Птс 25 что это: Страница не найдена — Автоклуб

что это значит, что это такое, хорошо или плохо, какие автомобили имеют

Что такое 25 ПТС у автомобиля?

ПТС – один из самых основных документов. В нем содержится все информация об автомобиле. Каждый владелец должен иметь данный документ.

В случае если машину купили в кредит, то оригинал ПТС будет оставаться в банковской организации, пока займ не будет погашен.

У каждого гражданина Российской Федерации есть паспорт, так же у каждой машины есть ПТС. 25 ПТС – это документ с водяными знаками. В нем указана серия, номер – все тоже самое, как и в обычном паспорте.

Что содержится в 25 ПТС?

• Вин номер;
• Номер двигателя;
• Данные о шасси;
• Марка;
• Модель;
• Тип авто;
• Цвет кузова;
• Данные о владельце.

В техпаспорте есть «особые отметки». В ней указаны данные собственников, номер свидетельства о регистрации, информация о перерегистрации и продаже. Возить 25 ПТС с собой не обязательно.

При покупке транспортного средства с пробегом нужно чтобы продавец предъявил оригинал, а не копию. Сейчас мошенников большое количество. В случае если предоставляется все-таки дубликат нужно проверить авто по вин-коду и регистрационным номера.

При потере 25 ПТС собственник должен получить новое свидетельство. В этот документ должны быть внесены номер и серия ПТС, поэтому нужно проверить совпадают ли он с дубликатом 25.

Код 25 ПТС в паспорте автомобиля обозначает Приморский край. Такая запись присваивается автомобилю, который приехал в Россию через таможенный пункт этого региона.

На каких машинах встречается

Отметку 25 в ПТС чаще всего можно видеть в документации, сопровождающей ввозимое транспортное средство из Японии или Кореи. Эти импортируемые машины, чаще всего, с правосторонним управлением. Случается увидеть эту отметку и на транспортных средствах, привезённых из Европы или Америки, но не так часто. И это говорит только о том, что американская или европейская техника была ввезена в страну через дальневосточную таможню морским путём или по железной дороге из Китая.

Преимущественно такие автомобили встречаются на востоке Российской Федерации. Суммируя всё указанное выше, можно сделать вывод о том, что же обозначает код 25 ПТС. Он предоставляет фактические сведения об автомобиле, подкреплённые таможенной печатью Приморского края, и свидетельствует о заграничном месте изготовления машины.

Скорее всего, эта машина недавно прибыла в страну непосредственно с завода изготовителя или же является практически новой со сроком службы, не превышающим 12 месяцев. Поводом для недоверия может послужить предоставление владельцем дубликата вместо оригинала технического паспорта. В этом случае история автомобиля должна подвергнуться очень тщательной проверке.

Источник:

У каких машин имеется данный номер?

Обычно обозначение 25 ПТС есть у японских и корейских машин. Данные авто зачастую праворульные. Некоторые европейские и американские машины так же могут быть с записью 25 ПТС, однако встречается эта запись гораздо реже.

В случае если на авто, которые прибыли из Америки и Европы стоит отметка 25 ПТС, то это значит, что ее привезли на Дальний Восток по морю или на поезде.

Машины, на которых стоит отметка 25 ПТС встречается в основном в восточных регионах России.

Птс у машины: что это значит, что это такое, хорошо или плохо, какие автомобили имеют

В техпаспорте автолюбители могут найти кодировку «ПТС 25». Многие не догадываются о ее значении, так как сведений по этому вопросу мало. От работников ГИБДД получить ответ не выйдет, поэтому стоит самостоятельно его искать. Такая надпись означает номер субъекта страны. В этом случае имеется в виду то, что транспорт доставлен в Россию через таможенный пункт Приморского региона.

Как разобраться в надписях на ПТС?

От встречи с мошенниками при покупке автомашины никто не застрахован. Если автомобиль понравился, то стоит внимательно изучить ПТС на законность. Для этого следует знать степени защиты бланка.

При покупке автомобиля можно узнать всю его историю из бланка ПТС.

Проверка ПТС на веб-ресурсе ГИБДД в специальной базе не всегда дает исчерпывающую информацию. Часто преступники подделывают документацию под существующие ПТС.

Покупателю необходимо проверить наличие всех степеней защиты на бланке техпаспорта. Для проведения проверочных мероприятий следует подготовить лупу и хорошие осветительные приборы.

На техпаспорте должна иметься тонкая полоса либо круг с определенным рисунком в виде голограммы. Она не должна быть приклеенной к бланку. Такая защита усложняет подделку.

Бланк ПТС не должен быть «потрепанным». Такой прием часто используется преступниками для того, чтобы удалить старую информацию в паспорте и внести недостоверные сведения. ПТС должен быть в нормальном состоянии, так как хозяин обязан беречь документацию на автомобиль.

На паспорте должны иметься водяные знаки с надписью «RUS». Определить их можно, направив паспорт на свет, либо с использованием ультрафиолетовой лампы. На оборотной стороне ПТС расположен рельефный водяной знак. Он определяется на ощупь в верней части бланка. Если ПТС наклонить, то знак должен менять цветовой окрас.

Если планируется приобретение иномарки, собранной на территории страны, либо российского авто, то в блоке с информацией об организации, выдавшей техпаспорт, обозначается завод-изготовитель.

Источник: https://avtojur.com/kuplya-prodazha/kuplya/nadpis-25-v-pts

Плюсы и минусы

По отметке 25 ПТС можно узнать, как машина оказалась в России. Многие водители считают, что данный номер это дополнительный знак качества. Это значит, что машина, например, была доставлена из Японии. Население этой страны гораздо качественнее собирают автомобиль, чем в Америке.

Но в документах других регионах иная отметка может свидетельствовать о том, что качество ТС не совсем удовлетворительно. Будет преимуществом, если наличие 25 ПТС содержит печать таможни или еще одного собственника. Однако должен насторожить дубликат 25 ПТС. Причины, по которой был выдан дубликат, могут быть разными. Покупка авто в данном случае – «кот в мешке».

Положительные стороны

Наличие в паспорте транспортного средства отметки 25 также может дать некоторые преимущества. В первую очередь, по данному коду можно точно узнать, каким образом автомобиль прибыл в Россию. Японские машины отличаются качеством сборки, их автомобильные заводы известны. Автовладелец может быть почти уверен в том, что его транспорт был доставлен из-за границы.

Также этот момент помогает выявить несоответствие кодов региона. Если в техпаспорте стоит другой регион, не Дальневосточный, при отметке 25, то это говорит о том, что с автомобилем проводились какие-то махинации.

Если в истории авто, приобретаемом с рук, возникают сомнения, лучше совсем отказаться от его покупки.

Какие могут возникнуть сложности?

Многие водители удивляются, когда видят 25 ПТС. На самом деле данное обозначение — Приморский регион.

Об этом не многие знают, так как информации об этом в официальных источниках почти нет. По сути 25 – это обозначение кода.

Все машины, которые ввозились в Россию через таможню Приморского края, содержат отметку 25 ПТС.

Если 25 ПТС стоит в дубликате нужно проверить историю транспортного средства. При покупке необходимо проверить все документы. По дубликату ПТС могут продать авто в угоне.

Сотрудники Госавтоинспекции конфискуют машину и оставят покупателя без имущества и средств. Один из лучших способов в такой ситуации – продать машину на запчасти. Если гражданин обнаружил, что ему продали краденное авто не нужно пытаться перепродать авто, так как это прямой путь в тюрьму.

Поддельный документ весьма нередкое явление. На осмотр документов нужно взять с собой лупу и небольшой фонарь. Если продавец сильно спешит, то это нужно учесть при проверке техпаспорта. В случае если был передан дубликат необходимо узнать причину, по которой он был получен.

Как визуально рассмотреть 25 ПТС?

1. Бумага должны быть по ощущениям похожей с изделиями от Госзнака.
2. По голограмме нужно провести большим пальцем. Необходимо почувствовать, что документ без границ.
3. На последней странице 25 ПТС должна быть розочка – это защитный узор и если смотреть на него под углов в 30 градусов он изменит зеленый цвет на серый. Узор должен быть объемным.
4. Год издания бланка должен быть не моложе даты выдачи техпаспорта.
5. Провести пальцем по названию документа. Надпись должна быть с объемным тиснением.
6. На водяных знаках должна быть надпись «RUS».
7. Наклонить 25 ПТС под углом и посветить фонариком в поле сверху от голограммы. Там должна отобразиться надпись «ПТС»

Почему появляется дубликат?

Собственно, дубликат ПТС не является криминальным явлением. Если в оригинале заканчивается место под записи, то вместо него выдают дубликат. А вот тут могут возникнуть вопросы. Большое количество владельцев — это не очень хорошо. Пройдя через большое количество рук, автомобиль качественнее и надежнее не становится. Также большое количество владельцев, сменившихся за короткое время, может говорить о проблемах с чистотой этой машины. Следует задумываться об этом при наличии дубликата у годовалого автомобиля. Иногда дубликат может выдаваться при потере. Такие ситуации не редки.

Также дубликат ПТС может появиться у кредитной машины. При оформлении автокредита банк изымает оригинал паспорта технического средства, и хранит его у себя. Некоторые люди, все же нашли способ продавать машины даже при наличии такого ограничения. Они просто пишут заявление в ГИБДД об утрате оригинала. Получив дубликат на руки, они спокойно продают автомобиль, ну а с банком разбирается уже новый владелец.

Поэтому, при наличии в ПТС отметок о дубликате, следует тщательно проверить историю этого автомобиля, а также владельца. Это позволит избежать неприятных неожиданностей. При малейших сомнениях следует отказаться от покупки такой машины.

Статья по теме «ПТС дубликат, что это значит, и как быть».

Риски при купле продаже

Каждый покупатель рискует встретиться с мошенниками. Необходимо узнать особенности защиты 25 ПТС. При покупке нужно проверить авто по базе ГИБДД. Машина может быть замаскирована под реально существующую. Для того чтобы проверить подделку нужно внимательно рассмотреть внешние признаки.

Необходимо обратить внимание на внешность ПТС. Оригинал выглядит в нормальном состоянии и читаемой информацией. Многие мошенники специально стирают старую информацию. Сотрудники Госавтоинспекции не используют принтеры с лазером.

Так же в ПТС должны быть водяные знаки. Чтобы их увидеть нужно, вынести его на просвет. Сам знак содержит знак RUS. На обороте в верхнем углу есть еще один защитный знак. Он изменяет цвет при повороте. Чтобы увидеть его нужно нажать на него пальцем и прочувствовать выпуклость.

Для того чтобы избежать покупки машины в угоне следует рассмотреть заполнение 25 ПТС. В качестве места выдачи должен быть указан завод- изготовитель.

Как отличить оригинальный ПТС от фальшивого ?

Итак, Вы решили приобрести автомобиль. Мы не будем рассматривать тот случай, когда Вы решили приобрести новый авто в салоне. Цель данной статьи — рассказать о том, как можно избежать приобретения нелегально ввезенного или угнанного автомобиля на вторичном рынке.
Зачастую, выбирая авто на авторынках, мы, присмотрев подходящий нам по цене автомобиль, особое внимание обращаем на его техническое состояние и внешний вид (что немаловажно конечно). И очень мало внимания уделяем документам на автомобиль, зачастую ограничившись сверкой номеров кузова и двигателя. Но ни для кого не секрет, что довольно большое количество автомобилей, колесящих по просторам нашей необъятной Родины, имеют тёмное прошлое (статистика неутешительна, в России крали всегда). Общепризнано, что автомошенники сегодня — это высокообразованные люди, имеющие в своем арсенале дорогое современное оборудование, а компьютерные технологии позволяют им, с высокой степенью точности, изготовить (подделать) необходимые документы.

И вот, не успев получить наслаждение от обладания купленным авто, приехав в ГИБДД для регистрации, мы с ужасом узнаем, что документы на авто поддельные, а номера агрегатов изменены. Катастрофа…..

И тут встает вопрос — как обезопасить себя?

