шайбы; 10 — упорная шайба; 11 — шестерня коленчатого вала.

Осевые нагрузки коленчатого вала в большинстве двигателей воспринимаются упорной стальной шайбой 10 (рис. 5) и стальными, залитыми с одной стороны баббитом шайбами 8 и 3, расположенными по обе стороны переднего коренного подшипника. Передняя шайба 9 стороной, залитой баббитом, обращена к упорной шайбе 10. Задняя шайба 8 стороной, залитой баббитом, обращена к торцу щеки коленчатого вала. В двигателях ЗИЛ упорные шайбы имеют медноникелевый подслой, покрытый сплавом СОС-6-6. В двигателях ЯМЗ осевые нагрузки воспринимаются бронзовыми полукольцами, расположенными в заднем подшипнике.

Осевой зазор коленчатого вала в двигателях ЗМЗ составляет 0,075—0,175 мм, в двигателях ЯМЗ — 0,121—0,265 мм.

Коленчатый вал балансируют динамически в сборе с маховиком и сцеплением путем удаления излишнего металла со щек и противовесов вала или обода маховика или при помощи балансировочных грузиков, устанавливаемых на фланце ведомого диска сцепления.

Крутильные колебания коленчатого вала. Если носок вала закрепить неподвижно, а к маховику приложить силу, коленчатый вал будет скручен на некоторый угол. Если прекратить действие скручивающей силы, то вал под влиянием сил упругости и сил инерции маховика будет раскручиваться и начнет колебаться с частотой, зависящей от его длины, поперечного сечения и материала. Такие колебания называют свободными, упругими колебаниями кручения, а их частоту — собственной частотой. При работе двигателя переменные силы S (см. рис. 1) в течение цикла создают второй вид колебаний вала — вынужденные колебания, частота которых зависит от числа оборотов вала, числа цилиндров и тактности двигателя.

Рис 6. Гаситель крутильных колебаний коленчатого вала двигателя

При некотором (критическом) числе оборотов частота свободных колебаний кручения и частота вынужденных колебаний вала совпадают или становятся кратными, наступает явление резонанса. При резонансе колебаний в материале вала возникают высокие внутренние напряжения, амплитуда колебаний вала при этом возрастает до пределов, при которых возможно его разрушение.

Для ослабления крутильных колебаний применяют особые гасители — демпферы; принцип их действия основан на приложении к валу противодействующих сил, вызывающих затухание колебаний. Гасители устанавливают на ступице шкива привода вентилятора, т. е. там, где амплитуда колебаний достигает наибольшей величины и где гаситель лучше охлаждается.

Гаситель (рис. 6) состоит из двух маховичков — большого 3 и малого 2, привулканизованных слоями резины к фланцам 1 и 4, укрепленным на шкиве 5. Крутильные колебания коленчатого вала вызывают колебательное движение маховичков 2 и 3 относительно переднего конца вала, поэтому в слоях резины возникает внутреннее (молекулярное) трение, уменьшающее амплитуду колебаний вала. Описанный гаситель крутильных колебаний устанавливают в двигателях ЯМЗ-М206А.

¹ Сила инерции переменна по величине и по направлению. Направление этой силы на рис. 1 соответствует началу такта сгорание—расширение.

В.М. Кленников, Н.М. Ильин

Статья из книги «Устройство грузового автомобиля». Читайте также другие статьи из

Глава «Кривошипно-шатунный и газораспределительный механизмы двигателя»:

Поделиться в FacebookДобавить в TwitterДобавить в Telegram

КШМ двигателя Д-240. Маховик, коленвал и поршневая трактора МТЗ-82

Основными деталями кривошипно-шатунного механизма (КШМ) дизеля Д-240 являются: коленвал, поршневая группа, поршневые кольца и пальцы, шатуны, маховик, шатунные и коренные вкладыши подшипников.

Коленвал

Коленчатый вал трактора МТЗ-82 изготовлен из стали и подвергнут закалке поверхности токами высокой частоты. Вал имеет четыре шатунные и пять коренных шеек и оснащен съемными противовесами, установленные на первой, четвертой, пятой и восьмой шейки. Благодаря противовесам снижается износ коренных подшипников и уменьшается воздействие центробежных сил от неуравновешенных масс кривошипов. Шатунные шейки имеют полости закрытые заглушками, внутри которых происходит очистка масла, поступающее от коренных шеек по наклонным каналам в щеках.

Размеры шеек коленвала (размерная группа)

На переднем конце коленвала смонтированы: шестерня привода масляного насоса; шестерни привода шестерен распределения; шкив клиноременного привода вентилятора, водяного насоса и генератора. На заднем фланце установлен маховик с зубчатым венцом. От осевого перемещения коленчатый вал ограничивается благодаря упорным полукольцам изготовленные из алюминиевого сплава. Упорные полукольца блокируются от проворачивания выступами, вставленные в фрезерованные канавки в крышке подшипника.

Кривошипно-шатунный механизм: 1 — болт маховика; 2 — болт сцепления; 3 — маховик; 4 — венец маховика; 5 — маслосъемные кольца; 6 — компрессионные кольца; 7 — поршень; 8 — втулка головки шатуна; 9 — поршневой палец; 10 — стопорное кольцо; 11 — вкладыш коренного подшипника; 12 — упорное полукольцо; 13 — вкладыш шатунного подшипника; 14 — коленчатый вал; 15 — противовес; 16 — крышка шатуна; 17 — шатунный болт; 18 — шатун; 19 — болт коленчатого вала; 20 — шкив; 21 — шестерня привода масляного насоса; 22 — шестерня.

Шатун

Штампованные шатуны д-240 двутаврового сечения изготовленные из стали, в верхнюю головку которого запрессована биметаллическая втулка. Во втулке и верхней части шатуна предусмотрены специальные отверстия для смазки поршневого пальца. Нижняя головка разъемная и расточена для монтажа шатунных вкладышей. От осевого смещения вкладыши фиксируются выштампованными усиками, вставляемые в фрезерованные прорези в расточках крышки и шатуна. Крышка шатуна присоединяется к нему болтами.

Поршень двигателя Д-240

Поршневая группа для дизеля изготавливается из алюминиевого сплава. Боковая поверхность поршня имеет две канавки под маслосъемные и три под компрессионные кольца. Для отвода масла в канавках для установки колец просверлены отверстия. Камера сгорания в днище поршня имеет шатровую форму. В бобышках поршня расточены отверстия для установки поршневого пальца и канавки для стопорных колец.

Поршневые кольца изготавливаются из специального сплава чугуна. На каждом поршне устанавливается три компрессионных кольца и четыре маслосъемных скребкового типа.

Вкладыши шатунных и коренных подшипников сделаны из биметаллической сталеалюминиевой полосы. В верхних половинках коренных вкладышей имеются отверстия, совпадающие с маслоподводящими каналами блоке. Кроме того, в первой, третьей и пятой верхних половинках имеются отверстия для отвода масла от коренных подшипников к опорным шейкам распредвала.

Схема расположения поршневых колец на поршне: 1 — верхнее компрессионное кольцо; 2 — компрессионные кольца; 3 — верхние маслосъемные кольца; 4 — нижние маслосъемные кольца; 5 — поршень.

Маховик двигателя Д-240

Маховик изготовлен из серого чугуна в форме массивного диска, крепящегося к фланцу коленвала шестью болтами и фиксируемый парой установочных штифтов. На маховик напрессован зубчатый венец, с которым входит в зацепление шестерня включения редуктора пускача, либо шестерня включения стартера. Для проверки и регулировки угла опережения впрыска топлива, на маховике имеется специальное отверстие (метка).

Кривошипно-шатунный механизм (КШМ) двигателей тракторов

Кривошипно-шатунный механизм (КШМ) предназначен для преобразования поступательного движения поршней во вращательное движение коленчатого вала (КВ). Основными движущимися деталями КШМ являются: поршни с кольцами, поршневые пальцы, шатуны, шатунные и коренные подшипники, маховик.
Поршневая группа деталей дизелей Д-65 и Д-240 сконструирована одинаково.

Рис. 1. Поршень с шатуном (Д-65):
1 — шатунный болт; 2 — крышка головки шатуна; 3 — шатун; 4 — стопорное кольцо; 5 — поршневой палец; 6 — поршень; 7 — маслосъемные кольца; 8 — компрессионные кольца; 9 — верхнее компрессионное кольцо; 10 — втулка верхней головки шатуна; 11 — верхний вкладыш шатуна; 12-нижний вкладыш шатуна; 13 — контровочная пластина

Поршни 6 (рис. 1) изготовлены из алюминиевого сплава с тремя канавками под компрессионные 8, 9 и двумя под маслосъемные 7 кольца. В днище поршня выполнена камера сгорания. В канавках под маслосъемные кольца и ниже этих канавок просверлены отверстия для отвода масла внутрь поршня. По наружному диаметру юбки (в плоскости, перпендикулярной к плоскости поршневого пальца) поршни подразделяются на три размерные группы (табл. 1). Клеймо группы наносится на днище.

Комплектовочные размеры поршней и гильз. Таблица 1.

В комплект на двигатель поршни, шатуны и поршневые пальцы подбирают одинаковой размерной группы. Отклонение в массе поршней и шатунов в комплекте не должно превышать 15 г. По диаметру отверстия под поршневой палец поршни делят на две размерные группы (табл. 2), их маркируют краской на бабышках. Поршневые пальцы 5 полые, стальные. От осевого перемещения они удерживаются разжимными стопорными кольцами 4. установленными в канавки поршня. По наружному диаметру пальцы разделены на две группы (см. табл. 2). Маркировочная краска нанесена на внутренней поверхности пальца.

Комплектовочные размеры поршней и пальцев. Таблица 2.

Поршневые кольца изготовлены из специального чугуна. Верхнее компрессионное кольцо 9 прямоугольного сечения для уменьшения износа хромировано (по наружной поверхности). Второе и третье 8 кольца для улучшения компрессионных качеств имеют на внутренней поверхности торсионные выточки, которые при установке колец должны быть обращены вверх — к днищу поршня. В две нижней канавки поршня установлены маслосъемные 7 кольца скребкового типа (по два в каждую канавку). Верхним в канавке устанавливается кольцо с дренажными окнами на торце, а нижний — без окон; выточки наружной поверхности маслосъемных колец должны быть обращены вниз (к юбке поршня).

Замки поршневых колец располагают на ровном расстоянии по окружности. Нормальный зазор в замке новою кольца, установленного в новую гильзу 0,3…0,7 мм. Поршневые кольца заменяют, если зазор превышает 4 мм, а поршни меняют, если зазор между новым кольцом и канавкой в поршне по высоте превышает 0.4 мм. У дизеля Д-245 несколько иное расположение колец (рис. 2): под верхнее компрессионное кольцо трапецеидальной формы залито чугунную вставку 2, маслосъемное кольцо одно — как и у Д-240 — коробчатого типа.

Рис. 2. Схемы расположения колец на поршнях дизелей Д-245 (а) и Д240 (б):
а) 1 — поршень; 2 — чугунная вставка типа «нирезист»; 3 — верхнее компрессионное кольцо; 4, 5 — компрессионные кольца; 6 — маслосъемное кольцо;
б) 1 — поршень; 2 — верхнее компрессионное кольцо; 3, 4 — компрессионные кольца; 5 — маслосъемное кольцо

Шатуны 3 (см. рис. 1) стальные, штампованные. В верхнюю головку запрессована биметаллическая втулка 10 (стальная со слоем бронзы). Для смазки поршневого пальца в верхней головке шатуна и втулки есть отверстие. По внутреннему диаметру втулки сортируются на две размерные группы: с большим диаметром маркируются черной краской, с меньшими — желтой.

Нижняя головка шатуна разъемная. Разъем выполнен косым для обеспечения прохода нижней части через гильзу при монтаже. Крышка 2 прикреплена к шатуну двумя болтами из высококачественной стали, застопоренными контровочной пластиной 3.

Рис. 3. Детали кривошипно-шатунного и газораспределительного механизмов (Д-65):
1 — заглушка; 2 — шестерня распределительного вала; 3 — упорное кольцо; 4 — упорный фланец распределительного вала; 5 — толкатели; 6 — впускной клапан; 7 — направляющая втулка клапана; 8 — рукоятка декомпрессионного механизма; 9 — валики декомпрессионного механизма; 10-регулировочный винт: 11 — выпускной клапан; 12 — штанги толкателя; 13-поршень; 14-распределительный вал; 15 — втулка; 16 — палец маховика, 17 — шарикоподшипники; 18 — болт; 19 — маховик; 20 — венец; 21 — шатун; 22, 23 — вкладыши коренных подшипников; 24 — шестерня; 25 — маслоотражатель; 26 — коленчатый вал; 27 — шкив; 28 — головка цилиндров; 29 — пружина клапана; 30 — сухарик; 31 — регулировочный винт декомпрессионного механизма; 32 — коромысло клапана.

Коленчатый вал 26 (рис. 3) полноопорный, стальной (имеет пять коренных и четыре шатунных шейки, рабочие поверхности которых закалены токами высокой частоты. В шатунных шейках имеются полости для центробежной очистки масла при вращении вала. Полости закрыты резьбовыми заглушками 1, которые у двигателя должны быть одной группы (номер группы выбит на торце заглушки), чтобы не нарушилась балансировка вала. На первой, четвертой, пятой и восьмой щеках вала дизелей Д-240 и Д-245 закреплены съемные противовесы. Их наличие обусловлено большой частотой вращения коленчатого вала этих дизелей (2200 мин1), вследствие чего центробежные силы сильно возрастают. Установка противовесов значительно уменьшает нагрузки на подшипники. В коренных и шатунных шейках выполнены сверления, по которым подается масло к подшипникам (вкладышам).

На переднем конце вала смонтированы шестерня 24 привода распределения и насоса системы смазки, шкив 27 привода насоса системы охлаждения и генератора, маслоотражатель 25; на заднем — маслоотражатель и маховик 19 с напрессованным на нем зубчатым стальным венцом 20.

Коленчатые валы изготовлены с шейками двух номинальных размеров: для дизелей Д-65 диаметры коренных и шатунных шеек в первом номинале соответственно равны 85,25 мм и 75,25 мм, во втором — 85,0 мм и 75,0 мм; для дизелей Д-240 в первом — 75,25 мм и 68,25 мм, во втором — 75,0 мм и 68,0 мм. Валы с шейками второго стандартного размера имеют на первой щеке обозначение: 2КШ — все шейки вала второго номинала; 2К — коренные второго, а шатунные первого; 2Ш — шатунные второго, а коренные первого.

Вкладыши коренных 23 и шатунных 22 подшипников изготовлены из сталеалюмнневой ленты. От перемещений и проворачивания вкладыши стопорятся выштампованными на них усиками, входящими во фрезеровки в постелях вкладышей в блоке и шатуне. На наружной поверхности вкладыша проставляется товарный знак завода и размер, а на внутренней поверхности усика (выступа) — клеймо (« + » или « — ») группы вкладыша по высоте (вкладыши комплектуют так, чтобы один из них имел на усике знак « + » а другой « — » или оба без маркировки). Отверстия в верхних половинках коренных вкладышей совпадают с маслоподводящими каналами в блоке.

Зазор в подшипниках нового или отремонтированного двигателя в пределах 0,065…0,123 мм для шатунных и 0,070…0,134 мм для коренных. При увеличении зазора в шатунных подшипниках до 0,25 мм и овальности шейки более 0,06 мм или в коренных — соответственно до 0,3 и более 0,1 мм шейки вала шлифуют на соответствующий ремонтный размер.

Осевое перемещение вала ограничивается упорами пятой коренной шейки (допустимое в эксплуатации — 0,5 мм), осевое перемещение нижней головки шатуна допускаемое 0,7 мм. Коленчатый вал и маховик дизеля Д-240 изображены на рис. 4.

Рис. 4. Коленчатый вал с маховиком (Д-240):
1 — коренная шейка; 2 и 12 — щеки; 3 — упорные кольца; 4 — нижний вкладыш коренного подшипника; 5 — маховик; 6 — маслоотражательная шайба; 7 — установочный штифт; 8 — болт; 9 — зубчатый венец; 10 — верхний вкладыш коренного подшипника; 11 — шатунная шейка; 13 — галтель; 14 — противовесы; 15 — болт крепления противовеса; 16 — замковая шайба; 17 — шестерня коленчатого вала; 18 — шестерня привода масляного насоса; 19 — упорная шайба; 20 — болт; 21 — шкив; 22 — канал подвода масла в полость шатунной шейки; 23 — пробка; 24 — полость в шатунной шейке; 25 — трубка для масла.
[Тракторы «Беларус» семейств МТЗ и ЮМЗ. Устройство, работа, техническое обслуживание. Я.Е. Белоконь, А.И. Окоча, Г.В. Шкаровский; Под ред. Я.Е. Белоконя. 2003 г.]

Статьи о КШМ двигателей тракторов: Кривошипно-шатунный механизм; Кривошипно-шатунный механизм двигателя СМД-60; Особенности эксплуатации КШМ; ТО КШМ и ГРМ двигателя трактора; Уход за кривошипно-шатунным механизмом

Кривошипно-шатунный механизм. Расчет кривошипно-шатунного механизма.

В кривошипных прессах в качестве главного исполнительного механизма применяется кривошипно-шатунный механизм (КШМ). Он относится к четырехзвенным плоским механизмам с одной степенью подвижности. Механизм состоит из ведущего кривошипа и двухповодковой группы – шатун — ползун. КШМ применяется в двух модификациях: в виде аксиального (центрального) и дезаксиального, который, как наиболее общий случай, представлен на рисунке.

Кривошипные прессы. Общие сведения.

Кривошипно-шатунный механизм

Исходной величиной при выборе размеров звеньев КШМ является величина полного хода ползуна, заданная стандартом или по техническим соображениям для тех типов машин, у которых максимальная величина хода ползуна не оговаривается (ножницы, автоматы и др.).

КШМ используется также и в ГКМ — Горизонтально-ковочная машина. ГКМ.

На рисунке введены следующие обозначения: dО, dА, dВ – диаметры пальцев в шарнирах; е – величина эксцентриситета; R – радиус кривошипа; L – длина шатуна; ω – угловая скорость вращения главного вала; α – угол недохода кривошипа до КНП; β – угол отклонения шатуна от вертикальной оси; S – величина полного хода ползуна.

По заданной величине хода ползуна S (м) определяется радиус кривошипа:

R = S/2 (м)

Для аксиального кривошипно-шатунного механизма функции перемещения ползуна S, скорости V и ускорения j от угла поворота кривошипного вала α определяются следующими выражениями:

S = R [1 — cosα + (λ/4)(1 — cos2α)], (м)

V = ω R [sinα + (λ/2)(sin2α)], (м/с)

j = ω² R [cosα + λ cos2α], (м/с²)

Для дезаксиального кривошипно-шатунного механизма функции перемещения ползуна S, скорости V и ускорения j от угла поворота кривошипного вала α соответственно:

S = R [1 — cosα + (λ/4)(1 — cos2α) + k ? sinα + 0,5 (k² λ²)/(1+ λ)], (м)

V = ω R [sinα + (λ/2)(sin2α) + k λ cosα], (м/с)

j = ω² R [cosα + λ cos2α — k λ sinα], (м/с²)

где λ – коэффициент шатуна, значение которого для универсальных прессов определяется в пределах 0,08…0,014;
ω– угловая скорость вращения кривошипа, которая оценивается, исходя из числа ходов ползуна в минуту (с^-1):

ω = (π n) / 30

У кривошипного пресса номинальное усилие не выражает действительного усилия, развиваемого при помощи привода, а представляет собой предельное по прочности деталей пресса усилие, которое может быть приложено к ползуну. Номинальное усилие соответствует строго определенному углу поворота кривошипного вала. Для кривошипных прессов простого действия с односторонним приводом за номинальное принимается усилие, соответствующее углу поворота α = 15…20^о, считая от нижней мертвой точки.

Кшм центральный (аксиальный, линейный) кшм (рис. II) Ось цилиндра совпадает с осью коленчатого вала. Характеризуется величиной = 0,24…0,32. Здесь r

Типы кривошипно-шатунных механизмов

КШМ

1. Центральный (аксиальный, линейный) КШМ (рис. 1.II)

Ось цилиндра совпадает с осью коленчатого вала. Характеризуется величиной = 0,24…0,32. Здесь r – радиус кривошипа; ℓ — длина шатуна. λ называют критерием геометрического подобия двигателей.

2. Смещенный (дезаксиальный, линейный) КШМ (рис. 2.II, 3.II)

Их два типа:

1-й тип (рис. 2.II) ось цилиндра не совпадает с осью коленчатого вала и находится от оси коленчатого вала на расстоянии «а»; для этой конструкции, помимо λ, существует еще один показатель к = = 0,02…0,1.

Назначение дезаксажа (сейчас он практически не применяется): 1) из соображений компоновки (цель – скомпоновать коленчатый и кулачковый валы, чтобы не допустить встречи их элементов; 2) с целью уменьшить боковую силу N в момент резкого повышения давления газовых сил (разнести по времени момент перекладки поршня и максимальное значение давления ). Силу N покажите на рисунках).

2-й тип (рис. 3.II) смещается ось поршневого пальца

относительно оси цилиндра на величину а = (0,01…0.03)D. (сейчас получила наибольшее распространение). Это уменьшает силу N в момент перекладки поршня аналогично предыдущему).

3. Схема с прицепным шатуном в V-образных ДВС (рис. 4.II, 5.II)

Правый шатун 5 через специальный палец 4 крепится к основному шатуну 3. Левые и правые поршни имеют различные кинематические параметры. Длина шатунов ℓ_шл (левый шатун) и ℓ_шп (правый шатун) различны. Находят применение в V-образных ДВС (двигатель Д-12А).

1. 
   Схемы КШМ V-образных двигателей (рис. 6.II)
   

Их два типа: а) центрального сочленения (рис. 7.II, а, б): 1 – вильчатый шатун; 2 – центральный шатун. Длина шатунов одинакова;

б)

б) с последовательным расположением кривошипных головок на шатунной шейке (рис. 8.II)

Схема очень широко распространена.

1 – Шатуны двух противолежащих цилиндров; 2 – шатунная шейка; 3 – кривошипные головки шатунов; 4 – щека; 5 – подшипники коренных опор коленчатого вала; 6 – коренные опоры

Схема центрального кривошипно-шатунного механизма (рис. 9.II)

Основные обозначения

А – поршень находится в верхнем крайнем положении. Это верхняя мертвая точка – ВМТ. При этом точка D находится в положении .

Точка D – общая ось шатунной шейки коленчатого вала и кривошипной головки шатуна.

С – ось поршневого пальца

B – поршень находится в нижней мертвой точке – НМТ. При этом точка D находится в положении .

ℓ — длина шатуна. (часто обозначается как ℓ_ш)

r – радиус кривошипа

β – угол отклонения оси шатуна от оси цилиндра

φ – текущее значение угла поворота коленчатого вала

S = 2r – ход поршня (путь, проходимый поршнем при перемещении его от ВМТ к НМТ.

Х = Х₁ + Х₂ – текущее значение перемещения поршня. Складывается из двух составляющих: Х₁ – перемещение поршня 1-го порядка. Связано с поворотом радиуса кривошипа r; Х₂ — перемещение второго порядка. Связано с конечной длиной шатуна через выражение .

Перемещение поршня

Определяется выражением (приближенно):

= Х₁ + Х₂ (1.II)

Первая производная от Х определяет скорость поршня:

= V₁ + V₂ (2.II)

Средняя скорость поршня С_п = составляет 9…16 м/с.

Вторая производная от Х определяет ускорение поршня:

= j₁ + j₂ (3.II)

На рис. 10.II изображены графики перемещения поршня Х = Х_I + Х_II.

Пропущенная лекция 21.02.08

/var/www/auto-dnevnik.com/tw_refs/3/2778/2778.doc

Munnar для выращивания клубники

Зеленые холмы Муннара могут вскоре приобрести новый цвет, поскольку около 3500 фермеров готовятся к коммерческому выращиванию клубники как высокоценной культуры.

Садоводческая миссия штата Керала (KSHM) разработала пилотный проект по выращиванию клубники на площади 750 акров. Министр сельского хозяйства К.П. Моханан сказал The Hindu , что проект будет реализован в рамках схемы высокотехнологичного сельского хозяйства, объявленной в бюджете.