На просторах Интернета есть немало статей, содержащих хорошие советы. Стоит воздержаться от приобретения автомобиля если его хозяин пытается продать очень срочно и дешево, и к тому же отказывается от проверок (обычно ссылаясь на то, что все нормально). А проверить на глазок покупаемый автомобиль Вы можете всего лишь внимательно изучив главный документ любого автомобиля – паспорт транспортного средства (ПТС), проанализировав содержащуюся в нем информацию.

Зачастую, определить поддельный это документ или нет, может только специалист, обладающий познаниями в области криминалистики. Однако это доступно и Вам, если Вы уделите немного своего времени и прочитаете статью до конца.

Защита ПТС от подделки

Первое, на что следует обратить внимание – это сам бланк ПТС. Он изготавливается на предприятиях «Гознака», и как денежные купюры, имеет свои степени защиты (микротекст, водяные знаки и т.п.).

Возьмите ПТС и посмотрите бланк на просвет, вооружитесь лупой, внимательно посмотрите на поверхность бланка, и Вы их увидите. Специальная голограмма в виде полоски или кружка встречается на всех ПТС и имеет специфическое переливающееся изображение.

Это как ещё одна степень защиты. Она служит для определения оригинала от фальшивки и подделка данной части представляет собой проблему для потенциального фальсификатора.

Бланк ПТС должен быть надлежащего качества. Он не должен быть «постиран» (иногда на паспорте таким образом уничтожают первоначальную информацию и печатают новую). К сведению: сотрудники ГИБДД практически никогда не используют лазерные принтеры для заполнения бланков ПТС.

На лицевой поверхности бланка имеется голографическая полоска или круг. Присмотритесь к голограмме, имеющиеся на ней надписи и изображения должны быть четкими и легко читаемыми.

И, конечно, голограмма не должна быть приклеена «скотчем».

Посмотрев на просвет бланка Вы должны увидеть примерно такое изображение.

Этот так называемый «водяной знак» который вы можете увидеть если посмотрите документ при электрофиолетовом свете, а так же при дневном имеет специфическое трех мерное изображение, которое так же применяется в денежных знаках.

Перевернув бланк, в верхнем левом углу, Вы должны увидеть так называемую «розочку». При изменении угла наклона листа данный рисунок должен менять цвет с ярко зелёного на серый. Рисунок объемный, если Вы по нему поводите ногтем пальца вверх-вниз, то почувствуете это.

Подделка такой защиты является очень трудным технологическим процессом и врятли может иметь место быть. В болшьшинстве случаев подделывают первые две защиты.

Если все в порядке, приступаем к изучению содержания документа. Обратите внимание на серию и номер бланка. Первые две цифры это код региона, где ПТС был выдан. На данном этапе можно сразу определить был ли ПТС заменен. Для отечественных автомобилей правило таково – ПТС присваивается на заводе-изготовителе (для автомобилей «ВАЗ» код региона 63). Для иномарок – ПТС выдается таможенной службой по месту растаможки автомобиля, о чем свидетельствует печать таможни в левом нижнем углу ПТС (в сложенном виде) и название таможни в пункте №23. Также должна быть подпись и личная печать сотрудника таможни, оформлявшего ПТС — в правом нижнем углу. Недопустимо, что бы ПТС с кодом региона 77 (Москва) был выдан, например, в Саратове – воздержитесь от приобретения такого автомобиля.

Что значит 25 ПТС? — Юридическая помощь

На каких машинах встречается?

Это обозначение зачастую можно увидеть в документах, имеющих отношение к японской или корейской машине. При этом авто японского происхождения, чаще всего, имеют правый руль. Ещё 25 ПТС встречается на европейских или американских машинах, но гораздо реже. Если на глаза попалась машина из Америки или Европы с подобной пометкой, то можно сделать вывод, что их привезли на Дальний Восток по морю или железной дороге и растаможили там. Транспортные средства такого типа можно встретить, преимущественно, в восточных регионах государства Российского.

Что такое ПТС

ПТС — это основной документ, подтверждающий право собственности на автомобиль. Его еще называют т ехпаспортом.

Паспорт ТС представляет собой лист бумаги синего цвета формата А4 с водяными знаками, имеет свою серию и уникальный номер, состоящий из шести цифр.

Часто при покупке машины покупатели интересуются различными записями в паспорте авто, которые могут казаться непонятными на первый взгляд.

Например, в объявлениях о продаже в описании встречается формулировка «25 птс» — что это значит, задумываются многие. Это серия документа по региону, указывающая на то, что автомобиль был ввезен в Российскую Федерацию через таможню приморского края. Большинство машин с правым рулем японского или корейского происхождения имеют такую отметку.

Какие сведения содержит

ПТС содержит сведения о владельце автомобиля и технические характеристики транспортного средства.

Сложность для начинающего водителя может представлять графа «особые отметки» в ПТС — расшифровка может оказаться для него трудным заданием. В этой графе проставляются сведения о серьезных авариях, в которых побывало авто, повлекших за собой необходимость применения сварочных швов.

Можно встретить в этой графе и аббревиатуру УВЭОС: такая запись подтверждает факт, что в авто установлено специальное устройство, с помощью которого водитель может экстренно вызвать сотрудников оперативной службы.

Также в документе есть графа с образцом подписи владельца. Если машина приобретается с рук, то предыдущий владелец тоже должен расписаться в техпаспорте.

Ранее записи в техпаспорт вносились работниками ГИБДД от руки. Теперь используются печатные устройства.

Нормативное регулирование

Законодательно положения о ПТС закреплены в Приказе МВД России № 496, Минпромэнерго России № 192, Минэкономразвития России № 134 от 23.06.2005 года (в редакции от 10 марта 2017). Также положения о выдаче электронных паспортов регулируются Постановлением Правительства РФ от 05 октября 2017 года № 1212 «О некоторых вопросах, связанных с введением в Российской Федерации электронного паспорта транспортного средства и электронного паспорта шасси транспортного средства».

Автомобили буксуют в ГИБДД – Авто – Коммерсантъ

Автовладелец из Калужской области купил Toyota Land Cruiser, но зарегистрировать в ГИБДД машину не смог из-за проблем с паспортом транспортного средства, который ранее выдали на другую машину. Попытки оспорить отказ Госавтоинспекции и доказать в судах добросовестность покупателя ни к чему не привели. Автовладельцы, попавшие в подобную ситуацию, могут через суд расторгнуть договор купли-продажи, поясняют эксперты, но деньги вернуть будет сложно. Еще в 2001 году Конституционный суд пояснял: при покупке товаров, ввезенных из-за границы, гражданам нужно проявлять осторожность.

Из материалов Первого кассационного суда общей юрисдикции (доступны в ГАС «Правосудие») следует, что автовладелец из Калужской области С. А. Киселев приобрел внедорожник Toyota Land Cruiser и не смог зарегистрировать машину в ГИБДД. Госавтоинспекция Калужской области провела проверку, обнаружив, что на автомобиль выдан дубликат паспорта транспортного средства (ПТС) взамен паспорта, который изначально выдавался на Jeep Grand Cherokee (каким образом это произошло в материалах не сказано; “Ъ” связаться с господином Киселевым не удалось). Кроме того, обнаружилось, что внедорожник не был растаможен.

Господин Киселев в апреле 2019 года обратился в Калужский районный суд Калужской области с требованием признать незаконными действия ГИБДД, ссылаясь на то, что является добросовестным приобретателем и не должен отвечать за действия прежних собственников. Но суд нарушений не нашел. «Доводы истца о том, что в отношении автомобиля совершались регистрационные действия правового значения при разрешении данного спора не имеют,— сказано в определении суда.— Само по себе приобретение права на транспортное средство при отсутствии ПТС не является основанием для допуска к участию в движении». Автовладелец пытался защитить свои права в Калужском областном суде, первом кассационном суде общей юрисдикции, где также заняли сторону ГИБДД. Последнее решение было вынесено в январе 2020 года, о чем на днях сообщили в пресс-службе Первого кассационного суда.

Президент Московской коллегии правовой защиты автовладельцев Виктор Травин говорит, что интересы ГИБДД в подобных ситуациях защищены законодательством — машина без ПТС не может быть зарегистрирована, хотя сам случай в Калужской области назвал «загадочным».

У автовладельца, оказавшегося в такой ситуации, есть шанс вернуть деньги, говорит эксперт: договор купли-продажи можно расторгнуть через суд.

Подобная практика имеется, говорит господин Травин: суды расторгают договор, если автовладелец приводит весомые аргументы. «Если выяснится, что автомобиль нельзя поставить на учет в связи с тем, что выявились проблемы с документами, новый собственник вправе требовать у продавца «нехорошего» автомобиля расторжения договора,— подтверждает адвокат движения «Свобода выбора» Сергей Радько.— Закон обязывает передавать товар свободным от прав и притязании третьих лиц и пригодным для использования. Отсутствие возможности пользоваться автомобилем в связи с невозможностью поставить его на учет является именно таким обстоятельством». «Вернуть по решению суда деньги в таких случаях сложно,— добавляет Виктор Травин.— Судебные приставы подобными делами занимаются крайне неохотно. Многие граждане об этом знают и даже не пытаются обращаться в суд. Оставляют машины незарегистрированными и ездят где-нибудь на даче, где нет гаишников».

Эксперт по регистрации автомобилей Борис Ионов напоминает, что еще в 2001 году Конституционный суд вынес определение, в котором пояснил: гражданин должен проявлять «заботливость и осмотрительность» при покупке товара, ввезенного из-за границы, в противном случае вина возлагается на самого покупателя.

«Иными словами, проверить документы на автомобиль — это обязанность гражданина при покупке транспортного средства»,— поясняет Борис Ионов.

До 1 июля 2020 года МВД и Минкомсвязи должны запустить сервис, в рамках которого граждане смогут получать выписку с данными об автомобиле из государственного реестра транспортных средств, говорит он (это заложено в постановлении правительства №1874).

Перед покупкой надо поверять автомобиль по всем возможным параметрам, отмечает Сергей Радько. «Приобретать машину надо только у реального собственника, а не у его «знакомого» или «родственника»,— советует эксперт.— Насторожить должна прежде всего цена: если она заметно ниже среднерыночной — это первый сигнал. Частая смена собственников, «переезд» автомобиля из региона в регион и, разумеется, дубликат ПТС тоже являются плохими признаками. В случае если первый ПТС (при ввозе автомобиля) выдан не таможней, то это тоже может быть нехорошим признаком».

Иван Буранов

Новости кафедры ПТС

20 мая 2021
Коллектив кафедры ПТС поздравляет Калинина Николая Васильевича с днем рождения!

29 апреля 2021
Коллектив кафедры ПТС от души поздравляет Гашо Евгения Геннадьевича с днем рождения!

Крепкого здоровья, мотивации идти вперед, желания созидать и делать мир лучше!

15 апреля 2021
Уважаемые преподаватели кафедры ПТС!
В период цифровизации программ высшего образования просим вас отслеживать изменения в разных подразделах сайта МЭИ и кафедрального подраздела!

Уважаемые студенты кафедры ПТС!
Если вы где-либо обнаруживаете расхождение информации на сайте и в реальности — просим сообщить об этом на кафедру ПТС.

24 февраля 2021
Уважаемые студенты 4 года бакалавриата и 2 года магистратуры!
При подготовке ваших выпускных работ рекомендуем вам просить у ваших научных руководителей образцы/шаблоны/положения/методические указания (ссылки на эти материалы) для выпускных квалификационных работ (ВКР). Имея перед глазами образец — можно легче выполнить ВКР. И вместо «оформительского труда» больше времени уделить содержанию работы. 

Шаблон выпускной презентации. ​
Общие положения на сайте МЭИ.​

3 декабря 2019
Уважаемые студенты! В раздел «Состав кафедры ПТС» будут добавлены примерные тематики выпускных работ, по которым преподаватели работают со студентами. Эти материалы помогут вам определиться с руководителем будущей выпускной работы.