Он сказал, что фермеры, как ожидается, получат большую прибыль за счет диверсификации в области выращивания дорогостоящих культур. «Инициатива запускается в Идукки, потому что холодный климат предлагает наиболее благоприятные условия для выращивания сельскохозяйственных культур. У нас есть планы в ближайшее время распространить проект на другие части штата, предоставив оборудование для орошения туманом ». Несколько плантаторов в Неллиампати уже экспериментировали с клубникой и нашли это успешным.

Директор

KSHM К. Пратхапан сказал, что проект стоимостью 6 крор был разработан, чтобы обеспечить фермерам добавленную стоимость и рыночные связи.Horticorp будет закупать клубнику у фермеров, а подразделения Kudumbasree займутся переработкой свежих фруктов. KSHM определила группу женщин, которые будут отправлены в Центральный научно-исследовательский институт пищевых продуктов, Майсур, для обучения переработке фруктов. Совет по продвижению овощей и фруктов штата Кералам (VFPCK) объединит фермеров в общества.

Холодильный склад возрожден

Министр сказал, что холодильный склад, созданный Horticorp в Муннаре 11 лет назад, был возрожден для проекта в рамках предложения о создании общегосударственной холодовой цепи.Необработанные фрукты будут доставлены в Кочи в рефрижераторах и проданы через торговые центры. Г-н Моханан сказал, что клубника будет продаваться под брендом Safe to Eat.

С сентября

Ожидается, что посевы начнутся к первой неделе сентября. Посадочные материалы будут закуплены в аккредитованных питомниках на севере Индии.

KSHM также подготовил еще одну схему для поощрения выращивания в приусадебных условиях таких фруктов, как яблоко, груша, слива и персик, которые идеально подходят для выращивания в регионах с мягкой зимой.Проект будет реализован в Ваттаваде, Канталлоре и Муннаре в рамках планов по превращению Идукки в фруктовую ленту. Каждому дому будет предоставлено до 10 саженцев.

ICM Масштаб 1/35 ЗиЛ-131 КШМ Советский армейский автомобиль Пластиковая модель для сборки # 35517 Модельные наборы Модели и модельные наборы prodrones.se

ICM ЗиЛ-131 КШМ в масштабе 1/35 Комплект для сборки пластиковых моделей советской армии # 35517 Комплекты моделей Модели и комплекты моделей prodrones.se

1. Home
2. ICM ЗиЛ-131 КШМ в масштабе 1/35 Комплект для сборки пластиковых моделей советской армии # 35517

Комплект для сборки пластиковых моделей советских машин ЗИЛ-131 КШМ в масштабе 1/35 # 35517, Пластиковые модели автомобилей Советской армии КШМ Комплект для сборки модели № 35517 ЗиЛ-131 ICM в масштабе 1/35, Автомобиль Советской Армии — Комплект для сборки пластиковой модели № 35517, ЗиЛ-131 КШМ в масштабе 1/35 ICM, Исследования и покупки в Интернете, Удовлетворенных покупок, Высокое качество, высокие скидки, Лучшее Качество, Интернет-магазины предоставляют вам изысканные товары.Пластиковая модель советской армии №35517 ЗИЛ-131 КШМ в масштабе 1/35 ИСМ prodrones.se.

ICM в масштабе 1/35 ЗиЛ-131 КШМ Советская армейская машина для сборки пластиковых моделей № 35517

Hoppa till innehåll

ICM Масштаб 1/35 ЗиЛ-131 КШМ, Автомобиль Советской Армии — Пластиковая модель # 35517. Этот модельный набор может потребовать сборки и покраски. Цемент, инструменты и краска не включены. Содержит мелкие детали, рекомендуется для детей от 14 лет.Уровень мастерства 3. ЭТО НЕ ИГРУШКА. 。 Наклейки прилагаются для дополнительной детализации и реализма. 。 Очень подробный. Детали имеют пластиковую текстуру, напоминающую другие материалы. 。 Иллюстрированная инструкция по сборке и схема окраски прилагаются. 。 Новые формы! Более точный и подробный. Требуется меньше очистки. 。 ЗиЛ-131 КШМ в масштабе 1/35, Советская армейская машина — пластиковый модельный комплект № 35517。 ЗиЛ-131 был основным вседорожным грузовиком Советской армии 1970-х и 80-х годов. Серийное производство было запущено в 1967 году. Автомобиль отличался высокой надежностью и проходимостью.Базовая модель использовалась в основном как личный транспорт или 5-тонный грузовой автомобиль. Они поставлялись в страны Варшавского договора, а также во многие страны Азии и Африки. Существовало несколько модификаций ЗиЛ-131 для Советской Армии и гражданского использования, и одна из них — командирская машина КШМ. Всего с 1967 по 1990 год было выпущено около миллиона грузовиков. Небольшие партии шасси для различных автомобилей специального назначения производятся и сейчас. 。。。

ICM 1/35 Масштаб ЗИЛ-131 КШМ Советская Армия Автомобиль Пластиковая Модель Строительный Комплект # 35517

«Юные титаны» идут в кино. Фигурка Робина, сменившего лица, Mattel GDD79.Набор из 15 колотушек / новый дизайн Metro BS-VP — Разнообразный набор пляжных марок компании Red Rooster Toy Company. 11 Pioneer Balloon Company 43770 Onyx Pearl Black, DC Super Hero Girls Harley Quinn 12 Action Doll Mattel DLT65, уникальный подарок на день рождения, подходящий для подростков и взрослых Hero Пазл из серии супергероев из 1000 деталей для взрослых и детей Деревянные пазлы Семейные украшения. Тематические парки Диснея Эксклюзивный игровой набор «Звездные войны: Возвращение джедая», подходящая мини-кукла-сюрприз Дебби Набор из 2 бонусных блестящих блесков для губ с зажимом «Солнечные дни» Кекс Сюрприз Принцесса Издание Ароматическая кукла Дебби, 3D наклейки на стену на потолок на Хэллоуин Кладбище Призрачные тыквы Жуткие наклейки на стены со скелетами Съемные художественные фрески на Хэллоуин для окон в гостиной Бар Паб Украшение для вечеринки на Хэллоуин, обои, мягкая и сверхлегкая нетоксичная волшебная глина с инструментами Набор для лепки QMAY 50 цветов Air Dry Clay для детей Дети Пасхальные художественные ремесла Подарок для мальчиков и девочек и начинающих., Black Bear Tribe Cavemen Bones Black 4, Модный костюм для новорожденных мальчиков и девочек, наряды для фотографий, реквизит, шляпа с ползунками. Demonbane Al Azif 1/7 ПВХ фигурка от Beat, Ailive Многофункциональный Китай Kongming Lock Форма гамбургера Волшебный куб Копилка. Творческая головоломка Кубик Рубика Игрушка Игры для детей Развитие интеллекта. Обучающие игрушки-головоломки для подарков .. King’s deal k00190- 2-1-1 короли сделка стикер стены живая любовь домашний декор стены искусства для детей дома гостиная дом спальня ванная комната кухня офис черный мы реальны.

ICM 1/35 Масштаб ЗИЛ-131 КШМ Советская Армия Автомобиль Пластиковая Модель Строительный Комплект # 35517

Автомобиль Советской Армии
— Пластиковая модель # 35517, ICM 1/35 Scale ZiL-131 KShM, Исследования и покупки в Интернете, Удовлетворенные покупки, Высокое качество, высокие скидки, Лучшее качество, Интернет-магазины предоставляют вам изысканные товары.

фото авиации schleicher ask-21 на JetPhotos

Если вы ищете фотографии конкретного типа самолета, воспользуйтесь этим меню.
Обратите внимание, что из-за нехватки места это меню включает только некоторые из наиболее востребованных самолетов в нашей базе данных. Если самолет, который вы ищете, отсутствует в этом списке, используйте поле «Ключевые слова» ниже в меню поиска.

Некоторые пункты меню включают общую модель самолета, а также более конкретные варианты этого авиалайнера. Эти варианты обозначаются знаком — перед названием самолета.

Например, если выбрать «Boeing 747», отобразятся результаты со всеми самолетами Boeing 747 в нашей базе данных, а при выборе «- Boeing 747-200» будут показаны все варианты Boeing 747-200 в нашей базе данных (Boeing 747-200, Boeing 747- 212B, Boeing 747-283F и др.)

Если вы ищете фотографии конкретной авиакомпании, воспользуйтесь этим меню.

Обратите внимание, что из-за нехватки места в это меню включены только авиакомпании, 10 или более фотографий которых есть в нашей базе данных. Если искомой авиакомпании нет в этом списке, используйте поле «Ключевые слова» ниже в меню поиска.

Авиакомпании перечислены в алфавитном порядке.

Если вы ищете фотографии, сделанные в определенной стране или в конкретном аэропорту, используйте это меню.

Все страны, представленные в нашей базе данных, включены в это меню выбора, которое автоматически обновляется по мере роста базы данных. Прежде чем этот аэропорт будет добавлен в этот список, в базе данных должно быть не менее 20 фотографий из определенного аэропорта.

Используйте эту опцию, чтобы включить в поиск только фотографии, сделанные определенным фотографом.

Это раскрывающееся меню, в дополнение к каждому фотографу, доступному в качестве ограничителя поиска, также показывает количество фотографий, находящихся в настоящее время в базе данных для каждого конкретного фотографа, заключенное в скобки. Например, вариант:
— Пол Джонс [550]
.. означает, что в настоящее время в базе данных содержится 550 фотографий, сделанных Полом Джонсом.

Примечание. Общее количество фотографий, заключенных в скобки, обновляется четыре (4) раза в час и может быть немного неточным.

Фотографы должны иметь 100 или более фотографий в базе данных, прежде чем их имя будет включено в это меню выбора.
Выбор «Все фотографы» является выбором по умолчанию для этого параметра.

Если вы ищете определенную категорию фотографий, используйте это меню.

Вы можете выбрать отображение фотографий только из определенных категорий, таких как «Особые схемы окраски», «Фотографии полетной палубы» и т. Д.К этому списку постоянно добавляются новые категории.

Поле «Ключевые слова», пожалуй, самое полезное поле в нашей поисковой системе.
Используя это поле, вы можете искать любое слово, термин или их комбинации в нашей базе данных.
Каждое поле фотографии охвачено программой поиска по ключевым словам.

Поле Ключевые слова идеально подходит для поиска такой специфики, как регистрация самолетов, имена фотографов, названия конкретных аэропортов / городов, определенные схемы окраски (т.е. «Wunala Dreaming») и т. Д.
Чтобы использовать поле «Ключевые слова», сначала выберите поле поиска «Мир ключей». Вы можете выбрать либо конкретное поле базы данных (авиакомпания, самолет и т. Д.), Либо выбрать соответствие ключевого слова всем полям базы данных.

Затем выберите ограничитель ключевых слов. Есть три варианта выбора:
— это точно
— начинается с
— содержит
. Выберите соответствующий ограничитель для вашего поиска, затем введите ключевое слово (а), которое вы хотите найти, в поле справа.

В поле поиска по ключевым словам регистр не учитывается.

Используйте эту опцию, чтобы включить в поиск только фотографии, сделанные в определенном году.

В этом раскрывающемся меню, помимо каждого года, доступного в качестве ограничителя поиска, также отображается количество фотографий в базе данных за каждый конкретный год, заключенное в скобки. Например, вариант:
— 2003 [55000]
.. указывает, что в настоящее время в базе данных имеется 55 000 фотографий, сделанных в 2003 году.
* Примечание. Общее количество фотографий, заключенных в скобки, обновляется четыре (4) раза в час и может быть немного неточным.

Кроме того, в этом меню доступны диапазоны декад (1990–1999 и т. Д.). При выборе диапазона десятилетий будут отображаться все фотографии, соответствующие другим критериям поиска, из выбранного десятилетия.
Выбор «Все годы» является выбором по умолчанию для этого параметра.

(PDF) Эффективный метод определения состояний на пересечении моря по измерениям волн.

Направленное распределение энергии является унимодальным, если HV58,

, в противном случае

— бимодальным.

Ссылки

Барстоу, С.Ф., Крогстад, Х.Э., 1984. Общая интерпретация данных о направленных океанских волнах

, полученных с буев качки / тангажа / крена.