1 декабря 2019 

​

24 октября 2019

20 октября 2019 г. магистрант кафедры ПТС Эрик Мынка выступал на всероссийском турнире ПРОдвижение 2019. Эрик занял 1 место по жиму лежа, пожав 215 кг. Поздравляем!

6 августа 2019
НИУ «МЭИ» на международной энергетической школе в СКОЛКОВО.
Центр Энергетики Московской школы управления СКОЛКОВО провел программу для молодых специалистов «Новая энергетика в мире и в России». Были приглашены ведущие российские и мировые эксперты, отобраны активные и компетентные студенты, и молодые специалисты.

Участник школы, магистрант кафедры промышленных теплоэнергетических систем Карандашев Артем:
«Для меня школа открыла новые знания. В течение недели мы изучали основные отрасли энергетики России и мира, рассмотрели рынки, новые технологии и тренды нефтегазового сектора, электро- и теплоэнергетики. Много времени было посвящено так называемому энергетическому переходу — росту доли возобновляемых источников энергии в мировом балансе.
Было интересно практиковать английский язык как во время выступления зарубежных экспертов, так и при личном общении с ними. Для себя я завел контакты, к примеру, с сотрудниками института энергетики Российской академии наук. 
Считаю, что участие в школе должно стать моей ежегодной практикой, чтобы быть в курсе новых трендов сферы энергетики.»

«Новая энергетика в мире и в России» – подробный обзор трансформации мировой и российской энергетики.
Были рассмотрены:

— новые технологии в энергетике и их влияние на энергетические рынки
— изменения во всех секторах ТЭК: нефтяная, газовая, нефтегазоперерабатывающая, угольная промышленность, электро- и теплоэнергетика, ВИЭ, гидроэнергетика, водородная энергетика и потребители энергии, атомная энергетика
— сравнение глобальных и российских процессов
— экскурсии на энергетические объекты

Школа производилась третий раз на базе кампуса СКОЛКОВО.

20 июня 2019
Евгений Гашо. Трава полынь. Черная быль: 33 года и 333 небылицы.​

30 мая 2019​
16-17 мая 2019 года в столице Казахстана проходил XII Астанинский экономический форум, темой которого стал «Вдохновляющий рост: люди, города, экономики». Среди главных событий первого дня работы Форума была панельная сессия, темой для обсуждения которой стало «Создание инновационных экосистем для «зеленого» роста: наука, образование и технологии». С темой «НДТ- ступень развития зеленой экономики» на панельной сессии выступил Евгений Гашо, заведующий лабораторией энергосбережения НИУ МЭИ, доцент каф. ПТС.

В своем выступлении Евгений Гашо поделился с коллегами опытом реализации идей и принципов наилучших доступных технологий (НДТ) в Российской Федерации, который сложился на последние годы в тесном переплетении промышленной, экологической и энергетической политики, проводимой в нашей стране. Также было отмечено, что за последние 4 года проявился тренд на повышение энергоэкологической эффективности предприятий 1 категории, сложилась существенная  система поддержки модернизации промышленности на федеральном и региональном уровне.

«Зеленая экономика» — это не только безотходность, энерго- и ресурсосбережение, сбалансированные инфраструктуры городов и климатическая адаптация, новая отрасль экологической техники, это также подготовка специалистов разного профиля. Важно ввести разные компоненты НДТ в профили подготовки энергетиков, технологов, юристов, экологов» — подчеркнул в своем выступлении Евгений Гашо. В заключении необходимо подчеркнуть, что АЭФ – ежегодное центральное деловое событие Евразии, на котором происходит обмен авторитетными мнениями, опытом в области экономической политики и науки для изучения глобальных тенденций и выработки практических решений. 

23 мая 2019
В период с 16 по 22 мая на кафедре ПТС проводилась работа по текущим проектам с профессором из Бранденбургского Технического Университета (Германия), зав. каф. Строительной физики Уинфридом Шюцем.

Такие встречи проводятся уже не первый год и очень плодотворны. 

17 мая 2019
На кафедре ПТС 16 мая 2019 года состоялся технический семинар, посвященный по тепловым насосам и другим энергоэффективным технологиям тепло- холодоснабжения, ГВС и энергетики​.  

Главный докладчик Alfred Ng имеет более 45ти летний инженерный опыт в индустрии ОВиК, охватывающий Северную Америку, Европу, Австралию, Индию, Китай и Гонконг, где основал более 16 совместных предприятий в Канаде, Европе и Китае, включая Evapco, Aerco, Rosemex и Mammoth. Под его руководством осуществляется проектирование, производство и международные продажи энергоэффективного оборудования. Председатель и генеральный директор Mammoth China Group of Companies Альфред является ключевым советником канадского правительства и консультировал по проекту энергосбережения в области энергетики с  министерством строительства КНР. Он является пожизненным членом ассоциации ASHRAE и членом ассоциаций IGSHPA, ASME, Solar Society и др.

24 апреля 2019
22-23 апреля в МЭИ прошло первенство по жиму лежа, в рамках которого магистрант кафедры ПТС Эрик Мынка занял 1 место, пожав 210 кг. Поздравляем!
​

27 марта 2019
Кафедра ПТС поздравляет Карандашева Артема с победой в олимпиаде «Я-профессионал»!​

Более 523 000 заявок на участие было подано во втором сезоне олимпиады. Из них задания отборочного этапа выполнили более 73 000 участников. До заключительного этапа добрались 10886 финалистов.

Дипломантами олимпиады стали 3472 студента и выпускника. Из них 106 золотых, 139 серебрянных, 190 бронзовых медалистов, 952 победителя и 2085 призеров.

21 марта 2019
Поздравляем Романова Дмитрия Олеговича (аспирант кафедры ПТС, научный руководитель — Ю.В. Яворовский), который выиграл грант на обучение в Университете прикладных наук и искусства (HAWK) в Геттингене (Германия). Дмитрий будет проходить обучение на кафедре «Энергетика и экология, управление окружающей средой» факультета «Управление ресурсами»​
На фото: Университет прикладных наук и искусства (HAWK) Геттингене, Германия.

​20 марта 2019
16 марта в Российском университете дружбе народов проводились 31 ежегодные Московские студенческие спортивные игры, в категории до 120 победу в классическом жиме лежа одержал магистрант кафедры ПТС Мынка Эрик и так же стал абсолютным чемпионом среди всех весовых категорий
 

13 марта 2019
5-7 марта 2019 года в ФГБОУ ВО «Казанский государственный энергетический университет» проходила Всероссийская студенческая олимпиада «Передовые технологии в энергосбережении». Команда студентов от НИУ «МЭИ» под руководством Ю.В. Яворовского заняла призовые места. Поздравляем!

25 января 2019
С 12 по 16 ноября 2018 г. в Бранденбургском Tехническом университете (БТУ)  г. Котбус – Зенфтенберг (Германия) состоялась научная конференция Международной партнерской сети университетов NESEFF на тему:  «Влияние глобального изменения климата на энергопотребление зданий в различных странах».

Данное мероприятие было проведено в рамках ежегодных встреч партнеров сети. С момента образования сети NESEFF в 2015 г. представители университетов – партнеров встречаются на регулярной основе на различных площадках в Германии, Азербайджане, России, Польше и Чехии. ​

22 ноября 2018

Поздравляем Хромченкова В. Г. с юбилеем! Желаем крепкого здоровья и успехов в работе!

​​

Бюджетная самодельная ПТС «НА КОЛЕНКАХ» (Передвижная телевизионная станция). Часть 1

Предисловие 1:
Данная статья не является рекламой какого либо устройства или продукта. Но, чтобы не заставлять желающих реализовать эту идею гуглить «похожие устройства», — все фирмы и модели называем здесь открыто.

Предисловие 2:
Изначально в планах было сделать только видеоверсию. Однако позднее возникла мысль опубликовать материал и здесь в виде статьи. Тем не менее рекомендую ознакомится и с видеоверсией. Она размещена внизу статьи. Итак, поехали!

1. Введение.

Периодически у нас возникает потребность отснять в несколько камер какое либо событие (и получить «смонтированное видео» сразу), при этом не иметь высокий уровень, но и не использовать высокий бюджет и не арендовать профессиональную ПТС (Передвижную телевизионную станцию). Для таких целей мы собрали «ПТС на коленках».

Мы часто пользуемся такой ПТС и, дабы не отвечать на одни и те же вопросы о том как это работает и как это все сделать, решили написать ряд статей и снять серию небольших видео, в которых постараемся лаконично и доходчиво объяснить, как это всё организовать и запустить.
Всё, что я буду здесь рассказывать, — это личный опыт, и то, как именно мы это делаем.

В нашей «домашней» ПТС кроме двух камер из шести, мы не используем телевизионного дорогостоящего оборудования, которое, мягко говоря, не каждый может себе позволить. Наша самодельная ПТС имеет 6 камер и работает в разрешении 854 на 480 точек, с частотой кадров — 25 в секунду. В принципе, можно работать и в HD 1280 на 720, но наш компьютер не сильно любит такую нагрузку. Ясное дело, — здесь не может идти речь о профессиональном уровне и технологиях. Возможно, в дальнейшем мы сделаем подобные видео, как собрать профессиональную ПТС в шесть камер на основе Blackmagic, с профессиональной служебной связью, Studio-камерами и т.д., но здесь у нас задача совсем другая.

Наверняка существует много вариантов решений, но мы поговорим о том, которым пользуемся лично мы, минимум раз в неделю, на протяжении более пяти лет.

2. Оборудование.

В нашей самодельной ПТС используется следующее оборудование:

Для общих планов мы будем использовать веб-камеры. Качество картинки определённых веб-камер уже давно не уступает некоторым любительским наладонникам…

Перебрав разные, мы остановились на камерах фирмы Logitech. Соотношение цена-качество нас более чем удовлетворило. Где-то я слышал, что если использовать одинаковые веб-камеры, то виртуальный микшер на компьютере будет их путать, могут слетать настройки, в общем — это усложнит работу. Мы решили не экспериментировать с этим и взяли четыре камеры разных моделей.

Итак, у нас в комплекте следующие модели Logitech: С310, С510, Pro 9000 и С910 (Подробности в видео ниже). Несмотря на то, что эти камеры используются нами в съемке в 480 точек, они все вполне могут работать и в 1280×720 точек. модель С910 справляется даже Full HD ( то есть: 1920 на 1080 точек). Кстати, на данный момент появилась у фирмы Logitech модель С920. Мы проверяли, у нас она хорошо работала с С910. Но коллеги говорили, что С910 и С920 компьютер путал. Так что не рекомендуем иметь их обе, хотя по картинке они самые лучшие, на наш взгляд.

Далее, кроме 4 веб-камер, мы используем две камеры в формате DV. Одна из них — легендарная Panasonic «сотка» (Panasonic DVX 100). Вторая может быть такой же, а может быть и «наладонник» (любительская камерка, которую легко потерять в руке), любой, который может отдавать сигнал DV. Это может быть даже профессиональная HD-камера, переключенная в режим DV. В общем, можно использовать любые две DV-камеры. Но, как вы понимаете, от их матрицы и оптики будет зависеть качество картинки. Когда мы используем вместо одной из «соток» наладонник, картинка в разы хуже. Кажется, будто это из-за меньшего числа точек. Но их столько же, что еще раз доказывает, что «не в пикселях счастье».

Следующий пункт в нашем комплекте — это компьютер на базе Windows 7 (до этого преспокойно всё работало и на Windows ХР, сервиспаки 2-й и 3-й). Про Windows Vista и Windows 8 ничего не скажу, пробовать — желания нет. Процессор i7. Будет удобнее, если подключены два монитора.

Еще мы используем сделанную на коленках, нехитрую индикаторную служебную связь, о которой отдельно расскажем в следующих главах.

Так же, в нашей звуковой цепи ПТС использовался процессор Behringer, чтобы звук был пожирнее, да поровнее. Но впоследствии мы от него отказались, поскольку новый звуковой пульт, с которого мы получали звук для трансляции, уже и сам умел компрессировать и лимитировать аудиосигнал.

В общем, это всё, что потребуется из оборудования в нашем случае, для многокамерной съемки и прямой трансляции в интернет.

Конечно, для коммерческого уровня эта съемка не годится. Но для архива, или отчета, или для трансляции можно снимать не только корпоратив, или заседание, но и вполне динамичный концерт, при наличии грамотных операторов на первой и второй камерах и опытного режиссера ПТС — за компьютером.

ВИДЕОВЕРСИИ:

и

В следующей статье поделимся — как мы располагаем наши камеры в зале, и о взаимодействии телевизионной команды.
До связи!

Перейти ко второй части>>>

.

Что такое займ под залог ПТС — советы по займам по залог ПТС автомобиля в МФО

Слушать Подписаться

В автоломбарде можно получить деньги под как под залог своего авто, так и под залог ПТС. Чем особенности и преимущества этих двух вариантов — консультируют эксперты Выберу.Ру.

Займы и кредиты плотно вошли в современную жизнь как один из способов дополнительного финансирования в трудный период или при необходимости купить, например, квартиру или машину. Основной кредитор при этом — банки. Однако есть и альтернативный способ получить крупную сумму денег. Услугами автоломбардов, не так давно появившихся в России, уже пользуются многие автовладельцы. Этот тип кредитных организаций, по сути, работает также, как ломбарды ювелирных изделий или часов, однако предметом залога для них выступают машины. Подобная услуга есть и у банков, однако суть ее несколько иная: кредит оформляется целевым и полученные средства можно потратить только на приобретение другого транспортного средства.

В автоломбарде вы сможете получить деньги под залог своего авто или ПТС на любые цели, при этом подтверждать использование денег вам не потребуется. И это одно из многих отличий займов в ломбарде от банковского кредита. Следующее же заключается в том, что займ под залог – вид срочного кредита, оформление которого иногда занимает менее часа. Также отличается и количество документов: автоломбарду потребуются только ваш паспорт, ПТС и водительские права для того, чтобы оформить кредит. Не нужно подтверждать доход, ведь обеспечением кредита будет служить ваш автомобиль. Сумма, которую вы можете получить, определяется экспертной оценкой вашей машины. Как правило, она составляет не более 70−80% от рыночной стоимости вашего транспортного средства.

Ломбарды автомобилей также выдают займы под ПТС. Этот вид займа позволяет не только получить деньги, но еще и оставить машину в своем распоряжении, что обязательно понравится тем, кто предпочитает постоянно иметь свое авто на виду или зарабатывает с его помощью, а потому не сможет иначе вернуть ломбарду долг. Особенности займа под ПТС мы и рассмотрим далее.

О первом и, наверное, главном преимуществе займа под ПТС мы уже рассказали выше. Вы можете пользоваться своим авто одновременно с выплатой кредита. Однако из этого плюса получается и главный минус – сумма, которую вы можете получить, значительно уменьшается. Под займ ПТС в некоторых ломбардах можно получить не более 50−60% от рыночной стоимости ТС. Причина в том, что автомобиль, который все еще выступает предметом залога, остается в пользовании владельца, а значит подвергается риску быть угнанным или попасть в ДТП. Нахождение его на стоянке ломбарда уменьшает этот риск, а сама организация несет ответственность, если с вашим транспортным средством что-то произойдет на стоянке. Кроме того, ставки в этом случае будут несколько выше.

Если вам срочно требуются деньги, стоит попробовать обратиться в автоломбард. Главное, убедитесь в том, что сможете вовремя вернуть полученные средства, чтобы избежать еще больших трат в будущем. А найти хороший ломбард вам поможем мы. В базе данных Выберу.Ру собраны автоломбарды, предоставляющий займы под залог ПТС во всех регионах страны. Увидеть полный список вы можете, пройдя по ссылке – Займ наличными или на карту под залог ПТС автомобиля в России.

Правда и мифы о деньгах в Яндекс Дзен

Подписаться

Рекомендуемые займы под авто

Лицензия №19-030-45-009200

Сумма

от 30000 ₽ до 500000 ₽

Срок

от 1 года до 3 лет

Ставка в день

от 0,07%

Лицензия №1903475009166

Сумма

от 10000 ₽ до 1000000 ₽

Ставка в день

от 0,13%

Лицензия №1803475009039

Сумма

от 30000 ₽ до 1000000 ₽

Срок

от 3 месяцев до 3 лет

Ставка в день

от 0,08%

Владивостокская таможня начала выдавать ПТС в обход официальных представителей АО «ГЛОНАСС» – Новости Владивостока на VL.ru

С 21 июня на постах Владивостокской таможни началась выдача ПТС для автомобилей с установленными устройствами ЭРА-ГЛОНАСС, которые собственники транспортных средств приобрели в обход официальных представителей АО «ГЛОНАСС». Правда, список номеров ПТС и СБКТС таких автомобилей теперь будет вестись таможней и направляться в акционерное общество.

Владельцы автомобилей теперь могут получать ПТС, даже приобретая оборудование для вызова экстренных служб в обход официальных представителей АО «ГЛОНАСС». Владивостокская таможня в ответ на запрос VL.ru сообщила, что для получения ПТС необходимо предоставить документы и сведения, перечень которых приведен в совместном Приказе МВД, Минэкономразвития и Минпромэнерго России «Об утверждении Положения о паспортах транспортных средств и паспортах шасси транспортных средств».

Временный порядок, навязанный автовладельцам АО «ГЛОНАСС», обязывал таможню выполнять и постороннюю работу – например, проверять договоры на приобретение УВЭОС. Заветная «кнопка» должна была быть куплена только у официальных представителей акционерного общества, что имело признаки коррупционной составляющей и создавало массу неудобств всем службам и органам. Выдача ПТС растягивалась на несколько недель.

«У меня были все документы на машину и устройство ЭРА-ГЛОНАСС, но ПТС печатали около двух недель, – рассказывает автовладелица Дарья. – В таможне говорили, что для физических лиц нет бланков».

14 июня сотрудники Владивостокской таможни написали докладную записку в вышестоящие органы. Среди прочего, как сообщал источник VL.ru в таможне, таможенники опасались негативной судебной практики из-за отказов в выдаче ПТС по временному порядку, не имеющему законной силы.

Таможенные органы внимательно отнеслись к доводам, изложенным в записке, сообщает источник VL.ru в ведомстве. И в целях устранения возможных нарушений законодательства при оборудовании импортных автомобилей устройствами ЭРА-ГЛОНАСС приняли решение упростить порядок действий.

«Получил несколько ПТС на автомобили, – рассказывает Денис. – Ждали этого момента два месяца. Именно тогда купили кнопки в Москве, у компании, которая имеет право на идентификацию устройства. Но все тормозилось в таможне. Сейчас разрешение на такие устройства дали, ПТС выдали очень быстро».

С 21 июня владелец транспортного средства может приобрести терминал не только у «Сумотори-Авто» или «Волтон Менеджмент Рус», но также и у лиц, внесенных в список уполномоченных на идентификацию устройств ЭРА-ГЛОНАСС в системе, проще говоря – у установочных центров. Со стороны таможни будет организован учет СБКТС, выданных на такие автомобили.

Еженедельно, вплоть до получения вразумительных ответов, в АО «ГЛОНАСС» и на заводы, производящие устройства, будут направляться запросы относительно легальности производства и продажи сторонним организациям модулей ЭРА-ГЛОНАСС. Это должно исключить возможность продажи «серых» кнопок. Также еженедельно в АО «ГЛОНАСС» будут направляться списки выданных ПТС и СБКТС для проверки.  

По состоянию на 19 июня на складах временного хранения во Владивостоке остается 2 930 автомобилей.     

Все новости по теме ЭРА-ГЛОНАСС

PTS25 линейный датчик для выравнивания полотна

Линейный датчик PTS25

Новый линейный датчик

Re PTS ²⁵ был разработан для определения положения сплошных линий, прерывистых линий, краев печати, краев полотна и любых рисунков на движущемся полотне даже при самых высоких скоростях полотна; это стало возможным благодаря скорости регулирования 1 кГц. Высокая точность и надежность датчика для определения цветовых различий гарантирует, что полотно остается на правильном пути, гарантируя надежное производство и сокращение отходов.

PTS ²⁵ был разработан для оптимизации работы оператора за счет использования простого и удобного интерфейса, текстовых сообщений и даже вспомогательной калибровки.

Вспомогательная калибровка — важный плюс датчика; во время этой операции PTS ²⁵ точно воспроизводит все реальное изображение, а не только линию, и автоматически рекомендует линии или шаблоны, которым следует следовать, показывая процент надежности каждого из них. Более того, PTS ²⁵ может выбрать лучшую точку считывания внутри области просмотра даже в чрезвычайно неблагоприятных условиях без ручного перемещения датчика.Наконец, линейный датчик снабжен красной лазерной дорожкой, чтобы упростить его позиционирование в соответствии с опорной линией.

Мы также уделили особое внимание механической установке датчика: благодаря шарнирному кронштейну и способности размещать датчик на расстоянии до 60 мм от полотна без потери фокуса на изображении, PTS ²⁵ не имеет быть перемещенным или удаленным во время позиционирования полотна.

PTS ²⁵ оснащен 5-дюймовым цветным сенсорным дисплеем, который обеспечивает надежное воспроизведение реального изображения.Две мощные светодиодные лампы излучают настоящий белый свет, обеспечивая наилучшую производительность даже в условиях плохого освещения. Датчик имеет зону обзора 25×16 мм, а также цифровые и аналоговые входы и выходы.

ТЕХНИЧЕСКАЯ СПЕЦИФИКАЦИЯ

Растворимость куперита PtS (cr) при 25 — 450 ° C, Psat — 1000 бар и гидросульфидного комплексообразования платины в гидротермальных жидкостях

Растворимость куперита PtS _(cr) измеряли в водных сульфидных растворах при 25 ° C. / 1 бар, 75 ° C / 1 бар и 450 ° C / 1000 бар.Концентрация Pt увеличивается с повышением температуры от 10 ^–10,2 до 10 ^–7,4 м (моль⋅ (кг H ₂ O) ^–1 ) в растворах, содержащих 0,06–0,07 м3. общей восстановленной серы. Экспериментальные данные по растворимости точно описываются реакциями PtScr + h3S˚aq = PtHS2˚aqKs˚PtHS2.PtScr + 2h3S˚aq = PtHS3− + H + Ks˚PtHS3− ..

Заряженный комплекс Pt (HS) ₃ ^— доминирует в низкотемпературных почти нейтральных растворах, но не был обнаружен при 450 ° C, где единственным гидросульфидным комплексом был Pt (HS) ₂ ° _(водн.) .Влияние NaCl на растворимость PtS _(cr) незначительно, что означает, что смешанными комплексами Pt-HS-Cl можно пренебречь. Константа растворимости PtS _(cr) , K _с ° (Pt (HS) ₂ ), была определена как log K _с ° = -9,09 ± 0,17 (25 ° C / 1 бар. ), −9,50 ± 0,35 (75 ° C / 1 бар) и — 6,68 ± 0,10 (450 ° C / 1000 бар). Константа растворимости PtS _(cr) , K _s ° (Pt (HS) ₃ ^— ), была определена как log K _s ° = −14.43 ± 0,31 (25 ° C / 1 бар) и — 13,15 ± 0,23 (75 ° C / 1 бар). Константы растворимости PtS _(cr) вместе с литературными данными были подогнаны к простой модели плотности logKSoPtHS2o = −7,30−638,9 ∙ TK − 1−5,98 ∙ logdwlogKSoPtHS3− = 0,633−4522,6 ∙ TK − 1 + 43,03 ∙ logdw

, где d (w) — плотность чистой воды. K _s ° (Pt (HS) ₂ ) увеличивается с повышением температуры, но K _s ° (Pt (HS) ₃ ^— ) имеет максимум примерно при.200 ° С. Соответственно, при более высоких температурах роль последнего комплекса уменьшается, и его вклад в концентрацию растворенной Pt становится незначительным при t > 300 ° C. Термодинамические расчеты показывают, что в природных гидротермальных флюидах, которые содержат до 0,1 м общей восстановленной серы, концентрация комплексов Pt-HS может достигать нескольких частей на миллиард. Более высокая растворимость Pt-содержащих минералов может быть достигнута в хлоридсодержащих флюидах за счет образования PtCl ₄ ^2-, который играет доминирующую роль в высокотемпературном гидротермальном переносе Pt.