Моделирование, идентификация и контроль 5, 47–70.

Бендат, Дж. С., Пирсол, А. Г., 1971. Случайные данные: анализ и процедуры измерения

.Вайли. 407 pp.

Benoit, M., Frigaard, P., Sch7ffer, H.A., 1997. Анализ нескольких спектров направленных волн

: предварительная классификация имеющихся методов

. Семинар IAHR по разнонаправленным волнам и их взаимодействию

со структурами сравнение на численном моделировании.

Proc. Int. Symp. bWaves: физическое и численное моделирование Q,

Ванкувер, Канада, стр. 901 — 910.

Boon, JD, Green, MO, Suh, KD, 1996. Бимодальные спектры волн в

нижней части залива Чесапик, энергетика морского дна и осадки

транспорт во время зимних штормов. Исследование континентального шельфа 16

(15), 1965 — 1988.

Де Джироламо, П., 1995. Вычисление направления морской волны для распространения случайных волн

. J. Wat., Порт, Коас., Ocean Eng.

121 (4), 203 — 208.

Донелан М.А., 1980. Теория подобия применяется к прогнозированию высот, периодов и направлений

волн. Proc. Жестяная банка. Побережье. Конф.,

Нац. Res. Совет, Канада, стр. 41–61.

Фригаард, П., Хельм-Петтерсен, Дж., Клопман, Г., Стансберг, Коннектикут,

Бенуа, М., Бриггс, М.Дж., Майлз, М., Деды Морозы , J., Sch7ffer, HA,

Hawkes, PJ, 1997. Список параметров состояния моря IAHR — обновление

разнонаправленных волн.Семинар IAHR по разнонаправленным волнам

и их взаимодействию со структурами Q, 27-й Конгресс IHAR

, Сан-Франциско, Калифорния, стр. 131 — 158.

Герлинг, TW, 1992. Последовательности разделения и массивы направленных океанских волн

спектры в компонентные волновые системы. J.

Атмос. Oceanic Technol. 9, 444–458.

Года, Ю., 1985. Случайные моря и проектирование морских сооружений.

Токийский университет Press, Токио.

Хассельманн, К., Barnett, TP, Bouws, E., Carlson, H., Cartwright,

DE, Enke, K., Ewing, JA, Gienapp, H., Hasselmann, S.,

Krusemann, P., Meerburg, A ., Muller, P., Olbers, DJ, Richter,

K., Sell, W., Walsen, H., 1973. Измерения роста ветрового волнения

и затухания зыби во время Совместного проекта по Северному морю

(JONSWAP). Втор. Hydr. Zeit. A 12, 1 — 95.

Исобе, М., Кондо, К., Хорикава, К., 1984. Расширение MLM для

для оценки спектра направленных волн.Proc. Symp. bOn

Описание и моделирование направленных морей, Кан. J. Civ.

англ. т. 15, pp. 937 — 947.

Йонссон И.Г., 1978. Поток энергии и волновое действие в гравитационных волнах

, распространяющихся по току. J. Hyd. Res. 16 (3), 223–234.

Йонссон, И.Г., Бринк-Кьяер, О., Томас, Г.П., 1978. Волновое воздействие

и установка для волн на поперечном токе. J. Fluid Mech. 87,

401 — 416.

Кобуне, К., Сасаки, Х., Хашимото, Н., 1985. Характеристики

океанских волн у мыса Нодзима в северо-западной части Тихого океана,

, измеренные дискусовым буем. Отчет порта и гавани

Research Institute 24 (3), 3 — 30.

Krogstad, H.E., 1982. О ковариации периодограммы. J.

Анализ временных рядов. 3, 195 — 207.

Krogstad, H.E., 2004. Частное сообщение.

Куик, А.Дж., Ван Веледдер, Г.Ф., Холтуйсен, Л.Х., 1988. Метод

для рутинного анализа данных о продольных и поперечных волнах буев.Journal

of Physical Oceanography 18 (7), 1020 — 1034.

Long, R.B., 1980. Статистическая оценка направленного спектра

оценок, полученных на основе данных с буев по тангажу / крену. J. Phys. Oceanogr.

10, 944 — 952.

Longuet-Higgins, M.S., 1957. Статистический анализ случайной

движущейся поверхности. Фил. Пер. Royal Soc. Лон., Сер. A. 249 (966),

321 — 387.

Lygre, A., Krogstad, H.E., 1986. Оценка максимальной энтропии

направленного распределения в спектрах океанских волн.J. Phys.

Oceanogr. 16, 2052 — 2060.

Мардиа К.В., 1972. Статистика направленных данных. Academic Press,

pp. 357.

Мицуясу, Х., Тасай, Ф., Сухара, Т., Мизуно, С., Окусо, М.,

Хонда, Т., Рикиши, К., 1975. Наблюдения направленного спектра океанских волн

с помощью покровного листа. J. Phys.

Oceanogr. 5 (2), 750-760.

Нвогу, О.Ю., Мансард, E.P.D., Майлз, доктор медицины, Исааксон, М.,

1987.Оценка спектров направленных волн методом максимальной энтропии

. Proc. 22nd IAHR Con., Lausanne,

pp. 363 — 376.

Panizzo, A., Piscopia, R., De Girolamo, P., 2000. Сравнение

между различными методами оценки спектра направленности волн

(на итальянском). Proc. PIANC-AIPCN Conf.,

Реджо-Калабрия, Италия, стр. 167 — 176.

Паниццо, А., Пископия, Р., Де Джироламо, П., 2004. Экспериментальная оптимизация перфорированных конструкций

в присутствии судна —

сгенерированных волн.Int. Журнал Off -shore and Polar Engineering

(в печати).

Piscopia, R., 2003. Метод оптимальной подгонки модели с десятью параметрами

к наблюдаемым волновым спектрам. Proc. 13-я конференция ISOPE

vol. III. , pp. 233 — 241.

Пископиа Р., Паниццо А., Де Джироламо П., 2000. Об оценке спектра направленных волн

(на итальянском языке). Proc. XXVII Hydr. Англ.

Conf., Генуя, Италия, т. IV, стр. 95 — 107.

Piscopia, R., Inghilesi, R., Panizzo, P., Corsini, S., Franco, L., 2002.

Анализ 12-летних измерений волн итальянской сетью.

Появиться в Proc. 28-й Int. Побережье. Англ. Конф., Кардифф, Уэльс.

Пископиа, Р., Плоников, В., Де Джироламо, П., Магнальди, С., 2003.

Подтверждение трехволнового квазикинетического приближения для спектральной эволюции

на мелководье. Ocean Engineering Vol 30,

579–599.

Пристли, М.Б., 1981.Спектральный анализ временных рядов. Academic

Press, Лондон. 880 стр.

R. Piscopia et al. / Coastal Engineering 51 (2004) 941–965964

09_PIO459157 549..564

% PDF-1.6 % 100 0 объект > эндобдж 148 0 объект > поток 2012-09-14T18: 30: 23 + 05: 30C & M2012-09-15T10: 42: 43 + 05: 302012-09-15T10: 42: 43 + 05: 30 Приложение Acrobat Distiller 8.0.0 (Windows) / pdf

09_PIO459157 549 ..564

uuid: 051a6a1b-9323-4af7-a642-5265d259ad5cuuid: 326da323-b19e-430c-a35a-e0de97e08a32 конечный поток эндобдж 144 0 объект > / Кодировка >>>>> эндобдж 94 0 объект > эндобдж 92 0 объект > эндобдж 93 0 объект > эндобдж 95 0 объект > эндобдж 96 0 объект > эндобдж 35 0 объект > эндобдж 40 0 объект > эндобдж 42 0 объект > поток h ޔ WˎF + x + z ޏ

Истощение N-концевой ацетилтрансферазы человека hNaa30 нарушает целостность Гольджи и локализацию ARFRP1

Biosci Rep.30 апреля 2017 г .; 37 (2): BSR20170066.

, ^{1, 2} , ¹ , ² и ^{1, 3}

Кристиан К. Стархейм

¹ Кафедра молекулярной биологии, Университет Бергена 5020 Берген, Норвегия

² Отдел молекулярной медицины и исследований рака, Центр исследований молекулярного воспаления, Норвежский технологический университет и естественные науки, N-7006 Тронхейм, Норвегия

Thomas V.Kalvik

¹ Департамент молекулярной биологии, Университет Бергена, N-5020 Берген, Норвегия

Гейр Бьёркёй

² Департамент молекулярной медицины и исследований рака, Центр исследований молекулярного воспаления, Норвежский технологический университет и естественный университет Sciences, N-7006 Тронхейм, Норвегия

Thomas Arnesen

¹ Отделение молекулярной биологии, Университет Бергена, N-5020 Берген, Норвегия

³ Отделение хирургии, Больница Университета Хокеланд, N-5021 Берген, Норвегия

¹ Департамент молекулярной биологии, Бергенский университет, N-5020 Берген, Норвегия

² Департамент молекулярной медицины и исследований рака, Центр исследований молекулярного воспаления, Норвежский технологический университет и естественные науки, N- 7006 Тронхейм, Норвегия

³ Хирургическое отделение, Университетская больница Хаукеланд, N-5021 Берген, Норвегия 90 003 Автор, ответственный за переписку.

Поступило 23.01.2017 г .; Пересмотрено 16 марта 2017 г .; Принято, 2017 г. 28 марта.

Эта статья цитируется в других статьях в PMC.

Abstract

Организация аппарата Гольджи (ГА) жестко регламентирована. Рассеивание стека Гольджи наблюдается в клеточных процессах, таких как апоптоз и митоз, а также связано с нарушением клеточного метаболизма липидов и нейродегенеративными заболеваниями. Наши исследования показывают, что истощение человеческой N-α-ацетилтрансферазы 30 (hNaa30) индуцирует фрагментацию стека Гольджи в клеточных линиях HeLa и CAL-62.Связанный с GA GTPase ADP белок, родственный фактору рибозилирования 1 (ARFRP1), как было ранее показано, требует N-концевого ацетилирования для мембранной ассоциации, и, исходя из его N-концевой последовательности, он, вероятно, является субстратом hNaa30. ARFRP1 участвует в трафике от эндосомы к транс -сети Гольджи (TGN). Мы наблюдали, что ARFRP1 сдвигается от преимущественно цис--локализации Гольджи и TGN к локализации везикулярных структур Гольджи и не-Гольджи в клетках, истощенных по hNaa30.Однако мы не наблюдали потери мембранной ассоциации ARFRP1. Мы пришли к выводу, что истощение hNaa30 индуцирует рассеяние по Гольджи и индуцирует аберрантную локализацию ARFRP1 по Гольджи.

Ключевые слова: ARFRP1, аппарат Гольджи, N-концевое ацетилирование, NAT, Naa30, NatC

Введение

Структура и функциональность аппарата Гольджи (GA) поддерживается по крайней мере четырьмя системами: транспортными белками, связанными с микротрубочками. ассоциированный с актином цитоскелет, белки матрикса Гольджи и белки, участвующие в нацеливании и слиянии везикул, таких как GTPases и SNARE белки [1].Нарушение любой из этих систем может привести к изменениям в организации ГА, таким как, например, коллапс или разборка и фрагментация ГА [2–5]. Фрагментация GA обнаруживается в физиологических процессах, таких как митоз, апоптоз и перенос органелл [1,6,7], а также нарушение клеточного липидного обмена, боковой амиотрофический склероз, болезнь Альцгеймера и болезнь Крейтцфельда – Якоба [1,8–10] .

Малые GTPases семейства фактора рибозилирования ADP (Arf) являются регуляторами мембранного движения [11].Arfs связываются со своими мембранами-мишенями через N-концевой мембранный якорь и N-концевую амфипатическую спираль. Обычно Arfs содержат глицин во втором положении и, таким образом, подвергаются N-миристоилированию [12,13]. Интересно, что часть Arfs не миристоилирована, а скорее ацетилирована по N-концу (Nt-ацетилирована) [14].