25 подъемников Томпсона поднимают Орегон-стрит мимо Северной Дакоты 83-66

Корваллис, штат Орегон (AP) Итан Томпсон из штата Орегон обычно не лучший бомбардир «Бобров».

Но он показал рекордные 25 очков в воскресной победе над Северной Дакотой со счетом 83-66.

Томпсон набрал 11 очков в первом тайме, включая три трехочковых, что помогло «Бобрам» (10-2) выйти вперед 36-28 в перерыве.

Он добавил 14 очков во втором тайме и сделал восемь результативных передач.

«Я думаю, у меня довольно разносторонняя игра», — сказал Томпсон, младший защитник ростом 6 футов 5 дюймов. «Я не пытаюсь набрать определенное количество очков или что-то в этом роде. Просто позволь игре прийти ко мне, постарайся как можно больше хорошенько взглянуть ».

Томпсон, второй в команде по результативности после старшего нападающего Треса Тинкля, был 7 из 13 с игры и реализовал все свои восемь штрафных бросков.

Северная Дакота (6-8) сократила отрыв до 52-47 благодаря двум штрафным броскам Марион Стюарт с оставшимися 13:08, но приблизиться не могла.

Штрафные броски Томпсона увеличили преимущество «Бобров» до 65:49 при отметке 9:09 и завершились счетом 13: 2.

«Это было не красиво, но это W в правом столбце», — сказал тренер OSU Уэйн Тинкль. «Эта команда непостоянная и жесткая».

Трес Тинкль, возглавляющий «Бобров» по ​​результативности и подборам, добавил 16 очков и семь досок. Он второй лучший бомбардир Pac-12.

Кайлор Келли, семиметровый старший игрок «Бобров», пришедший в игру вторым в общенациональном масштабе по блок-шотам, добавил 14 очков, шесть подборов и пять блок-шотов.

Стюарт возглавил «Ястребов» с 19 очками. Нападающий-первокурсник Брэди Дэниэлсон, который вошел в игру со средним показателем 3,5 очка, набрал рекордные 18 очков и поразил все четыре своих трехочковых попытки за «Ястребов».

«Был растяжка (во втором тайме), когда мы получали стопы и просто не могли отскочить», — сказал тренер Северной Дакоты Пол Сатер. «Рост Келли нас очень беспокоил».

Северная Дакота совершила 17 уходов против семи для штата Орегон, что привело к преимуществу «Бобров» по ​​количеству очков без потерь.

Это была первая встреча между школами.

БОЛЬШОЕ ИЗОБРАЖЕНИЕ

Северная Дакота: «Ястребы» одержали 75-74 победы в Небраске, их первая победа над соперником из Большой 10 с 1933 года.… Северная Дакота сыграет свою первую домашнюю игру с 17 декабря 5 января. против Purdue Fort Wayne.

Штат Орегон: «Бобры» показали свой лучший старт в 12 играх с тех пор, как команда 1984-85 открыла счет 11-1. … Тинкль увеличил свою двузначную результативную серию до 77 игр. Он стал 25-м игроком в истории Pac-12, набравшим 1900 очков.

ВВЕРХ ДАЛЕЕ

Северная Дакота открывает свое расписание Summit League в четверг в Денвере.

Штат Орегон открывает расписание конференции Pac-12 в четверг в Юте.

Для получения дополнительной информации о баскетболе колледжа AP: https://apnews.com/Collegebasketball и http://twitter.com/AP-Top25

Copyright 2019 STATS LLC и Associated Press. Любое коммерческое использование или распространение без явного письменного согласия STATS LLC и Associated Press строго запрещено.

PTS Diagnostics исполняется 25 лет: четверть века приверженности решениям для пунктов обслуживания

Оглядываясь назад, трудно поверить, что я звонил PTS Diagnostics домой в течение 10 лет — до этого я присоединился к нашей семье в 2007 году на внутреннем рынке продаж. совершил переход к глобальным продажам, а в начале этого года занимал должность коммерческого директора. Еще более унизительно осознавать, что на протяжении 25 лет PTS Diagnostics предлагает инновационные и доступные решения по оказанию медицинской помощи людям, живущим с хроническими заболеваниями.

В преддверии 2018 года нам следует задуматься о людях и организациях, которые сыграли роль в нашем росте и успехе за последнюю четверть века.

Миссия и развитие PTS Diagnostics
PTS Diagnostics была основана на предпосылке, что тестирование не только на глюкозу может быть быстрым, точным и относительно недорогим процессом. Еще в 1992 году мы стремились расширить возможности оказания медицинской помощи и провести тестирование на ярмарках здоровья, в кабинетах врачей и в домах потребителей.Мы не знали, что эта амбициозная, но относительно простая концепция изменит мир в течение следующих 25 лет.

Любой тип «подрывной» технологии встречает сопротивление на начальной стадии. Первоначально центральные лаборатории и патологоанатомы очень скептически относились к технологиям на месте оказания медицинской помощи, главным образом из-за проблем с точностью. Таким образом, они вынудили производителей устройств повысить ставку, поскольку это касается качества результатов и соответствия стандартам контроля качества.Перенесемся в 2017 год, когда результаты многих тестов в местах оказания медицинской помощи неотличимы от результатов центральных лабораторий и даже используются для стимулирования здравоохранения на основе заслуг.

Одной из наших самых больших проблем была способность придерживаться наших основных ценностей Среднего Запада при глобальном масштабировании бизнеса в соответствии с растущим спросом на решения PTS Diagnostics. Это миссия, которую Боб Хаффстодт, наш президент и генеральный директор, и вся наша команда руководителей привержены и осознают, даже если мы растем со скоростью, в четыре раза превышающей средние по отрасли.

Наше место в глобальной диагностике в пунктах оказания медицинской помощи
Мы выросли из «маленького двигателя, который может» в глобальную силу в области оказания медицинской помощи на стадии диабета и сердечно-сосудистых заболеваний. Много раз я отступаю и вынужден глубоко вздохнуть, понимая ответственность, которая связана с нашей ролью на мировом рынке здравоохранения.

Благодаря преимуществу быстрого выполнения работ и моментальной готовности к обучению, которые служат заметными преимуществами, я бы поставил перед системой здравоохранения задачу работать эффективно и действенно без решений по месту оказания медицинской помощи.Подумайте об удовлетворенности пациентов, удовлетворенности поставщиков, управлении здоровьем населения и результатах в отношении здоровья и попытайтесь сделать это без решений по месту оказания медицинской помощи; Я не думаю, что это можно сделать, и именно поэтому мы готовы помочь решить серьезные проблемы со здоровьем.

Недавние успехи
Это прекрасное время для работы в PTS Diagnostics. Наш общий рост продолжается такими темпами, что мы планируем построить новую глобальную штаб-квартиру в Индианаполисе, которая откроется в 2019 году и обеспечит нам хорошие перспективы в обозримом будущем.У нас очень амбициозные планы роста не только для наших основных продуктов, но и для ряда многообещающих инициатив в области НИОКР и развития бизнеса. Мы также продолжаем пользоваться поддержкой нашей материнской компании Sinocare, которая является отличным партнером с момента приобретения PTS Diagnostics в 2016 году. Они очень привержены нашей миссии и нашим людям.

Наше присутствие и общая бизнес-презентация значительно изменились за последние 10 лет, и мы увеличили автоматизацию и офисные площади по мере роста бизнеса.Наше процветающее место в Саннивейл было добавлено в конце 2013 года, когда мы приобрели линейку продуктов A1C Now® у Bayer. Вскоре мы анонсируем новое программное обеспечение для точек обслуживания розничной торговли и новую портативную систему сбора данных для специалистов по скринингу, которые готовы занять нишу в растущей области здравоохранения.

В нашей работе успех равняется преобразованию здравоохранения и доступу для пациентов, традиционно недостаточно обслуживаемых или находящихся в критической группе риска. Поэтому я исключительно горжусь проектами, над которыми мы работаем вместе со Всемирной организацией здравоохранения в Африке, Национальной программой профилактики диабета в Великобритании, Discovery Health в Южной Африке и федеральным правительством в Мексике.Они действительно трансформируют и влияют на здоровье целых подгрупп населения. Я очень рад, когда мы открываем новые вертикальные рынки в США и во всем мире, потому что для меня это означает доступ, что в конечном итоге означает позитивные изменения.

Бесценные клиенты и партнеры по сбыту
Основная причина того, что мы такие, какие мы есть сегодня, заключается в том, что мы всегда прислушивались к нашим клиентам и партнерам по сбыту.

Я призываю клиентов принять это обязательство и продолжать сообщать нам, что им нужно и что нужно рынку, чтобы помочь контролировать и управлять хроническими заболеваниями, которые мы помогаем выявлять и контролировать каждый день.Прежде всего, знайте, что мы ценим наших партнеров, пациентов и ответственность за то, что мы делаем, и благодарны за то, что мы являемся небольшой частью того, что делаем мир лучше.

Ценности сотрудников
PTS Diagnostics — компания, которой не раз говорили, что то, что мы пытаемся сделать, невозможно. Будь то амбициозные улучшения продукта, устрашающие сроки поставки для массовых тендеров или вывод на рынок нового высококачественного продукта в рекордные сроки. Эта компания ВСЕГДА занимается доставкой.Мы работаем по вечерам, в выходные, праздничные дни — все, что нужно для выполнения работы, и это настоящий знак чести, особенно учитывая корни многих наших сотрудников на Среднем Западе.

Когда мы приобрели предприятие в Саннивейл в 2013 году, я не знал, чего ожидать. Тем не менее, я должен сказать, что был потрясен тем, что они разделяют те же ценности и рабочую этику, что и команда Indy и глобальные команды продаж. Я действительно думаю, что «Путь диагностики PTS» заразителен в нашей организации, и за это я действительно могу просто поблагодарить всех, так как эта команда — лучшая в бизнесе сверху донизу.

Позиционирование для будущих вех
Факторы на глобальном рынке, например, где проводится тестирование и как быстро оплачиваются изменения, что делает важным быть гибким и опережать тенденции, учитывая, что мы проводим транзакции более чем в 140 страны.

Кроме того, мы должны вводить новшества не только из-за конкурентных сил, но и для удовлетворения потребностей мира, который требует лучшего доступа к технологиям. Высокоточные, стабильные, неохлаждаемые платформы, которые требуют минимального преданалитического взаимодействия и могут быть доставлены экономичным способом, имеют первостепенное значение в мире, в котором мы живем.Нам нужны более широкие меню и возможность передавать результаты множеству инструментов сбора данных, которые существуют сегодня и разрабатываются для будущего. Список дел ошеломляет, но именно поэтому эта отрасль — это взрыв, частью которого стоит стать.

Искреннее спасибо
От всего сердца я хотел бы поблагодарить всех, кто сделал возможным наш успех и посвятил себя тому, чтобы те, кто страдает хроническими заболеваниями, получали качество и эффективность ухода, которого они заслуживают.Важно помнить о реальном влиянии, которое оказывает наша компания, и использовать это в качестве мотивации для продолжения роста, внедрения инноваций и революций в нашей отрасли в течение следующих 25 лет.

Основные моменты БИЛЛА РАССЕЛЛА (28 очков 25 ребов) против БУЛЛС ДЖОРДАНА (ТВ-фильтр RETRO 2K21 B&W): NBA2k

БОСТОН — Быки 96-го и Майкл Джордан путешествуют во времени и месте, чтобы встретиться с Биллом Расселом и 1965-м. «Бостон Селтикс» в очень оборонительной игре.