Arf-related protein 1 (ARFRP1) представляет собой Arf, который связывает GA- и trans -мембраны сети Гольджи (TGN) в своем GTP-связанном состоянии [15,16]. Дрожжевой гомолог ARFRP1, Arl3, требует N-α-концевого ацетилирования белка (Nt-ацетилирование) для правильного нацеливания на GA [17,18].ARFRP1, как полагают, участвует в транспорте TGN-to-плазматической мембраны и транспорте от эндосомы к-TGN и необходим для рекрутирования человеческого ADP-рибозилирования, подобного фактору 1 (hArl1), в компартменты Гольджи [2,16,19]. hArl1 привлекает различные организующие органеллы факторы, такие как arfaptins и golgins, на мембраны GA и TGN [20,21]. Истощение ARFRP1 в клетках HeLa вызывает смещение белка TGN Syntaxin6, но не приводит к нарушению в цис-маркерах -Гольджи, члене 2 подсемейства Гольгина 2 (130-кДа цис--матричный белок Гольджи (GM130), GOLGA2) и Гигантин [2].Физиологическое и клеточное значение ARFRP1 подчеркивается наблюдением, что Arfrp1 ^{— / —} мышей умирают на эмбриональной стадии [22].

Комплекс NatC является одной из нескольких Nt-ацетилтрансфераз (NAT), которые осуществляют Nt-ацетилирование у эукариот. Nt-ацетилирование или N-α-концевое ацетилирование белка — это добавление ацетильной группы к Nα-аминогруппе белков. Это одна из самых распространенных модификаций белка у эукариот, которая выполняет широкий спектр биологических функций [23,24].

Комплекс NatC человека (hNatC) представляет собой эволюционно консервативный комплекс, состоящий из каталитической субъединицы hNaa30 (hMak3) и вспомогательных субъединиц hNaa35 (hMak10) и hNaa38 (hMak31). NatC Nt-ацетилирует Met-Leu-, Met-Ile-, Met-Phe-, Met-Trp-, Met-Val-, Met-Met-, Met-His- и Met-Lys- N-концы [25–31 ]. Нокдаун каждой из субъединиц hNatC в клетках HeLa приводил к р53-зависимому апоптозу [27]. Несколько исследований связали NatC с движением органелл. Некоторым Arf GTPases требуется NatC-опосредованное Nt-ацетилирование для правильной локализации органелл, включая дрожжевой гомолог ARFRP1 Arf3p и лизосомный GTPase человеческий фактор рибозилирования ADP-подобный белок 8b (hArl8b) [27,32,33].Кроме того, мы недавно показали, что истощение Naa30 серьезно нарушает организацию митохондрий [31].

В настоящем исследовании мы показываем, что истощение каталитической субъединицы hNatC hNaa30 приводит к разборке GA и TGN. Мы также показали, что ARFRP1 смещается от локализации GA и TGN в контрольных клетках к более мелким пузырьковидным мембранным компартментам в клетках, истощенных по hNaa30. На основании этих данных мы заключаем, что hNaa30 необходим для целостности GA и TGN и нормального распределения ARFRP1.

Результаты

Нокдаун hNaa30 приводит к разбросу GA и TGN в клеточных линиях HeLa и CAL-62.

hNaa30 истощился из-за siRNA-опосредованного нокдауна экспрессии гена h NAA30 . Чтобы гарантировать, что фенотипы нокдауна специфичны для истощения hNaa30, а не являются результатом si-h NAA30 -независимых эффектов, для всех были использованы две h NAA30 -специфические siRNA, которые нацелены на разные области транскриптов h NAA30 . эксперименты.Для подтверждения эффективности нокдауна конструкций миРНК в отношении уровней белка hNaa30 обычно выполняли вестерн-блот-анализ (). Нокдаун siRNA не приведет к полному истощению уровней протеина, и все результаты необходимо оценивать как последствия уменьшения протеина, а не полной потери протеина.

Подтверждение истощения hNaa30 в клетках, обработанных sih NAA30

Иммуноблоты клеточных лизатов из клеток HeLa, обработанных не нацеливающей миРНК (si CTR ) или sih NAA30 .Клетки собирали через 72 часа после трансфекции миРНК. Блоты зондировали анти-hNaa30 для оценки уровней эндогенного hNaa30. β-тубулин использовали в качестве контроля нагрузки. Звездочка указывает на неспецифическую полосу.

Чтобы исследовать потенциальный эффект истощения hNaa30 на GA и TGN, мы сравнили локализацию цис--белков Гольджи GM130 и Giantin и TGN-белка Syntaxin6 в sih NAA30 и si CONTROL , обработанных (si ). CTR ) клетки HeLa с использованием иммунофлуоресцентной микроскопии.В si CTR -клетки, GM130, Giantin и Syntaxin6 приняли перинуклеарную стеклоподобную локализацию, напоминая классическую ленту Гольджи (A, C, E). Незначительная фракция клеток обнаруживает диспергированную, но все же компартментальную локализацию GM130, Giantin и Syntaxin6. В клетках, истощенных по hNaa30, значительно большая фракция клеток демонстрировала диспергированную локализацию GM130, Giantin и Syntaxin6, чем наблюдалось в контроле (A – F). Дисперсия не наблюдалась как дискретный фенотип, скорее клетки демонстрировали различную степень фрагментации.Порог подсчета был установлен для клеток, имеющих одну непрерывную ленту Гольджи или нет.

sih Обработанные NAA30 клетки HeLa отображают рассеянные цис--Гольджи и TGN

Клетки HeLa были истощены по hNaa30, иммуноокрашены для цис--маркеров Гольджи GM130 () Маркер TGN Syntaxin6 ( E ) и анализировали с помощью иммунофлуоресцентной микроскопии. Процент клеток с рассеянным появлением GM130 ( B ), Giantin ( D ) или синтаксина-6 ( E ) был рассчитан для каждого образца.Для GM130 и Giantin изображения обрабатывались с помощью 3D-развертки, а стопки подвергались Z-проекции для визуализации внешнего вида GM130 и Giantin. Изображения для Syntaxin6 представляют собой конфокальные микрофотографии. Hoechst 33342 использовался для визуализации ядер. Белые полосы ( A , C и E ) обозначают 10 мкм. По крайней мере 100 клеток были подсчитаны по крайней мере в трех независимых экспериментах для всех маркеров. Разница в% клеток с рассеянным фенотипом между si CTR и si NAA30 siRNA была статистически значимой на основании теста Стьюдента t , с P <0.05. Планки ошибок указывают на S.D.

Поскольку GA диспергируется во время митоза и апоптоза, видимые митотические или апоптотические клетки не подсчитывались. Чтобы выяснить, является ли наблюдаемая фрагментация цис -Гольджи специфичной для клеток HeLa или она может представлять более общую роль hNaa30, мы истощили hNaa30 в клетках анапластической карциномы щитовидной железы CAL-62 и исследовали локализацию GM130. Также в клетках CAL-62 мы наблюдали увеличение фрагментации GM130 после истощения hNaa30 (дополнительный рисунок S1).Клетки CAL-62 содержат нефункциональную форму р53 [34]. В клетках с функциональным p53 истощение hNaa30 приводит к p53-зависимому апоптозу [27]. Следовательно, наблюдение дисперсии GM130 после истощения hNaa30 в клетках CAL-62 подтверждает, что наблюдаемая дисперсия цис--Гольджи не является результатом апоптотических событий. Мы пришли к выводу, что истощение hNaa30 приводит к фрагментации GA и TGN, независимо от митотической или апоптотической дисперсии GA.

Целостность GA зависит от транспорта ER-Golgi, целостности микротрубочек и связанных с микротрубочками моторных белков, белков, облегчающих везикулярный транспорт, и актинового цитоскелета.На морфологию ER, β-тубулин или архитектуру актина не влияет истощение hNaa30 [31]. Ранее было показано, что нарушение транспорта ER-to-Golgi дает ER-подобную локализацию маркеров Golgi [35]. Рассеянное появление GM130 и Giantin после истощения hNaa30 не напоминало ER-подобную локализацию и определение стоимости истощенных hNaa30 клеток с ER-маркером Calnexin и cis -Giantin маркером Giantin, показало, что не было перемещения Giantin в ER ( Дополнительный рисунок S2).Следовательно, маловероятно, что hNaa30 индуцирует дисперсию цис--Гольджи посредством нарушения трафика ER-to-Golgi.

Истощение hNaa30 приводит к сдвигу локализации ARFRP1 в не-GA компартменты и потере локализации TGN.

Для дальнейшего уточнения роли каталитической субъединицы hNaa30 hNatC для функций GA и TGN мы исследовали эндогенную локализацию ARFRP1 после истощения hNaa30. Мы подтвердили, что ARFRP1 по крайней мере частично колокализуется с цис--маркерами Гольджи GM130 (A) и Giantin (B) и маркером TGN Syntaxin6 (C), как было показано ранее [16,18].В клетках, истощенных по hNaa30, наблюдалось снижение совместной локализации ARFRP1-GM130 по сравнению с контролем (A). Степень колокализации в клетках, истощенных по hNaa30, варьировала от частичной колокализации до полной потери колокализации. ARFRP1 все еще колокализуется с Giantin в si hNAA30 -истощенных клетках, но, кроме того, ARFRP1 локализован в компартментах, которые не содержат Giantin (B). ARFRP1 потерял совместную локализацию с TGN-маркером Syntaxin6 в клетках, зависимых от hNaa30 (C). Кроме того, ARFRP1 локализован в более мелких, подобных пузырькам компартментам в клетках si CTR .В клетках, обработанных sih NAA30 , этот паттерн локализации был более выраженным (A – C). Мы не наблюдали потери мембранной ассоциации ARFRP1 в клетках, истощенных по hNaa30, с помощью иммунофлуоресцентной микроскопии.

Истощение hNaa30 приводит к сдвигу ARFRP1 из цис- -Golgi / TGN-положительных компартментов в компартменты, не относящиеся к Гольджи

Конфокальные микрофотографии клеток Hela, обработанных нецелевой siRNA (si CTR ) или sih и коиммуномечен для обнаружения ARFRP1 и GM130 ( A ), гигантина ( B ) или синтаксина-6 ( C ).Окрашивание DAPI использовали для визуализации ядер. Белые полоски обозначают 10 мкм. ( D ) Иммуноблоттинг клеточных лизатов из клеток, обработанных миРНК, после осаждения органелл. L — общие лизаты; P — гранулы, обогащенные органеллами; S — супернатант после осаждения органелл. β-актин использовали в качестве контроля загрузки для общих клеточных лизатов. GM130 и связанный с лизосомами мембранный гликопротеин 1 (LAMP-1) используются в качестве контролей для осаждения органелл. Эффективность нокдауна показана на панели справа, а уровни белка hNaa30 с корректировкой по нагрузке приведены в иммуноблоттинге hNaa30.Блоты hNaa30 берутся с той же мембраны, что и остальная часть осадка, и выравниваются вместе с контролем загрузки для облегчения визуализации.

Чтобы дополнительно прояснить роль Naa30 в прикреплении ARFRP1 к мембране, истощенные по hNaa30 клетки лизировали и органеллы осаждали центрифугированием. ARFRP1, совмещенный с осадком, обогащенным органеллами, как в контрольных, так и в обработанных sih клетках NAA30 (D). Nt-ацетилирование может действовать как сигнал деградации убиквитин-зависимым образом [36].Однако мы не наблюдали какого-либо устойчивого снижения уровня белка ARFRP1 в клетках, истощенных по hNaa30 (D).

ARFRP1-Y2P-GFP, но не истощение ARFRP1 вызывает рассеяние GA

Затем мы предположили, что потеря ARFRP1 из GA может быть ответственной за фенотип фрагментированного GA в клетках с истощением hNaa30. Мы использовали пул из четырех различных олигонуклеотидов siRNA для истощения ARFRP1 (A). Морфологию GA затем визуализировали путем окрашивания GM130 (B) и количественно определяли клетки с разбросанной морфологией GA.Нокдаун ARFRP1 не влиял на морфологию GA (C). Таким образом, эффект GA-дисперсии истощения hNaa30 не связан с потерей ARFRP1 как таковой.