Охват игры: https: // youtu.be / j_mRT6WyPNM

Это была игра с низкими показателями, так как «Буллз» вышли на первое место после 1-й четверти 22-17. Во второй четверти Билл Рассел был внутренним игроком, вернув «Селтикс» назад и выйдя вперед за 9 минут до конца. «Буллз» не забили первые 4 с половиной минуты и не забили с игры, пока Кукоч не забил 3. Медленная игра и жесткая защита продолжались. Джордан также боролся, бросая всего 5/12 из поля, но сделал достаточно бросков, чтобы вывести «Буллз» вперед со счетом 42–36 к перерыву.

У Джордана было 15 очков, чтобы лидировать среди всех бомбардиров после первого тайма. Между тем у Билла Рассела в игре был монстр с 12 очками и 12 ребами на половине.

В 3-й четверти ни одна из команд не вылетела. «Буллз» вставали раньше на целых 8, но «Селтикс» продолжали атаковать, а «быки» остыли. «Бостон» провел счет 10: 0 во главе с Джоном Хавличеком, который забил 8 очков при стрельбе 4/4 за этот период, что помогло «Бостону» вернуть себе лидерство. Джордан вернулся, чтобы спасти застоявшееся нападение «Буллз», и пошел в личном зачете 11: 4, чтобы довести «быков» до 6, выйдя на 4-е место, 60-54.

В 4-й четверти Скотти Пиппен и Тони Кукок наконец-то ожили, закрепив нападение Буллз, а MJ как обычно отдыхал. Они сумели бы получить 14 очков, чтобы помочь Быкам вырваться вперед на 10 пунктов несколько раз раньше. «Селтикс» не удалось добиться какого-либо ритма в атаке, и они смогли приблизиться только к пяти очкам. Но «Буллз» смогли увести их, понизили свой FT и ушли с победой.

У Джордана было 33 п. 4 реб. 4 асс. 2 ст. Пиппен добавил 21. Кукоч был на скамейке запасных 16.Родман не промахнулся на досках с 16 ребами

У Билла Рассела была игра-монстр с 28 очками, 25 ребами и 3 бланками. Джон Хавличек добавил 24.

Общий компонент СТВ HPr определяет предпочтение глюкозы перед маннитом

Преимущественное использование глюкозы по сравнению с маннитом не зависит от EIIA ^Glc

В настоящее время принятая модель CCR постулирует, что во время роста на дефосфорилированной глюкозе EIIA ^Glc препятствует транспорту и / или метаболизму менее предпочтительных сахаров, не относящихся к СТВ.Чтобы убедиться, что EIIA ^Glc не участвует в предпочтении глюкозы над сахарным маннитом PTS, мы провели тест предпочтения сахара на мутанте E. coli , удаленном из гена crr , кодирующего EIIA ^Glc (рис. 1). Известно, что глюкоза может переноситься либо PTS глюкозы, либо PTS маннозы (кодируется manXYZ ) в E. coli и других кишечных бактериях, хотя PTS маннозы может быть менее эффективным, чем PTS глюкозы в поглощении. и фосфорилирование глюкозы в E.coli ^7,11 . В то время как мутанты с дефектом глюкозы PTS ( crr и ptsG ) все еще могли ферментировать глюкозу и маннозу, мутанты с дефектами обоих PTS не могли расти на глюкозе или маннозе, что означает, что глюкоза может транспортироваться через PTS маннозы, когда глюкоза PTS была заблокирована ^11,12 . В соответствии с этим более ранним наблюдением, мутант crr мог расти на глюкозе, хотя его скорость роста была немного снижена по сравнению с изогенным штаммом MG1655 дикого типа (WT) (рис.1А, Б). Как сообщалось ранее ^10,13 , глюкоза была предпочтительнее маннита в штамме WT (рис. 1А). Интересно, что глюкоза все еще была предпочтительнее маннита у мутанта crr (рис. 1B). Таким образом, это наблюдение указывает на то, что предпочтительное использование глюкозы по сравнению с маннитом не связано с исключением индуктора с помощью EIIA ^Glc , а также исключает возможность того, что иерархическое использование среди сахаров PTS связано с конкуренцией между различными EII за фосфо-HPr ⁷ .

Рис. 1. Преимущественное использование глюкозы по сравнению с маннитом не зависит от мутации crr и цАМФ.

Дикий тип ( A , C ) и мутант с делецией crr ( B , D ) штамма E. coli K12 MG1655 выращивали в минимальной среде M9 с добавлением 0,04% глюкозы. и 0,08% маннита в отсутствие ( A , B ) и в присутствии ( C , D ) 5 мМ цАМФ при встряхивании при 200 об / мин.Затем измеряли скорости роста (оптическая плотность при 600 нм, серые линии с кружками) и концентрации сахаров (белые квадраты для глюкозы и закрашенные квадраты для маннита) в зависимости от времени инкубации, как описано в материалах и методах. раздел. Показаны репрезентативные данные трех независимых и воспроизводимых измерений.

Поскольку известно, что мутант crr поддерживает значительно более низкие уровни цАМФ по сравнению со штаммом WT ^14,15 , можно утверждать, что предпочтение глюкозы над маннитом у мутанта crr может быть связано со сниженной экспрессией оперон mtl , который, как известно, принадлежит регулону CRP ¹⁶ .Таким образом, мы проверили влияние предотвращения индукции на предпочтение глюкозы перед маннитом. Даже при добавлении экзогенного цАМФ к 5 мМ ингибирование глюкозой утилизации маннита все еще проявлялось как у WT, так и у мутантных штаммов crr (рис. 1C, D), даже несмотря на то, что добавление цАМФ немного снижало скорость роста два штамма, как сообщалось ранее ¹⁷ . Эти данные предполагают, что предотвращение индукции не отвечает за предпочтение глюкозы перед маннитом.Следует отметить, что предыдущие исследования также продемонстрировали, что добавление экзогенного цАМФ не препятствовало предпочтительному использованию глюкозы по сравнению с лактозой и мелибиозой, в то время как оно устраняло диауксиновую задержку ^18,19 .

Предпочтение глюкозы манниту достигается путем подавления MTL оперон

Оперон mtl состоит из mtlADR , где mltA кодирует пермеазу маннитола PTS (EIIABC ^Mtl ), а mtlD кодирует маннитол-1-фосфат-1-фосфат-фосфат-фосфат-1-фосфат-фосфат, превращающий маннитол-1-фосфат-5-маннитол-1-фосфат-де-фосфат-5-фосфат. -6-фосфат в обратимой реакции, и mtlR кодирует репрессор транскрипции оперона mtl ¹⁶ .Хотя у MtlR отсутствуют какие-либо известные ДНК-связывающие структурные мотивы и его связывание со специфическим оператором ДНК никогда не было показано, инактивация MtlR ведет к дерепрессии оперона mtl ^16,20 . Общепринято, что иерархическое использование источников углерода достигается путем подавления синтеза ферментов, необходимых для транспорта и / или метаболизма менее предпочтительных источников углерода в присутствии предпочтительного сахара ^2,3 . Например, у кишечных бактерий инактивация LacI снимает репрессию оперона lac и устраняет репрессию глюкозы ²¹ .Чтобы проверить, верно ли это также для предпочтения глюкозы перед маннитом, мы сконструировали мутант, лишенный MtlR. Как показано ранее ^10,22 , экспрессия mtlA была дерепрессирована в присутствии одного маннита, тогда как она подавлялась в присутствии глюкозы (фиг. 2A). Более того, глюкоза значительно снижала индуктивный эффект маннита на экспрессию mtlA . Таким образом, мы исследовали, приводит ли инактивация MtlR к дерепрессии оперона mtl и тем самым влияет на предпочтение глюкозы над маннитом таким же образом, как инактивация LacI устраняет глюкозно-лактозную диауксию.В то время как глюкоза резко снижала индуктивный эффект маннита на транскрипцию mtlA в штамме WT, этот эффект глюкозы полностью исчез в мутантном штамме mtlR (фиг. 2B). Это наблюдение привело нас к предположению, что предпочтительное использование глюкозы по сравнению с маннитом может быть связано с увеличением репрессорной активности MtlR в присутствии глюкозы. Чтобы проверить это предположение, мы сначала исследовали влияние мутации mtlR на предпочтение сахара.Как сообщалось ранее ^10,13 , глюкоза была предпочтительнее маннита в штамме WT (рис. 2С). Однако инактивация MtlR полностью отменила предпочтение глюкозы перед маннитом (фиг. 2D), подразумевая, что ингибирование глюкозой утилизации маннита достигается за счет усиления репрессии оперона mtl с помощью MtlR в присутствии глюкозы.

Фигура 2: Инактивация mtlR полностью устраняет глюкозозависимую репрессию оперона mtl и предпочтение глюкозы над маннитом.

( A , B ) Полная РНК была выделена из дикого типа ( A ) и мутанта с делецией mtlR ( B ) из E. coli MG1655, выращенных до ранней экспоненциальной фазы в среде LB или среда LB, содержащая указанные сахара (по 0,2% каждый при добавлении по отдельности или по 0,1% при добавлении в комбинации), и уровень экспрессии оперона mtl затем количественно определяли с помощью qRT-PCR, как описано в разделе «Материалы и методы». . Показаны репрезентативные данные (среднее ± стандартное отклонение) из трех независимых экспериментов (n = 3 в каждом).Статистическую значимость определяли с помощью теста Стьюдента t (*** P <0,001). Glc, глюкоза; Mtl, маннитол; Glc / Mtl, глюкоза + маннит. ( C , D ) Дикий тип ( C ) и мутант с делецией mtlR ( D ) E. coli MG1655 выращивали в минимальной среде M9 с добавлением 0,04% глюкозы и 0,04% маннита. . Затем измеряли скорости роста (оптическая плотность при 600 нм, серые линии с кружками) и концентрации сахаров (белые квадраты для глюкозы и закрашенные квадраты для маннита) в зависимости от времени инкубации.Эксперименты повторяли не менее трех раз с воспроизводимыми результатами.

Чтобы проверить влияние уровня экспрессии генов, необходимых для транспорта и метаболизма маннита, на иерархическое использование сахаров PTS, предпочтение сахаров было протестировано со штаммами WT, несущими вектор экспрессии, полученный из pBR322, для MtlA, MtlD или обоих ниже контроль конститутивного промотора cat pACYC184. Как и ожидалось, предпочтительное использование глюкозы по сравнению с маннитом наблюдалось у штамма WT, несущего pBR322 (дополнительный рис.2А). Однако, подобно мутанту, лишенному mtlR (фиг. 2D), предпочтение глюкозы было полностью отменено в штамме, конститутивно экспрессирующем только MtlA (дополнительная фиг. 2B). Конститутивная экспрессия только MtlD приводила к умеренной задержке роста, но минимально влияла на предпочтение глюкозы (дополнительный рис. 2С). Штамм, экспрессирующий как MtlA, так и MtlD, также демонстрировал замедленный рост, но предпочтение сахаров полностью изменилось в этом штамме (дополнительный рис. 2D).Хотя в настоящее время мы не можем объяснить причину задержки роста конститутивной экспрессией MtlD, наши результаты подтверждают, что предпочтение глюкозы над маннитом в E. coli обусловлено репрессией оперона mtl , особенно снижение экспрессии mtlA в присутствии глюкозы.