Сверхэкспрессия ARFRP1-Y2P-GFP, но не истощение ARFRP1 индуцирует фрагментацию GA

Клетки HeLa обрабатывали si CTR или si ARFRP1 . ( A ) Истощение белка подтверждали иммуноблоттингом. ( B ) Конфокальные микрофотографии клеток HeLa, обработанных, как в (A), и иммуноокрашенных на белок Гольджи GM130 (зеленый).Hoescht 33342 использовался для визуализации ядра. ( C ) Клетки, демонстрирующие разбросанные по Гольджи, были количественно определены по крайней мере из трех независимых выборок, по крайней мере, 100 клеток, подсчитанных в каждой выборке, и тест Стьюдента t был использован для оценки различий между условиями ( P <0,05). ( D ) Конфокальные микрофотографии клеток HeLa, трансфицированных плазмидами, кодирующими ARFRP1-GFP и ARFRP1-Y2P-GFP, и иммуноокрашенных на GM130 (красный). Отображаются репрезентативные изображения из двух независимых экспериментов, выполненных в трех экземплярах .

Чтобы исследовать, влияет ли Nt-ацетилирование на локализацию и функцию ARFRP1, мы создали мутант ARFRP1-Y2P-GFP. N-концы, содержащие пролин во втором положении, не являются Nt-ацетилированными [37,38]. ARFRP1-GFP обнаруживал несколько менее пунктированную локализацию, чем то, что наблюдалось для эндогенного белка. Это может быть артефакт из-за сверхэкспрессии или мечения белка. Однако локализация ГА была ясна. ARFRP1-Y2P-GFP обнаруживает преимущественно цитоплазматическую локализацию в клетках HeLa (D), предполагая, что ацетилированный N-конец важен для локализации.Следует отметить, что клетки, сверхэкспрессирующие ARFRP1-Y2P-GFP, демонстрировали рассеянную локализацию GM130 (D).

ARFRP1-Q79L-FLAG не теряет локализацию GA в клетках, истощенных по hNaa30.

ARFRP1 связывается с мембранами-мишенями в своем GTP-связанном состоянии [16]. Чтобы исследовать, влияет ли Nt-ацетилирование на локализацию ARFRP1 в зависимости от GTP- или GDP-связанного состояния, мы трансфицировали sih NAA30 -обработанные клетки с помощью ARFRP1-FLAG или конститутивно связанного с GTP мутантного ARFRP1-Q79L-FLAG и совместно помеченные клетки с помощью антитела, направленные против эпитопа FLAG и GM130.ARFRP1-FLAG совместно локализовался с GM130 в клетках si CTR , и эта совместная локализация была частично потеряна в клетках, истощенных по hNaa30 (A, C). ARFRP1-Q79L-FLAG совместно локализовался с GM130 в большей степени, чем клетки дикого типа (B, C), и поддерживал эту совместную локализацию в клетках, обработанных sih NAA30 . Небольшое снижение совместной локализации ARFRP1-QL-FLAG было замечено для одного из нацеливающих олигонуклеотидов h NAA30 , но это было незначительным по сравнению с изменениями, наблюдаемыми у дикого типа. Таким образом, в своей активной форме ARFRP1 не зависит от hNaa30 для локализации GA.

Конститутивно связанный с GTP ARFRP1-Q79L-FLAG колокализуется с GM130 в клетках, истощенных по hNaa30

Конфокальные микрофотографии клеток HeLa, трансфицированных si CTR или si hNAA30 или FLAGRP13 или FLAGRP13 или FLAGRP13 ARFRP1-Q79L-FLAG ( B ). Клетки совместно иммуноокрашивали антителами, нацеленными на FLAG-эпитоп и GM130. Окрашивание Hoecst 33342 использовали для визуализации ядер. Белые полоски обозначают 10 мкм. ( C ) Коэффициент колокализации Мандера для корреляции FLAG / GM130 (GM130-положительные пиксели, которые также являются положительными для FLAG) был рассчитан как минимум для 75 отдельных ячеек для каждого условия: 1 — полная корреляция, а 0 — отсутствие корреляции.Тест Стьюдента t использовался для оценки различий между условиями ( P <0,05). Одиночная звездочка указывает на статистически значимые различия по сравнению с si CTR . Двойная звездочка указывает на значительные различия между ARFRP1-WT и QL.

Обсуждение

hNaa30 является каталитической субъединицей комплекса NatC человека. Несколько исследований указали на возможную роль NatC в перемещении органелл. В настоящем исследовании мы показываем, что истощение hNaa30 приводит к рассеянию цис--Гольджи и TGN в HeLa и цис--Гольджи в клетках CAL-62.Разборка ГА наблюдается как нормальная часть апоптоза и митоза [1]. Поскольку истощение hNatC не ведет к накоплению митотических клеток [27], маловероятно, что наблюдаемая фрагментация GA является следствием накопления митотических клеток после истощения hNaa30. Поскольку GA принимает фрагментированный вид во время апоптоза, клетки с фрагментированными ядрами не подсчитывались. Кроме того, апоптоз, опосредованный истощением hNaa30, зависит от р53 и поэтому не ожидается в клетках CAL-62. Из этого мы заключаем, что наблюдаемое увеличение фрагментации GA и TGN не зависит от специфической для митоза или апоптоза фрагментации GA.

Также недавно было обнаружено, что другой человеческий NAT, Naa60, важен для целостности GA [39,40]. Хотя Naa30 и Naa60 демонстрируют частично перекрывающиеся субстратные специфичности in vitro и в дрожжевой модели [39,41], Naa60 Nt-ацетилирует отдельную группу трансмембранных субстратов in vivo [40]. Таким образом, фенотипы Naa30-KD и Naa60-KD GA, вероятно, опосредуются через разные субстраты и разные пути.

В недавней работе мы показали, что хотя истощение hNaa30 оказывает глубокое влияние на архитектуру митохондрий, оно не влияет на архитектуру ER, эндосомы, пероксиосомы, β-тубулина или актина [31].Следовательно, истощение hNaa30 не вызывает общих изменений в клеточной или органелларной архитектуре, и, таким образом, эффекты специфичны для GA и митохондриальных компартментов. Остается определить, связаны ли эти фенотипы функционально. Нарушение антероградного транспорта ER-GA приведет к слиянию GA с ER [35]. Поскольку мы не наблюдали слияния цис--маркера Гольджи Giantin с ER-маркером Calnexin в клетках, истощенных по hNaa30, маловероятно, что истощение hNaa30 рассеивает GA через нарушение трафика ER-to-Golgi.Дисперсия syntaxin6 может быть связана с нарушениями ретроградного трафика от эндосом к TGN. Как упоминалось выше, истощение hNaa30 не оказывает никакого влияния на морфологию эндосом, но необходимы дальнейшие исследования для более детального определения роли hNaa30 в ретроградном движении.

ARFRP1 — это GTPase, участвующая в транспортировке эндосом в TGN. Мутанты ARFRP1 обнаруживают нарушение TGN. Ранее предполагалось, что ARFRP1 является Naa30-субстратом, где ацетилирование необходимо для нацеливания ARFRP1 на мембрану посредством рекрутирования на hSys1 [17,18,33].Мы показываем, что локализация ARFRP1 действительно изменяется после истощения hNaa30, от преобладающей локализации GA и TGN до локализации в меньших компартментах, не относящихся к Гольджи, и потери локализации TGN. Истощение hNaa30 может нарушать ретроградный трафик от эндосом к TGN и приводить к эндосомному накоплению ARFRP1. Это требует дальнейшего изучения в будущих исследованиях.

Мы действительно пытались иммунопреципитировать ARFRP1 в клетках, истощенных по hNaa30, для анализа Nt-ацетилирования с помощью масс-спектрометрии, но, к сожалению, нам не удалось получить удовлетворительное раскрытие для анализа.Чтобы обойти это, мы воспользовались наблюдением, что пролин во втором положении блокирует Nt-ацетилирование. Неацетилируемый мутант ARFRP1-Y2P-GFP не локализовал компартменты GA. Это предполагает, что hNaa30 является NAT, ответственным за Nt-ацетилирование ARFRP1. Наши предыдущие наблюдения, что hNaa30 может функционально заменять дрожжевой Naa30, предполагают, что это эволюционно законсервированная функция [41].

Согласно нашим наблюдениям, истощение hNaa30 влияет на локализацию ARFRP1 внутри эндомембранозной системы, а не на прикрепление к мембране как таковое .Были высказаны две гипотезы о роли Nt-ацетилирования для мембран-ассоциированных GTPases: Nt-ацетилирование как липидный якорь и Nt-ацетилирование опосредует межбелковые взаимодействия с факторами рекрутинга мембран [14,17,18]. Наши наблюдения согласуются с последней гипотезой. Это также может указывать на то, почему группа Arfs является Nt-ацетилированной вместо N-миристоилированной: вместо связывания с мембраной они локализуются на своих мембранах-мишенях посредством белок-белковых взаимодействий.Но поскольку NatC не является общим детерминантом клеточной локализации субстрата, он, вероятно, будет специфическим для каждого субстрата [42].

Behnia et al. [18] ранее показали, что GDP-заблокированный мутант ARFRP1-T31N ARFRP1 все еще рекрутируется на мембраны-мишени с помощью hSys1 в клетках COS. Shin et al. [16] показали, что заблокированный GTP мутант ARFRP1-Q79L-FLAG преимущественно локализован в компартментах GA, в то время как блокированный по GDP мутантный белок ARFRP1-T31N-FLAG преимущественно локализован в цитоплазме клеток HeLa.Мы обнаружили, что на локализацию ARFRP1-Q79L-FLAG GA не влияет истощение hNaa30.

Мы также хотели выяснить, является ли индуцированная siNAA30 дисперсия GA из-за потери ARFRP1 из мембран-мишеней. Неожиданно, истощение ARFRP1 не вызывало дисперсии GA, тогда как клетки, сверхэкспрессирующие неацетилируемый мутант Y2P, демонстрировали рассеянный GA.

На основании этого мы предлагаем модель, в которой GDP-связанный, но не связанный с GTP ARFRP1 требует Nt-ацетилирования для нацеливания на мембраны GA.Потеря Nt-ацетилирования может приводить к накоплению ARFRP1 в не-GA компартментах, как это наблюдается в клетках, истощенных по hNaa30. В этой модели дисперсия GA, наблюдаемая после сверхэкспрессии ARFRP1-Y2P-GFP, но не истощения ARFRP1, может быть обусловлена ​​доминантно-негативным эффектом мутанта Y2P. Однако следует соблюдать осторожность при сравнении систем сверхэкспрессии непосредственно с экспериментами по siRNA.

В настоящем исследовании мы показали, что hNaa30 действительно влияет как на целостность GA, так и на TGN, а также на субклеточное распределение ассоциированной с Гольджи GTPase ARFRP1.Это имеет потенциально большие последствия для движения клеточных мембран, секреции, биогенеза липидов и созревания белков. Вместе с нашими недавними открытиями, что hNaa30 важен для целостности митохондрий, настоящая работа показывает важность hNaa30 и NatC во внутриклеточной организации.

Материалы и методы

Плазмиды и антитела

плазмиды pcDNAHisMax / ARFRP1-FLAG и pcDNAHisMax / ARFRP1-Q79L-FLAG были любезно предоставлены профессором К. Накаяма, Высшая школа фармацевтических наук, Университет Киото, Киото, 606 -8501, Япония [16].Для вестерн-блоттинга и / или иммунофлуоресценции использовали следующие антитела: анти-β-актин (AbCam ab6276), анти-калнексин (AbCam ab10286), анти-FLAG (Sigma – Aldrich F7425), анти-гигантин (AbCam ab37266), анти-Giantin (AbCam ab37266), -GM130 (BD Biosciences 610822), анти-LAMP1 (Santa Cruz Biotechnology sc-18821), анти-Syntaxin6 (Novus H00010228). Анти-hNaa30 (BioGenes) получали путем иммунизации кроликов очищенным полноразмерным белком hNaa30, продуцированным в Escherichia coli , с последующим выделением IgG из полученных сывороток [27].Связанные с пероксидазой хрена антимышиные и антикроличьи антитела от Amersham Biosciensce или Licor Bioscience Odyssey IR Dyes использовали в качестве вторичных антител для определения иммуноблоттинга.

Культура клеток и трансфекция

Клетки HeLa (эпителиальная аденокарцинома шейки матки; A.T.C.C. № CRL-1573) и клетки CAL-62 (анапластическая карцинома, 8305C DSMZ номер ACC 448) культивировали и трансфицировали, как описано ранее [27]. Клетки собирали через 72 часа после трансфекции миРНК. siRNA-опосредованный нокдаун выполняли с использованием реагента для трансфекции Dharmafect 1 (Dharmacon) в соответствии с инструкцией по эксплуатации.Ген-специфичные миРНК были приобретены у Dharmacon и использованы в конечной концентрации 50–100 нМ для подавления h NAA30 . Для гарантии того, что фенотипы специфичны для истощения h NAA30 , использовали две различные миРНК, нацеленные на h NAA30 : sih NAA30-1 Dharmacon cat. номер D-009961-01 и sih NAA30-2 кат. номер D-009961-05. Для нокдауна ARFRP1 использовали пул из четырех различных миРНК (каталожный номер Dharmacon L-019250-00-0010).Нецелевой siRNApool cat. номер D-001810-10 использовали в качестве отрицательного контроля. Эффективность нокдауна проверяли в обычном порядке с помощью вестерн-блоттинга для всех экспериментов. Трансфекцию плазмиды проводили с использованием реагента для трансфекции Roche X-tremeGENE9. В экспериментах, в которых клетки подвергали трансфекции как миРНК, так и плазмидой, для предотвращения гибели клеток добавляли 20 мкМ карбобензокси-VAD (O-метил) -фторметилкетон (z-VAD-fmk) пан-каспазный ингибитор (R&D Systems Europe Ltd.).

Лизис клеток и осаждение органелл

Клетки собирали соскабливанием и осаждали при 2000 × г в течение 5 мин.Полные клеточные лизаты получали путем ресуспендирования осадка клеток в общем буфере для лизиса (50 мМ Трис / HCl, pH 8, 50 мМ NaCl, 0,5% Nonidet P40, 5 мМ ЭДТА, 1 мМ Na ₃ VO ₄ и 1 мМ Pefabloc. (Roche)) и инкубировали 5 мин на льду. Клеточные мембраны удаляли центрифугированием при 15700 × g в течение 1 мин и клеточный лизат переносили в новую пробирку. Седиментацию органелл проводили с использованием модификации ранее описанных методов [43]. Клетки собирали и ресуспендировали в гипотоническом KSHM-буфере (100 мМ ацетат калия, 85 мМ сахароза, 20 мМ Hepes-KOH, pH 7.4, 1 мМ ацетат магния, коктейли ингибиторов фосфатазы 2 и 3 (Sigma – Aldrich) и полный ингибитор протеазы (Roche)). Ресуспендированные клетки мгновенно замораживали в жидкости N ₂ и центрифугировали при 1500 × g в течение 5 мин. Супернатант собирали, осадок ресуспендировали в буфере KSHM, повторяли мгновенное замораживание и центрифугирование. Супернатанты объединяли после мгновенного замораживания и центрифугировали при 25000 × g в течение 30 мин. Супернатант (S) анализировали иммуноблоттингом (D), в то время как осадок объединяли с осадком органелл.Осадок ресуспендировали в KSHM-буфере после мгновенного замораживания и центрифугировали при 25000 × g в течение 30 мин. Полученный осадок был обогащен органеллами. Гранулы ресуспендировали в общем лизатном буфере, как описано выше, для удаления мембран и оставшихся ядер.

Иммунофлуоресценция

Клетки HeLa или CAL-62, выращенные на покровных стеклах, промывали PBS, фиксировали в параформальдегиде или метаноле, пермеабилизировали 0,1% -ным тритоном X-100 и блокировали 10% -ным BSA. Представляющие интерес белки были помечены первичными антителами, как показано на фигурах.Вторичные антитела представляли собой IgG, конъюгированные с Alexa Fluor 488–, Alexa Fluor 594– или Alexa Fluor 555 (Invitrogen). Для окрашивания ядер использовали окрашивание Blue Hoechst 33342 или DAPI. Изображения были получены с использованием микроскопа Leica DMI 6000b или конфокального микроскопа Zeiss 510 Meta, как указано. Там, где указано, микроскопические записи обрабатывались деконволюцией (программное обеспечение Leica 4000). Проекции Z-стека и Z-стека обрабатывались с помощью программного обеспечения Fiji Image Processing. Данные для количественной оценки локализации GM130, Giantin и Syntaxin6 после нокдауна h NAA30 показаны как среднее значение по меньшей мере 100 клеток, подсчитанных в трех независимых образцах.

Статистика

Данные для количественной оценки фенотипов на микрофотографиях были проанализированы с использованием пакета статистического программного обеспечения SPSS. Тест Стьюдента t использовали для сравнения среднего процента определенных фенотипов между h NAA30 -нацеливающая si РНК s и не нацеливающей контрольной siРНК. Уровень значимости был установлен на уровне 5% (95% доверительный интервал) для всех анализов. Для анализа колокализации коэффициент колокализации Мандера был рассчитан как минимум для 75 отдельных клеток на одно условие с использованием программного обеспечения Fiji Image Processing Software [44].

Благодарности

Мы благодарим Йохана Р. Лиллехауга за его ценные обсуждения.

Аббревиатуры

1 человеческая N-α-ацетилтрансфераза 30

Arf	Фактор рибозилирования АДФ
Arl3	Рибозилирование АДФ, подобное фактору 3
ARFRP373		Связанный с ним белок	Рибозилированный белок 907 7	каталожный номер
CAL-62	линия клеток анаплазматической карциномы щитовидной железы
COS	трансформированные фибробластоподобные клетки почки зеленой обезьяны
ER	эндо устройство
GM130	130-кДа цис -матричный белок Гольджи
GOLGA2	член подсемейства Голгина 2
hArl1
hArl1	9037	9037 9037	hArl1	hArl1	hArl1
hNatC	Человеческий комплекс NatC
hSys	человеческий супрессор шестого Ypt 1
KD	KEP42	KEP42	KEP42	нокдаун	KEP42		KEP42	KEP42		KEP42	KCl -магниевый ацетатный буфер
NAT	Nt-ацетил трансфераза
NatC	N-альфа-ацетилтрансферазный комплекс C
Nt-ацетилирование	N-α-концевое ацетилирование белка
p53		клеточный опухолевый антиген 907 Q39	клеточный опухолевый антиген 907 p53	положение 79, мутант с заменой глутамин-лейцин
QL	Мутант с заменой глутамин-лейцин
siCTR	siControl
SNARE
907 907 907 907 907 907 907 рецептор 907 907 растворимый белок NSF407 Сеть Гольджи
VAD	валил-аланил-аспартил-
Y2P	мутант с заменой тирозин-пролин в положении 2

Конкурирующие интересы

Авторы заявляют, что нет конкурирующих интересов. рукопись.

Финансирование

Эта работа была поддержана Норвежским онкологическим обществом; Исследовательский фонд Бергена; Исследовательский совет Норвегии [номера грантов 197136, 230865 (Т.А.)]; и частично поддерживается Исследовательским советом Норвегии через его схему финансирования центров передового опыта [проект № 223255].

Вклад автора

K.S., T.K., G.B. и Т.А. запланировал эксперименты. К.С. и Т.К. провели эксперимент, К.С. написал черновик рукописи, и все авторы прокомментировали рукопись.