Дефосфорилированный HPr специфически взаимодействует с MtlR

Глюкозная репрессия оперона mtl может осуществляться либо путем регуляции самого MtlR, как показано для регуляции активности Mlc за счет взаимодействия, зависимого от состояния фосфорилирования, с глюкозной пермеазой PTS ^{EIICB . Glc 23,24 , или регулируя транспорт (с помощью MtlA) и / или метаболизм (с помощью MtlD) маннита, как показано на примере регуляции сахарных пермеаз посредством взаимодействия с EIIA , зависимым от состояния фосфорилирования, Glc 19 , 25 .Для поиска возможной мишени, опосредующей глюкозозависимую репрессию оперона mtl , мы сконструировали мутанты с делецией в рамке считывания каждого из генов оперона mtl . В то время как репрессия оперона mtlD глюкозой была отменена в штаммах с делецией mtlR и mtlA , она все еще сохранялась в мутантном штамме mtlD (дополнительный рисунок 3). Таким образом, мы исключили возможность MtlD как мишени, опосредующей репрессию глюкозы.}

Для дальнейшего точного определения конкретной мишени, опосредующей эффект глюкозы, были проведены эксперименты по ловле белкового лиганда с использованием MtlR с N-концом His ₆ и цитоплазматического домена MtlA ²⁶ в качестве приманки, как описано ранее ^{27,28 , 29,30,31,32} . Неочищенный лизат, приготовленный из клеток E. coli MG1655, смешивали с металлической аффинной смолой TALON (Clontech Laboratories, Inc.) в присутствии или в отсутствие His-меченой приманки, а затем подвергали анализу «вытягиванием».После коротких промывок белки, связанные со смолой, элюировали 150 мМ имидазолом. Анализ элюированных белков с помощью SDS-PAGE с последующим окрашиванием бриллиантовым синим кумасси показал, что белок, мигрирующий около стандарта белка 6,5 кДа, наблюдался только во фракции, содержащей His-MtlR в качестве приманки (дорожка 3 на фиг. 3A). Интересно, что мы не смогли обнаружить какой-либо белок, элюированный исключительно во фракции, содержащей MtlA (дорожка 1 на фиг. 3A). Фингерпринтинг пептидной массы с помощью анализа MALDI-TOF MS после расщепления трипсином в геле идентифицировал белок, специфически элюированный MtlR, как гистидинсодержащий белок-носитель фосфора HPr PTS.PTS-опосредованные регуляторные функции обычно основаны на зависимых от состояния фосфорилирования взаимодействиях с их белками-мишенями ^4,28,32 . Чтобы подтвердить специфическое взаимодействие между HPr и MtlR и проверить, может ли на это взаимодействие влиять состояние фосфорилирования HPr, мы очистили немаркированные MtlR и His-HPr. Поскольку точно установлено, что HPr может быть фосфорилирован in vitro путем инкубации с EI и PEP ³² , MtlR смешивали с EI и увеличивающимися количествами His-HPr в отсутствие или в присутствии PEP и подвергали воздействию сродства к металлу TALON. хроматография.Как показано на фиг. 3B, зависимое от концентрации взаимодействие MtlR наблюдалось в отсутствие, но не в присутствии PEP, что указывает на то, что только дефосфорилированная форма HPr может взаимодействовать с MtlR.

Фигура 3: Специфическое взаимодействие между дефосфорилированным HPr и MtlR.

( A ) Эксперимент по поиску белкового лиганда был проведен для поиска белка (ов), взаимодействующего с MtlR и цитозольной областью (остатки 348–637), покрывающей домены EIIA и EIIB MtlA. Клеточный лизат, полученный из E.coli MG1655, выращенная в 500 мл LB, была разделена на три аликвоты и смешана с буфером A (дорожка 2), 500 мкг очищенной цитозольной области MtlA с меткой His на N-конце (His-MtlA (цито), дорожка 1) и 400 мкг очищенного His-MtlR (дорожка 3) соответственно. Каждую смесь подвергали аффинной хроматографии с металлом TALON, и белки, связанные с колонкой, анализировали с помощью SDS-PAGE с использованием 4-20% градиентного геля (KOMABIOTECH) и окрашивали кумасси бриллиантовым синим R-250. Ezway ^TM Protein Blue MW Marker (KOMABIOTECH) использовали в качестве маркеров молекулярной массы (дорожка M).Полоса белка, специфически связанная с His-MtlR, указана красной стрелкой. ( B ) Немаркированный MtlR (200 мкг) смешивали с 5 мкг EI, 50 мкл металлоаффинной смолы TALON и различными количествами His-HPr (0, 100, 200 мкг) в отсутствие или в присутствии 2 мМ. PEP, как указано. Эти смеси затем подвергали анализу с понижающим содержанием для изучения специфичности взаимодействия между MtlR и HPr и его зависимости от состояния фосфорилирования HPr. После перемешивания в течение 10 минут при 4 ° C связанная с белком смола промывалась буфером A, содержащим 10 мМ имидазол, и элюировалась 50 мкл загрузочного буфера 2X SDS.Образцы элюированного белка (20 мкл каждый) вместе с белками MtlR и His-HPr анализировали с помощью 4–20% SDS-PAGE с последующим окрашиванием бриллиантовым синим кумасси R-250. Дорожка M обозначает Ezway ^TM Protein Blue MW Marker.

Для определения константы диссоциации (K _D ) связывания MtlR с HPr, HPr был иммобилизован на сенсорном чипе CM5, и различные концентрации MtlR были нанесены на поверхность HPr для проведения спектроскопии поверхностного плазмонного резонанса (SPR) с система BIAcore 3000 (GE Healthcare Life Sciences) ²⁸ .Сигнал SPR увеличивался в зависимости от концентрации MtlR (дополнительный рисунок 4). K _D для взаимодействия MtlR-HPr, определенный с использованием программного обеспечения BIAevaluation, составляет приблизительно 6,22 × 10 ^-8 M, предполагая взаимодействие 1: 1.

Чтобы подтвердить тесное взаимодействие между HPr и MtlR и определить стехиометрию связывания, мы сравнили профиль элюции из колонки для гель-фильтрации (Superose 12 10/300 GL; GE Healthcare Life Sciences) комплекса с профилями отдельных белков. (Дополнительный рис.5). Один только MtlR элюировался в виде симметричного пика при приблизительно 11,6 мл, что соответствует тетрамерной форме (мономер = приблизительно 22,0 кДа), тогда как HPr (приблизительно 9,1 кДа) элюировался при приблизительно 14,5 мл. Когда смесь MtlR и HPr подвергали гель-фильтрационной хроматографии, пик при приблизительно 11,6 мл смещался до приблизительно 11,3 мл с сопутствующим небольшим уменьшением пика при приблизительно 14,5 мл (дополнительный рис. 5A). Когда фракции гель-фильтрации анализировали с помощью SDS-PAGE, они элюировались приблизительно при 11.3 мл были разделены на две полосы, мигрирующие в положениях, ожидаемых для HPr и MtlR (дополнительный рис. 5B). Основываясь на интенсивности полос двух белков в этих фракциях, можно сделать вывод, что HPr взаимодействует с MtlR в соотношении 1: 1 и образует гетерооктамер. Низкое значение K _D , полученное с использованием системы BIAcore 3000, объясняет, что комплекс MltR-HPr был достаточно плотным, чтобы выжить во время гель-фильтрационной хроматографии. Взятые вместе, наши данные показывают, что только дефосфорилированная форма HPr специфически взаимодействует с MtlR в соотношении 1: 1 с образованием гетерооктамера.

Дефосфорилированный HPr ингибирует дерепрессию MTL оперон маннитола

Ранее мы показали, что HPr преимущественно находился в фосфорилированном состоянии в среде LB и среде LB, дополненной источником углерода, не относящимся к PTS, глицерином, тогда как он был почти полностью дефосфорилирован в присутствии глюкозы ³² . Поскольку HPr является основным компонентом PTS, обычно используемым для многих сахаров PTS, мы сначала исследовали состояние фосфорилирования HPr в присутствии различных сахаров PTS в минимальной среде M9 (рис.4А). Следует отметить, что, поскольку остаток гистидина, фосфорилированный в положении N1 в HPr, чрезвычайно нестабилен при pH <9,0 ^32,34 , воздействие на образцы pH <9,0 было минимизировано после того, как состояние фосфорилирования HPr было зафиксировано и клетки были лизируется в культуральной среде без какой-либо стадии сбора клеток путем добавления NaOH ³² . Несмотря на то, что HPr является общим для нескольких сахаров PTS, его состояние фосфорилирования значительно варьируется в зависимости от типа углеводов PTS.Для измерения влияния глюкозы на состояние фосфорилирования HPr и экспрессию оперона mtl клетки культивировали в минимальной среде M9, содержащей 0,04% глюкозы, 0,04% маннита или оба сахара. Хотя HPr существовал в основном в дефосфорилированной форме в присутствии глюкозы, приблизительно 61 и 56% белков HPr фосфорилировались в присутствии глицерина и маннита, соответственно (фиг. 4A). Когда клетки инкубировали в минимальной среде M9, содержащей как глюкозу, так и маннит (0.04% каждый), уровень фосфорилирования HPr в течение периода потребления глюкозы (OD ₆₀₀ ~ 0,15) был аналогичен уровню фосфорилирования клеток, выращенных в присутствии только глюкозы (фиг. 4A, B). Когда глюкоза была истощена в среде M9, дополненной как глюкозой, так и маннитом (OD ₆₀₀ ~ 0,6), однако, фосфорилирование HPr увеличивалось до уровня, аналогичного уровню клеток, выращенных в присутствии одного маннита (фиг. 4A, B). Затем, чтобы измерить влияние истощения глюкозы на экспрессию оперона mtl , с помощью qRT-PCR были определены уровни транскрипции mtlA в клетках, выращенных в среде M9, содержащей как глюкозу, так и маннит, на двух разных фазах роста (рис. .4С). На ранней фазе роста (OD _{, 600,} ~ 0,15) сахарная зависимость экспрессии mtlA в среде на основе M9 была аналогична той, которая наблюдалась в среде на основе LB, показанной на фиг. 2A. Однако после истощения запасов глюкозы (OD ₆₀₀ ~ 0,6) экспрессия оперона mtl была полностью индуцирована. Поскольку только дефосфорилированный HPr мог взаимодействовать с MtlR, а уровень дефосфорилированного HPr был значительно выше в присутствии глюкозы, чем в присутствии маннита, мы предположили, что глюкозная репрессия оперона mtl может осуществляться за счет увеличения активности MtlR. дефосфорилированным HPr.Чтобы проверить это предположение, мы сконструировали pACYC-h25A, вектор экспрессии на основе pACYC184 для нефосфорилируемой формы HPr (HPr (h25A)), управляемой промотором ptsH E. coli , и сравнили скорость роста и скорость роста mtl уровень экспрессии оперона между штаммами WT MG1655, несущими pACYC184 или pACYC-h25A (рис. 4D, E). Мы использовали штамм WT MG1655, несущий pACYC-h25A, чтобы сохранить минимальным возмущение клеточного уровня HPr дикого типа и только увеличить клеточный уровень нефосфорилированного HPr, что позволило бы упростить интерпретацию наших экспериментальных результатов.Штамм WT, несущий pACYC-h25A, демонстрировал аналогичную скорость роста со штаммом WT, несущим контрольный вектор в среде, содержащей глюкозу в качестве единственного источника углерода (сравните кривые, отмеченные открытыми символами на фиг. 4D), что указывает на то, что фосфотрансферазная активность WT HPr не оказывало значительного влияния на повышение уровня экспрессии мутантного HPr. Однако экспрессия HPr (h25A) значительно замедляет скорость роста штамма MG1655 в среде с добавлением маннита в качестве единственного источника углерода (сравните кривые, отмеченные закрашенными символами на рис.4D). Как показано на фиг. 4E, в штамме WT, трансформированном pACYC-h25A, экспрессия mtlA значительно снижалась в присутствии маннита. Следовательно, эти данные предполагают, что предпочтение глюкозы манниту достигается, по крайней мере, частично, за счет увеличения активности репрессора транскрипции MtlR дефосфорилированным HPr в присутствии глюкозы.

Рисунок 4: Дефосфорилированный HPr ингибирует дерепрессию оперона mtl маннитолом.