Ссылки

1. Gonatas N.K., Stieber A. и Gonatas J.O. (2006) Фрагментация аппарата Гольджи при нейродегенеративных заболеваниях и гибели клеток. J. Neurol. Sci. 246, 21–30 [PubMed] [Google Scholar] 2. Зан К., Хоммель А., Лу Л., Хонг В., Вальтер Д.Дж., Флориан С. и др. (2006) Нокаут Arfrp1 ведет к нарушению нацеливания ARF-like1 (ARL1) на транс-Гольджи в эмбрионах мышей и клетках HeLa. Мол. Membr. Биол. 23, 475–485 [PubMed] [Google Scholar] 3. Дашер К. и Балч У.(1994) Доминантные ингибирующие мутанты ARF1 блокируют эндоплазматический ретикулум для транспорта Гольджи и запускают разборку аппарата Гольджи. J. Biol. Chem. 269, 1437–1448 [PubMed] [Google Scholar] 4. Цао Х., Томпсон Х.М., Крюгер Э.В. и МакНивен М.А. (2000) Нарушение структуры и функции Гольджи в клетках млекопитающих, экспрессирующих мутантный динамин. J. Cell Sci. 113, 1993–2002 [PubMed] [Google Scholar] 5. Valderrama F., Babià T., Ayala I., Kok J.W., Renau-Piqueras J. и Egea G. (1998) Микрофиламенты актина необходимы для цитологического позиционирования и морфологии комплекса Гольджи.Евро. J. Cell Biol. 73, 281–285 [PubMed] [Google Scholar] 6. Colanzi A., Suetterlin C. и Malhotra V. (2003) Фрагментация Гольджи, специфичная для клеточного цикла: как и почему? Curr. Opin. Cell Biol. 15, 462–467 [PubMed] [Google Scholar] 7. Крефт М.Е., Ди Джандоменико Д., Безнуссенко Г.В., Ресник Н., Миронов А.А. и Jezernik K. (2010) Фрагментация аппарата Гольджи как механизм, ответственный за равномерную доставку уроплакинов к апикальной плазматической мембране уроэпителиальных клеток. Биол. Клетка 102, 593–607 [PubMed] [Google Scholar] 8.Уолкли С.Ю. и Suzuki K. (2004) Последствия потери функции NPC1 и NPC2 в нейронах млекопитающих. Биохим. Биофиз. Acta 1685, 48–62 [PubMed] [Google Scholar] 9. Стибер А., Мурелатос З., Гонатас Н.К. (1996) При болезни Альцгеймера аппарат Гольджи популяции нейронов без нейрофибриллярных клубков фрагментирован и атрофирован. Являюсь. J. Pathol. 148, 415–426 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 10. Сакураи А., Окамото К., Фудзита Ю., Наказато Ю., Вакабаяси К., Такахаши Х. и др.(2000) Фрагментация аппарата Гольджи баллонных нейронов у пациентов с кортикобазальной дегенерацией и болезнью Крейтцфельда-Якоба. Acta Neuropathol. 100, 270–274 [PubMed] [Google Scholar] 12. Гиллингем А.К. и Munro S. (2007) Малые G-белки семейства Arf и их регуляторы. Анну. Rev. Cell Dev. Биол. 23, 579–611 [PubMed] [Google Scholar] 13. Дональдсон Дж. и Джексон С. (2011) Белки семейства G ARF и их регуляторы: роль в мембранном транспорте, развитии и болезнях.Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 12, 362–375 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 14. Джексон К. (2004) N-концевое ацетилирование направляет GTPases на мембраны. Nat. Cell Biol. 6, 379–380 [PubMed] [Google Scholar] 15. Schürmann A., Massmann S. и Joost H. (1995) ARP представляет собой ассоциированную с плазматической мембраной Ras-родственную GTPase с отдаленным сходством с семейством факторов ADP-рибозилирования. J. Biol. Chem. 270, 30657–30663 [PubMed] [Google Scholar] 16. Шин Х.В., Кобаяси Х., Китамура М., Вагури С., Суганума Т., Uchiyama Y. et al. (2005) Роль ARFRP1 (белок 1, связанный с фактором рибозилирования АДФ) в переносе через мембрану Гольджи. J. Cell. Sci. 118, 4039–4048 [PubMed] [Google Scholar] 17. Setty S.R.G., Strochlic T.I., Tong A.H.Y., Boone C. и Burd C.G. (2004) Гольджи нацеливание на ARF-подобную GTPase Arl3p требует ее Nalpha-ацетилирования и интегрального мембранного белка Sys1p. Nat. Cell Biol. 6, 414–419 [PubMed] [Google Scholar] 18. Бехния Р., Паник Б., Уайт Дж. Р.С. и Munro S. (2004). Нацеливание Arf-подобной GTPase Arl3p на Golgi требует N-концевого ацетилирования и мембранного белка Sys1p.Nat. Cell Biol. 6, 405–413 [PubMed] [Google Scholar] 19. Нисимото-Морита К., Шин Х.В., Мицухаши Х., Китамура М., Чжан К., Йоханнес Л. и др. (2009) Дифференциальные эффекты истощения ARL1 и ARFRP1 на мембранный перенос между сетью транс-Гольджи и эндосомами. J. Biol. Chem. 284, 10583–10592 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 20. Лу Л. и Хонг В. (2003). Взаимодействие Arl1-GTP с доменами GRIP привлекает аутоантигены Golgin-97 и Golgin-245 / p230 в Golgi. Мол. Биол.Клетка 14, 3767–3781 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 21. Ман З., Кондо Ю., Кога Х., Умино Х., Накаяма К. и Шин Х.-В. (2011) Арфаптины локализуются в транс-Гольджи за счет взаимодействия с Arl1, но не с Arfs. J. Biol. Chem. 286, 11569–11578 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 22. Мюллер А., Мозер М., Клюге Р., Ледер С., Блюм М., Буттнер Р. и др. (2002) Эмбриональная летальность, вызванная апоптозом во время гаструляции у мышей, лишенных гена белка 1, связанного с фактором ADP-рибозилирования.Мол. Клетка. Биол. 22, 1488–1494 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 23. Стархейм К.К., Геваерт К. и Арнесен Т. (2012) Белковые N-концевые ацетилтрансферазы: когда начало имеет значение. Trends Biochem. Sci. 37, 152–161 [PubMed] [Google Scholar] 24. Акснес Х., Дразич А., Мари М. и Арнесен Т. (2016) Перво-наперво: жизненно важные белковые метки N-концевыми ацетилтрансферазами. Trends Biochem Sci. 41, 746–760 [PubMed] [Google Scholar] 25. Полевода Б., Норбек Дж., Такакура Х., Бломберг А. и Шерман Ф.(1999) Идентификация и специфичность N-концевых ацетилтрансфераз из Saccharomyces cerevisiae . EMBO J. 18, 6155–6168 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 26. Полевода Б. и Шерман Ф. (2001) NatC Nalpha-терминальная ацетилтрансфераза дрожжей содержит три субъединицы: Mak3p, Mak10p и Mak31p. J. Biol. Chem. 276, 20154–20159 [PubMed] [Google Scholar] 27. Стархейм К.К., Громыко Д., Эвьент Р., Рюнинген А., Вархауг Дж. Э., Лиллехауг Дж. Р. и др. (2009) Нокдаун человеческого N альфа-терминального ацетилтрансферазного комплекса C приводит к p53-зависимому апоптозу и аберрантной локализации Arl8b человека.Мол. Клетка. Биол. 29, 3569–3581 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 28. Tercero J.C. и Wickner R.B. (1992) MAK3 кодирует N-ацетилтрансферазу, модификация L-A gag Nh3-конца которой необходима для сборки вирусных частиц. J. Biol. Chem. 267, 20277–20281 [PubMed] [Google Scholar] 29. Tercero J.C., Dinman J.D. и Wickner R.B. (1993) N-ацетилтрансфераза дрожжей MAK3 распознает N-концевые четыре аминокислоты основного белка оболочки (gag) L-A двухцепочечной РНК вируса. J. Bacteriol.175, 3192–3194 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 30. Кимура Ю., Такаока М., Танака С., Сасса Х., Танака К., Полевода Б. и др. (2000) N (альфа) -ацетилирование и протеолитическая активность 20 S протеасомы дрожжей. J. Biol. Chem. 275, 4635–4639 [PubMed] [Google Scholar] 31. Ван Дамм П., Калвик Т. В., Стархейм К. К., Йонкхере В., Миклебуст Л. М., Меншарт Г. и др. (2016) Роль N-концевой ацетилтрансферазы Naa30 человека в поддержании целостности митохондрий. Мол. Клетка. Протеомика 15, 3361–3372 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 32.Сетти С.Р.Г., Шин М.Э., Ёшино А., Маркс М.С. и Бурд К. (2003) Рекрутирование белков домена GRIP с помощью Arf-подобной GTPase 1 регулируется Arf-подобной GTPase 3. Curr. Биол. 13, 401–404 [PubMed] [Google Scholar] 33. Hofmann I. and Munro S. (2006) Ацетилированная на N-конце Arf-подобная GTPase локализуется в лизосомах и влияет на их подвижность. J Cell Sci. 119, 1494–1503 [PubMed] [Google Scholar] 34. Gromyko D., Arnesen T., Ryningen A., Varhaug J.E. и Lillehaug J.R. (2010) Истощение Nα-концевой ацетилтрансферазы A человека индуцирует p53-зависимый апоптоз и p53-независимое ингибирование роста.Int. J. Рак 127, 2777–2789 [PubMed] [Google Scholar] 35. Lippincott-Schwartz J., Yuan L.C., Bonifacino J.S. и Klausner R.D. (1989) Быстрое перераспределение белков Гольджи в ЭПР в клетках, обработанных брефельдином А: свидетельство мембранного цикла от Гольджи к ЭР. Клетка 56, 801–813 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 36. Hwang C.S., Shemorry A. и Varshavsky A. (2010) N-концевое ацетилирование клеточных белков создает специфические сигналы деградации. Наука 327, 973–977 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 37.Goetze S., Qeli E., Mosimann C., Staes A., Gerrits B., Roschitzki B. et al. (2009) Идентификация и функциональная характеристика ацетилированных на N-конце белков у Drosophila melanogaster . PLoS Biol. 7, e1000236. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 38. Арнесен Т., Ван Дамм П., Полевода Б., Хелсенс К., Эвьент Р., Коларт Н. и др. (2009) Протеомический анализ показывает эволюционную консервацию и дивергенцию N-концевых ацетилтрансфераз дрожжей и людей. Proc.Natl. Акад. Sci. СОЕДИНЕННЫЕ ШТАТЫ АМЕРИКИ. 106, 8157–8162 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 39. Ван Дамм П., Хоул К., Пимента-Маркес А., Хелсенс К., Вандекеркхове Дж., Мартиньо Р.Г. и другие. (2011) NatF вносит вклад в эволюционный сдвиг в N-конце ацетилирования белка и важен для нормальной сегрегации хромосом. PLoS Genet. 7, e1002169. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 40. Акснес Х., Ван Дамм П., Горис М., Стархейм К.К., Мари М., Стёв С.И. и др. (2015) Органелларная nα-ацетилтрансфераза, naa60, ацетилирует цитозольные N-концы трансмембранных белков и поддерживает целостность Гольджи.Cell Rep. 10, 1362–1374 [PubMed] [Google Scholar] 41. Осберг К., Акснес Х., Нинзима С., Мари М., Арнесен Т., Хелсенс К. и др. (2016) Модель комплементации Saccharomyces cerevisiae , основанная на микроскопии, выявляет функциональную консервацию и избыточность N-концевых ацетилтрансфераз. Природа 6, 3578–3589 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 42. Aksnes H., Osberg C. и Arnesen T. (2013) N-концевое ацетилирование с помощью NatC не является общим детерминантом субклеточной локализации субстрата в Saccharomyces cerevisiae .PLoS ONE 8, e61012. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 43. Лундмарк Р. и Карлссон С. (2003) Sorting nexin 9 участвует в клатрин-опосредованном эндоцитозе посредством взаимодействий с основными компонентами. J. Biol. Chem. 278, 46772–46781 [PubMed] [Google Scholar] 44. Manders E.M.M., Verbeek F.J. и Aten J.A. (1993) Измерение совместной локализации объектов на двухцветных конфокальных изображениях. J. Microsc. 169, 375–382 [Google Scholar]

Игрушки и хобби Автотранспорт ICM 35517 ЗиЛ-131 КШМ Советская армейская машина Модель в масштабе 1/35 212 мм

Игрушки и хобби Автомобильный грузовик ICM 35517 ЗиЛ-131 КШМ Советская армия Автомобиль в масштабе 1/35 212 мм

В комплект входят: — 230 пластиковых деталей — декаль (наклейка) — 8 резиновых покрышек — 1 рама из прозрачного пластика — схема окраски модели — подробная инструкция на русском и английском языках Материал Пластик Тема Советский грузовик Масштаб 1/35 Состояние Новое Информация о модели: ЗиЛ-131, Грузовик Советской Армии Длина модели, мм : 212 ЗИЛ-131 — армейский грузовик Московского автозавода им. Лихачева, основная модель, Был заменой грузовику ЗИЛ-157, Значительная часть этих машин производилась для Советской Армии, Онлайн Эксклюзив, Товары высокого качества, Мы предлагаем бесплатную доставку для всех наших клиентов., модельный набор 212 мм ICM 35517 ЗиЛ-131 КШМ Советская Армия в масштабе 1/35, ICM 35517 ЗиЛ-131 КШМ Советская Армия Модель в масштабе 1/35 212 мм, ICM 35517 ЗиЛ-131 КШМ Советская Армия в масштабе 1/35 модельный комплект 212 мм.

неоткрытый, неокрашенный, схема окраски ， UPC: ： 4823044403653 ， 。. ICM 35517 ЗиЛ-131 КШМ, Грузовик Советской Армии Длина модели, неиспользованная, 1 рама, Модель Советской Армии в масштабе 1/35 212 мм 4823044403653. Материал Пластик Тема Советский грузовик Масштаб 1/35 Состояние Новое Информация о модели: ЗиЛ-131 .в разобранном виде ， Рекомендуемый возрастной диапазон: ： 17+ ： В комплект входят: ： 230 пластиковых деталей. основная модель. Была замена на грузовик ЗИЛ-157. Значительная часть этих машин производилась для Советской Армии. В комплект входит: — 230 пластиковых деталей — декаль (наклейка) — 8 резиновых покрышек — 1 рамка сделана из прозрачного пластика — схема окраски модели — подробная инструкция на русском и английском языках. Состояние: Новое: Абсолютно новое. неповрежденный предмет (в том числе изделия ручной работы). См. Список продавца для получения полной информации.Просмотреть все определения условий ： Модифицированный элемент: ： Нет ， Год: ： 1946-1991 ： Страна / регион производства: ： Украина ， Характеристики: ： Комплект ： Индивидуальный комплект: ： Нет ， Состав: ： Один грузовик ： Масштаб: ： 1:35 ， MPN: ： ICM 35517 ： Материал: ： Пластик ， Семья персонажей: ： Советский грузовик ： Пол: ： Мальчики и девочки ， Возрастной уровень: ： 12+ ： Размер модели: ： 212 мм / 8,34 дюйма ， Бренд: ： ICM ： Описание комплекта :: ： Пластиковый модельный комплект. декаль, мм: 212 ЗИЛ-131 — армейский грузовик Московского автозавода имени Лихачева.

перейти к содержанию

ICM 35517 ЗиЛ-131 КШМ Советская Армия Модель в масштабе 1/35 212 мм

FGO Fate Grand Order Arcade Card Servant Gilgamesh Archer 2, 4 Pack 3 Blatt Propeller für Hubsan X4 H502S H502E RC Flugzeug Zubehör rot, Звездные войны КОРОЛЕВСКИЙ Гвардеец КИР КАНОС 30-я годовщина ДЕЙСТВИЯ РИСУНОК 3.75 дюймов, 1/24 Ралли Наклейка Ford Fiesta Wrc Bertelli Mexico 2017 Для Алтая, ICM 35517 ЗиЛ-131 КШМ Советская армейская машина Набор для масштабной модели 1/35 212 мм , My Little Pony The Movie Sparkle and Shine W / Activity 3D модель Наклейки B 40, 1999 Action Monte Carlo ДЖЕФФ ГОРДОН МАСШТАБ МАСШТАБА 1:64 МАШИНА DU PONT NASCAR 1/15 000. ОГРАНИЧЕННЫЕ СОКРОВИЩА ФИНЛЯНДИЯ ЕВРО МОНЕТА, НАЧИНАЮЩАЯСЯ МЕДВЕДЬ НОВИНКА, встряхивает ICM 35517 ЗиЛ-131 КШМ Советская Армия Модель комплект в масштабе 1/35 212 мм .Автомобиль-трансформер Mattel Barbie Glam,

ICM 35517 ЗиЛ-131 КШМ Советская Армия Модель в масштабе 1/35 212 мм

ICM 35517 ЗиЛ-131 КШМ Советская Армия Модель в масштабе 1/35 212 мм

Модель машины в масштабе 1/35 212 мм ICM 35517 ЗиЛ-131 КШМ Советская Армия, КШМ Советская армия Машина в масштабе 1/35 212 мм ICM 35517 ЗиЛ-131, ICM 35517 ЗиЛ-131 Автомобиль КШМ Советской армии в масштабе 1/35 модельный комплект 212 мм.

No related posts.