( A ) E.coli MG1655 выращивали на минимальной среде M9, содержащей указанные сахара (0,04% каждый). Состояние фосфорилирования HPr определяли, когда OD ₆₀₀ достигала 0,15, как описано в разделе «Материалы и методы». Очищенный HPr (2 нг) использовали в качестве положительного контроля. Интенсивность полос анализировали с использованием программного обеспечения Multi Gauge версии 3.0. В таблице под гелем показано процентное соотношение дефосфо-HPr к общему количеству HPr со средними значениями и стандартными отклонениями из трех независимых экспериментов.( B ) Состояние фосфорилирования HPr определяли в клетках E. coli MG1655, выращенных в минимальной среде M9, содержащей 0,04% глюкозы и 0,04% маннита, при OD ₆₀₀ 0,15 и 0,6. Очищенный HPr (2 нг) использовали в качестве положительного контроля. ( C ) E. coli MG1655 дикого типа культивировали, как в ( A ), и собирали при указанной OD ₆₀₀ . Затем уровень экспрессии mtlA количественно определяли с помощью qRT-PCR. Репрезентативные данные (среднее ± стандартное отклонение) из трех независимых экспериментов (n = 3 в каждом) показаны относительно данных, наблюдаемых в клетках, выращенных с глицерином (Gly), а статистическая значимость была определена с помощью теста Стьюдента t (*** P < 0.001). ( D ) Рост штамма MG1655, несущего контрольный вектор pACYC184 (квадратные символы) или pACYC-h25A, экспрессирующий нефосфорилируемую форму HPr (треугольные символы), контролировали в минимальной среде M9 с добавлением 0,2% глюкозы (белые символы) или маннита. (закрашенные символы) как единственный источник углерода при 37 ° C. ( E ) Штамм MG1655 дикого типа, несущий pACYC184 или pACYC-h25A, культивировали в минимальной среде M9, содержащей 0,2% маннита, собирали в ранней экспоненциальной фазе, и уровень транскрипта mtlA измеряли с помощью qRT-PCR.Показаны репрезентативные данные (среднее ± стандартное отклонение) из трех независимых экспериментов (n = 3 в каждом), а статистическая значимость была определена с помощью теста Стьюдента t (*** P <0,001).

Взаимодействие между HPr и MtlR определяет предпочтение глюкозы перед маннитом

Мы ожидали, что если взаимодействия между дефосфорилированным HPr и MtlR будет достаточно, чтобы придать предпочтение глюкозе над маннитом, мутантный HPr, который все еще сохраняет активность фосфотрансферазы, необходимую для транспорта как глюкоза, так и маннит, но они больше не могут взаимодействовать с MtlR, могут отменить предпочтение между глюкозой и маннитом.Таким образом, мы очистили несколько мутантных HPrs из нашей коллекции и исследовали их взаимодействие с MtlR с помощью металлической аффинной хроматографии TALON с использованием His-меченного MtlR в качестве приманки. Как показано на дополнительном рисунке 6, взаимодействие с MtlR было почти полностью устранено или значительно уменьшено для нескольких мутантных форм HPr (R17A, K27E, S46D и L47A / F48A), в то время как другие мутанты все еще сохраняли свои взаимодействия с MtlR до сопоставимый уровень с WT HPr. Остаток Arg17 рядом с сайтом фосфорилирования His15 является высококонсервативным, и предыдущее исследование показало, что все мутации в Arg17 приводили к нарушению фосфонесущей функции HPr с ферментом I ³⁴ .Остаток Ser46 также широко консервативен у грамположительных и грамотрицательных бактерий, и ранее было показано, что мутация Ser46 в Asp снижает фосфоакцепторную активность HPr из фермента I примерно в 2000 раз ³⁵ . Таким образом, мы исследовали, была ли нарушена активность фосфотрансферазы в K27E и L47A / F48A мутантах HPr путем определения скорости роста мутанта с делецией ptsH , несущего производный pACYC184 вектор экспрессии pACYC-HPr, pACYC-HPr (K27E). или pACYC-HPr (L47A / F48A) в среде M9, содержащей 0.2% глюкозы или маннита (рис. 5А, Б). Как сообщалось ранее ⁷ , мутант ptsH не рос в среде M9 с добавлением глюкозы или маннита. Экспрессия мутантного HPr L47A / F48A в транс может устранить дефект роста штамма с делецией ptsH в среде M9 с добавлением глюкозы, но не в среде, содержащей маннит. Поскольку экспрессия мутантного HPr L47A / F48A в мутанте с двойной делецией ptsH mtlR может частично устранить дефект роста на манните (дополнительный рис.7), наиболее вероятно, что уровень экспрессии MtlA в штамме mtlR ⁺ недостаточен для поддержки роста на манните с фосфотрансферазной активностью MtlA HPr (L47A / F48A). Мутантный штамм ptsH , несущий pACYC-HPr (K27E), показал скорость роста, аналогичную скорости роста мутантного штамма, несущего pACYC-HPr, в среде, содержащей глюкозу. Однако неожиданно оказалось, что мутантный штамм ptsH , несущий pACYC-HPr, показал значительно более медленную скорость роста, чем штамм, несущий pACYC-HPr (K27E), в минимальной среде M9, содержащей маннит, даже несмотря на то, что уровни экспрессии двух белков HPr были весьма схожими.Было показано, что увеличение дефосфорилированного HPr приводило к снижению экспрессии оперона mtl (фиг. 4C, E) и приблизительно 44% HPr существовали в дефосфорилированном состоянии в присутствии маннита (фиг. 4A). Таким образом, мы предположили, что более низкая скорость роста штамма, экспрессирующего HPr WT из многокопийной плазмиды pACYC184 по сравнению со штаммом, продуцирующим HPr (K27E) в среде, содержащей маннит, может быть связано с увеличением репрессорной активности MtlR за счет WT HPr дефосфорилируется во время транспорта маннита, но не HPr (K27E), который не может взаимодействовать с MtlR.Действительно, значительно большая репрессия экспрессии mtlA наблюдалась в штамме WT, сверхпродуцирующем HPr, чем в штамме, сверхпродуцирующем HPr (K27E), даже в присутствии маннита (вставка на фиг. 5B). Более медленный рост двойного мутанта ptsH mtlR , несущего pACYC-HPr (K27E), по сравнению с ростом двойного мутанта, несущего pACYC-HPr (дополнительный рисунок 7), ясно показывает, что HPr (K27E) не обладает более высокой активностью фосфотрансферазы MtlA. чем WT HPr. Таким образом, мы пришли к выводу, что более быстрый рост мутанта ptsH , несущего pACYC-HPr (K27E), по сравнению с ростом мутанта ptsH , несущего pACYC-HPr (рис.5B) исключительно из-за отсутствия его взаимодействия с MtlR. Затем, чтобы определить вклад тесного взаимодействия между дефосфорилированными HPr и MtlR в предпочтение глюкозы и маннита, эксперименты по предпочтению сахаров были выполнены со штаммами, гипер-продуцирующими HPr и HPr (K27E). Интересно, что в то время как глюкоза все еще была предпочтительнее маннита в штамме, несущем pACYC-HPr (фиг. 5C), предпочтение глюкозы было почти полностью отменено в штамме, несущем pACYC-HPr (K27E) (фиг.5D), и этот штамм потреблял глюкозу и маннит одновременно, как и мутант с делецией mtlR (фиг. 2D). Эти данные указывают на то, что взаимодействия между дефосфорилированным HPr и MtlR достаточно, чтобы дать глюкозе предпочтение перед маннитом. Взятые вместе, данные этого исследования показывают, что более высокий уровень дефосфорилированной формы общего компонента PTS HPr накапливается в присутствии более подходящего сахара, а дефосфорилированный HPr определяет предпочтение между сахарами PTS, глюкозой и маннитом, путем ингибирования индукции. генов, необходимых для транспорта и метаболизма менее предпочтительного сахарного маннита, посредством прямого взаимодействия с репрессором маннитового оперона MtlR.

Рис. 5. Взаимодействие между HPr и MtlR достаточно, чтобы дать глюкозе предпочтение перед маннитом.

( A , B ) Рост мутанта с делецией ptsH , несущего производный от pACYC184 вектор экспрессии для HPr дикого типа (pACYC-HPr, закрашенные ромбики), pACYC-HPr (K27E) (закрашенные треугольники) или pACYC-HPr (L47A / F48A) (белые квадраты) в среде M9, содержащей 0,2% глюкозы ( A ) или 0,2% маннита ( B ). Рост мутанта с делецией ptsH (светлые кружки) показан в качестве отрицательного контроля.На вставке на панели ( B ) показан уровень экспрессии mtlA , измеренный с помощью qRT-PCR в мутанте с делецией ptsH , несущем pACYC-HPr (K27E), относительно уровня экспрессии в штамме, несущем pACYC-HPr. ( C , D ) Штамм с делецией ptsH , несущий pACYC-HPr ( C ) или pACYC-HPr (K27E) ( D ), выращивали в минимальной среде M9 с добавлением 0,04% глюкозы и 0,04%. маннитол. Скорость роста (оптическая плотность при 600 нм, серые линии с кружками) и концентрации сахаров (белые квадраты для глюкозы и закрашенные квадраты для маннита), оставшиеся в среде, измеряли как функцию времени инкубации.Показаны репрезентативные данные трех независимых и воспроизводимых измерений.

Остин Ривз набрал 21 очко, # 25 Оклахома обыграла штат Айова в 1-м раунде Big 12

КАНЗАС-СИТИ, Миссури (AP) — Остин Ривз набрал 11 из 21 очка в заключительные минуты, помогая № 25 из Оклахомы ответить Айове Стэйт поздно забегает и удерживается в победе со счетом 79-73 в среду вечером в первом раунде турнира Big 12.

Де’Вион Хармон прибавил 18 очков, а у Элайджи Харклесса 12 очков.Оклахома с 7 семенами (15-9), у которой отрыв на 19 очков сократился до 75-71 за последние секунды до того, как Ривз закрепил важную победу в своих надеждах на турнир NCAA на линии фола.

The Sooners, проигравшие четыре раза подряд, сыграют 11-ю позицию в Канзасе за место в полуфинале в четверг вечером.

Расир Болтон набрал 18 очков, а Джален Коулман-Лэндс набрал 14 очков в семействе Cyclones № 10 (2-22), который стал действующим чемпионом на основании своего титула 2019 года, но вернулся к Эймсу с 18-м поражением подряд. конец сезона.

Циклоны, которые не выиграли с тех пор, как 20 декабря обыграли Джексонвилл Стэйт, держались до тех пор, пока Оклахома не начала наращивать преимущество в перерыве между таймами. «Сунеры» воспользовались преимуществом трех последовательных смен, чтобы начать свою атаку: Харклесс обеспечил вращающуюся паузу в переходе, а Кур Куат сделал обратный данк союзнику.

К тому времени, как Болтон завершил серию, преимущество Сунерс увеличилось до 51–34 за 12 минут до конца.

В конечном итоге он достиг 19, прежде чем «Циклоны» совершили последний заезд в последние минуты.Болтон и Коулман-Лэндс нанесли основной урон, воспользовавшись внезапно небрежным нападением Оклахомы, чтобы сорвать 11 очков подряд.

Но с уменьшенным отрывом до 58-51, Сунерс обратились к Ривзу, который первым сбил с ног прыгуна шаг назад, прежде чем ответить на трехочковый Коулман-Лэндса своим собственным. И когда Айова Стэйт продолжал получать корзины на последних секундах, Ривз и Харклесс ответили твердым лидерством и выдержкой на линии фола.

Это позволило Sooners сохранить свою первую победу в турнире Big 12 с 2016 года.

БОЛЬШОЕ ИЗОБРАЖЕНИЕ

Штат Айова хромал домой после окончания, возможно, худшего сезона в истории школы. По общему количеству проигрышей Cyclones уступала только команде 1975-76, которая шла со счетом 3-24, хотя у той команды, которую тренировал Кен Трики, был лучший процент побед. Попутно Cyclones присоединились к команде 1936-37 как единственные, кто проиграл в конференции.

Оклахома в какой-то момент попала в топ-10, но его спад в конце сезона оставил Sooners нуждаться как минимум в победе в среду вечером, чтобы почувствовать себя лучше в своих надеждах на турнир NCAA.Теперь они могут почти запереть койку, одержав победу над Джейхоксом, который не набирает обороты, которому не хватает Дэвида МакКормака и Тристана Энаруны из-за протоколов COVID-19.